目的检测活化的蛋白激酶C受体1(RACK1)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈癌组织中的表达并探讨其病理学意义。方法选取2014年6月至2018年6月于本院行手术切除并经病理确诊的85例宫颈癌组织样本及其对应的癌旁组...目的检测活化的蛋白激酶C受体1(RACK1)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈癌组织中的表达并探讨其病理学意义。方法选取2014年6月至2018年6月于本院行手术切除并经病理确诊的85例宫颈癌组织样本及其对应的癌旁组织,通过免疫组织化学染色ABC法分别检测RACK1、HIF-1α、VEGF蛋白在宫颈癌组织及其癌旁组织中的表达。结合患者的临床病理资料,分析宫颈癌组织中RACK1、HIF-1α和VEGF蛋白表达与患者年龄及肿瘤直径、浸润深度、病理分级、淋巴结转移之间的关系,并分析三者表达之间的相关性。结果RACK1、HIF-1α、VEGF蛋白在宫颈癌组织中的表达均高于癌旁组织(P均<0.05),阳性表达率分别为81.2%(69/85)、63.5%(54/85)、89.4%(76/85)。RACK1表达与肿瘤浸润深度、病理分级和淋巴结是否转移有关(P均<0.05),HIF-1α和VEGF表达均与肿瘤直径、浸润深度、病理分级及淋巴结是否转移有关(P均<0.05)。RACK1、HIF-1α、VEGF蛋白的表达两两之间呈正相关(RACK1 vs HIF-1α:r=0.523,P=0.0439;RACK1 vs VEGF:r=0.428,P=0.0337;HIF-1αvs VEGF:r=0.689,P=0.0245)。结论RACK1、HIF-1、VEGF蛋白在宫颈癌组织中高表达且三者之间的表达呈正相关,提示其可能在肿瘤的发生、发展过程中起协同作用,可作为判断肿瘤侵袭、转移及预后的重要指标。展开更多
目的探究抑制Polo样蛋白激酶1(Polo-likekinase1,PLK1)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK细胞)对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)的杀伤作用,并初步探究其作用机制。方法Ficoll密度梯度...目的探究抑制Polo样蛋白激酶1(Polo-likekinase1,PLK1)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK细胞)对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)的杀伤作用,并初步探究其作用机制。方法Ficoll密度梯度离心法分离健康志愿者外周血单个核细胞,诱导生成CIK细胞并鉴定;使用不同浓度PLK1抑制剂BI-2536处理MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞存活率;以MDA-MB-231细胞作为靶细胞,CIK细胞为效应细胞,MTT法检测不同效靶比下细胞存活率;再以BI-2536联合CIK细胞处理MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡水平,蛋白质印迹法测定细胞内胱天蛋白酶(caspase)-3与caspase-9蛋白活性;构建TNBC裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、BI-2536组、CIK组和BI-2536+CIK组,按照分组对裸鼠进行处理后,每隔2d测量瘤体,21d后处死裸鼠称重瘤体,苏木精-伊红染色观察肿瘤组织内细胞生长情况,免疫组织化学染色检测肿瘤组织内细胞增殖标记物Ki-67及caspase-3、caspase-9蛋白阳性表达情况。结果与诱导前比较,诱导后CIK细胞亚群中CD3^(+)CD8^(+)和CD3^(+)CD56^(+)细胞比例均增高,CD3^(+)CD4^(+)细胞比例减少(P<0.05);不同浓度BI-2536作用下的MDA-MB-231细胞存活率均下降,不同效靶比的CIK细胞作用下的MDA-MB-231细胞存活率也下降(P<0.05);相较于单独BI-2536或CIK细胞处理,BI-2536和CIK细胞联合作用后细胞存活率下降,细胞凋亡率升高,caspase-3与caspase-9蛋白活性增加(P<0.05)。裸鼠移植瘤模型实验发现,BI-2536和CIK细胞联合作用能够抑制肿瘤组织生长,肿瘤质量减小,肿瘤组织内细胞排列稀疏且增殖受抑制,Ki-67阳性率降低,caspase-3和caspase-9阳性率均增加(P<0.05)。结论使用PLK1抑制剂BI-2536联合CIK细胞能够在体外和体内抑制TNBC肿瘤细胞增殖,并提高对肿瘤细胞的杀伤作用,该机制可能与激活caspase依赖性途径有关。展开更多
文摘目的检测活化的蛋白激酶C受体1(RACK1)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈癌组织中的表达并探讨其病理学意义。方法选取2014年6月至2018年6月于本院行手术切除并经病理确诊的85例宫颈癌组织样本及其对应的癌旁组织,通过免疫组织化学染色ABC法分别检测RACK1、HIF-1α、VEGF蛋白在宫颈癌组织及其癌旁组织中的表达。结合患者的临床病理资料,分析宫颈癌组织中RACK1、HIF-1α和VEGF蛋白表达与患者年龄及肿瘤直径、浸润深度、病理分级、淋巴结转移之间的关系,并分析三者表达之间的相关性。结果RACK1、HIF-1α、VEGF蛋白在宫颈癌组织中的表达均高于癌旁组织(P均<0.05),阳性表达率分别为81.2%(69/85)、63.5%(54/85)、89.4%(76/85)。RACK1表达与肿瘤浸润深度、病理分级和淋巴结是否转移有关(P均<0.05),HIF-1α和VEGF表达均与肿瘤直径、浸润深度、病理分级及淋巴结是否转移有关(P均<0.05)。RACK1、HIF-1α、VEGF蛋白的表达两两之间呈正相关(RACK1 vs HIF-1α:r=0.523,P=0.0439;RACK1 vs VEGF:r=0.428,P=0.0337;HIF-1αvs VEGF:r=0.689,P=0.0245)。结论RACK1、HIF-1、VEGF蛋白在宫颈癌组织中高表达且三者之间的表达呈正相关,提示其可能在肿瘤的发生、发展过程中起协同作用,可作为判断肿瘤侵袭、转移及预后的重要指标。
文摘目的探究抑制Polo样蛋白激酶1(Polo-likekinase1,PLK1)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK细胞)对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)的杀伤作用,并初步探究其作用机制。方法Ficoll密度梯度离心法分离健康志愿者外周血单个核细胞,诱导生成CIK细胞并鉴定;使用不同浓度PLK1抑制剂BI-2536处理MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞存活率;以MDA-MB-231细胞作为靶细胞,CIK细胞为效应细胞,MTT法检测不同效靶比下细胞存活率;再以BI-2536联合CIK细胞处理MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡水平,蛋白质印迹法测定细胞内胱天蛋白酶(caspase)-3与caspase-9蛋白活性;构建TNBC裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、BI-2536组、CIK组和BI-2536+CIK组,按照分组对裸鼠进行处理后,每隔2d测量瘤体,21d后处死裸鼠称重瘤体,苏木精-伊红染色观察肿瘤组织内细胞生长情况,免疫组织化学染色检测肿瘤组织内细胞增殖标记物Ki-67及caspase-3、caspase-9蛋白阳性表达情况。结果与诱导前比较,诱导后CIK细胞亚群中CD3^(+)CD8^(+)和CD3^(+)CD56^(+)细胞比例均增高,CD3^(+)CD4^(+)细胞比例减少(P<0.05);不同浓度BI-2536作用下的MDA-MB-231细胞存活率均下降,不同效靶比的CIK细胞作用下的MDA-MB-231细胞存活率也下降(P<0.05);相较于单独BI-2536或CIK细胞处理,BI-2536和CIK细胞联合作用后细胞存活率下降,细胞凋亡率升高,caspase-3与caspase-9蛋白活性增加(P<0.05)。裸鼠移植瘤模型实验发现,BI-2536和CIK细胞联合作用能够抑制肿瘤组织生长,肿瘤质量减小,肿瘤组织内细胞排列稀疏且增殖受抑制,Ki-67阳性率降低,caspase-3和caspase-9阳性率均增加(P<0.05)。结论使用PLK1抑制剂BI-2536联合CIK细胞能够在体外和体内抑制TNBC肿瘤细胞增殖,并提高对肿瘤细胞的杀伤作用,该机制可能与激活caspase依赖性途径有关。
