miR-155靶向PTEN-PI3KAKT通路促进鼻咽癌细胞增殖并抑制其凋亡的实验研究

目的:研究miR-155靶向PTEN-PI3KAKT通路促进鼻咽癌细胞增殖并抑制其凋亡的作用机制。方法:选取105只成年健康SD雄性大鼠作为研究对象,将其以随机抽签法等分成观察组、对照组、试验组,每组35只。所有大鼠通过诱癌剂二甲硝基哌嗪腋部皮下注射以及促癌剂佛波醇酯皮下注射进行鼻咽癌大鼠模型的建立。观察组大鼠予以miR-155抑制剂干预,试验组予以PI3K抑制剂干预,对照组不予以任何干预。以实时荧光定量PCR法检测miR-155相对表达量,采用免疫组化法检测PTEN、PI3K、P-AKT表达情况,通过Western blot法检测Bcl-2、Bax、Ezrin蛋白表达水平。比较三组大鼠上述相关指标水平,并作相关性分析。结果:试验组、观察组、对照组大鼠的miR-155相对表达量分别为(34.88±1.32)、(29.72±1.23)、(35.01±1.34),观察组显著低于试验组和对照组,差异明显(F=23.105,P=0.000)。试验组、观察组、对照组大鼠PTEN表达率逐渐升高,而PI3K、P-AKT表达率逐渐降低(均P<0.05)。经Pearson相关性分析可得:鼻咽癌大鼠miR-155相对表达量与PTEN表达率呈正相关关系,而与PI3K、P-AKT表达率呈负相关关系(均P<0.05)。试验组、观察组、对照组Bcl-2、Ezrin蛋白表达水平呈逐渐升高趋势,而Bax蛋白表达水平呈逐渐减低趋势,且经单因素方差分析发现:各组间对比差异显著(均P<0.05)。结论:miR-155可能是通过靶向作用于PTEN-PI3KAKT信号通路,继而发挥促进鼻咽癌细胞增殖以及抑制鼻咽癌细胞凋亡的作用。临床工作中可能将其作为鼻咽癌治疗的新靶点。

解毒胶囊干预乳腺癌阿霉素耐药PTEN-PI3K/AKT信号通路的进展及机制

该文对解毒胶囊治疗乳腺癌的机制进行了研究,主要从阿霉素耐药PTEN-PI3K/AKT信号通路进行分析探讨,综述了解毒胶囊对乳腺癌阿霉素耐药的近况以及研究进展,说明了解毒胶囊干预乳腺癌阿霉素耐药具有很好的发展前景。

葛根素介导PTEN-PI3K-AKT信号通路抑制绝经后骨质疏松症的机制研究

目的观察葛根素对去卵巢骨质疏松症小鼠骨组织形态的影响以及PTEN-PI3K-AKT信号通路的变化情况,并探讨其分子机制。方法选取10~12周龄,体重约20~25 g的C57BL/6雌性小鼠24只,随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(Ovx)、葛根素组(Pue)。术后8周,鉴定为骨质疏松模型后开始给药干预,连续给药12周,每组随机取6只小鼠采取颈椎脱臼法处死。取左侧股骨进行Micro-CT扫描并通过real-time PCR法检测骨组织内PTEN、Foxo1、catalase基因的相对表达量。取右侧股骨制成石蜡切片观察其形态结构并采用免疫组化方法观察骨组织中PTEN、P-AKT、catalase蛋白的表达情况。结果术后8周Ovx组,小鼠子宫萎缩变小、骨组织HE染色骨小梁明显稀疏、Micro-CT骨小梁断裂明显。给药后,Pue组骨小梁增多、骨髓腔缩小,骨连接增多;PCR结果表明,葛根素干预后PTEN、Foxo1、catalase基因表达上调(P<0.05,差异有统计学意义);免疫组化结果表明,PTEN、catalase蛋白表达上调,P-AKT蛋白下调,但变化差异不明显。结论葛根素可能通过介导PTEN-PI3K-AKT信号通路抑制绝经后骨质疏松症。

灭幽汤对幽门螺杆菌相关性胃炎脾胃湿热证小鼠PTEN-PI3K-Akt-FoxO凋亡信号通路的影响

目的观察灭幽汤对幽门螺杆菌相关性胃炎脾胃湿热证小鼠胃组织中PTEN、PI3K、p-Akt、Akt、FoxO3a蛋白及mRNA表达的影响,探讨灭幽汤治疗脾胃湿热证可能的作用机制。方法将60只BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、灭幽汤低剂量组、灭幽汤中剂量组、灭幽汤高剂量组、胃四联组,每组10只。除对照组外,其余组均采用复合病因方法造模。造模成功后,对照组和模型组小鼠给予蒸馏水灌胃,1次/d;灭幽汤低、中、高剂量组小鼠分别给予灭幽汤6.2 g/kg、12.4 g/kg、24.8 g/kg灌胃,1次/d;胃四联组小鼠给予泮托拉唑肠溶胶囊+枸橼酸铋钾片+替硝唑片+克拉霉素片280.6 mg/kg灌胃,早晚各1次。各组均连续灌胃14 d,观察各组小鼠一般情况。灌胃结束后,HE染色观察胃黏膜组织病理学表现,TUNEL法检测胃黏膜细胞凋亡情况,采用Western blot法检测胃组织中PTEN、PI3K、p-Akt、FoxO3a蛋白表达情况,采用RT-PCR法检测胃组织中PTEN、PI3K、Akt、FoxO3a mRNA表达情况。结果模型组小鼠出现懒动、食欲下降、皮毛松弛无光泽、体质量减轻、肛温升高,胃黏膜组织HE染色表现为慢性浅表性胃炎;胃四联组、灭幽汤中剂量组、灭幽汤高剂量组小鼠给予相应药物灌胃后各种临床表现均好转,体质量较模型组稍有增加,胃黏膜组织病理改变明显好转;灭幽汤低剂量组小鼠灌胃后症状、病理改变较之模型组没有显著变化。模型组胃黏膜细胞大量凋亡,除灭幽汤低剂量组外,其余药物干预组细胞凋亡情况较模型组显著减少。模型组小鼠胃组织中PTEN、FoxO3a蛋白及mRNA表达水平均明显高于对照组(P均<0.01),PI3K、p-Akt蛋白及PI3K、Akt mRNA表达水平均明显低于对照组(P均<0.01);胃四联组、灭幽汤中剂量组、灭幽汤高剂量组小鼠胃组织中PTEN、FoxO3a蛋白及mRNA表达水平均明显低于模型组(P均<0.01),PI3K、p-Akt蛋白及PI3K、Akt mRNA表达水平均明显高于模型组(P均<0.01);灭幽汤中剂量组、灭幽汤高剂量组小鼠胃组织中PTEN、FoxO3a蛋白及mRNA表达水平均明显高于胃四联组(P均<0.01),PI3K、p-Akt蛋白及PI3K、Akt mRNA表达水平均明显低于胃四联组(P均<0.01),灭幽汤中剂量组与灭幽汤高剂量组各指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论灭幽汤可能通过PTEN-PI3K-Akt-FoxO信号通路抗幽门螺杆菌诱导的胃黏膜细胞凋亡而发挥治疗幽门螺杆菌相关性胃炎脾胃湿热证的作用。

芪杉胶囊对肺癌A549细胞PI3KAKt信号通路影响的研究

目的:观察芪杉胶囊对肺癌A549细胞PI3KAKt信号通路的影响。方法:分别运用MTT法检测含药血清对A549细胞增殖的影响;Annexin V-PE/7-AAD双染法检测含药血清对A549细胞凋亡的影响;Western-blot法检测含药血清对A549细胞凋亡相关蛋白表达的影响;RT-PCR法检测含药血清对A549细胞凋亡相关基因表达的影响。结果:芪杉胶囊含药血清高、中、低剂量组分别作用于A549细胞时,均表现为抑制细胞增殖作用,其抑制率分别为24.26%,16.44%和10.89%,含药血清浓度越大,对细胞的抑制作用越显著。与空白组相比,芪杉胶囊含药血清高、中、低剂量组及顺铂组细胞凋亡率显著升高,且含药血清浓度越大,对细胞凋亡的作用越显著。芪杉胶囊含药血清高、中、低剂量组及顺铂组Caspase-3、Caspase-9、Cytochrome c、AKT、m TOR及PI3K蛋白和基因相对表达量与空白组相比,表达量降低,且含药血清浓度越大,对A549细胞凋亡相关蛋白和基因表达的影响越显著。结论:芪杉胶囊通过影响A549细胞凋亡相关Caspase-3、Caspase-9、Cytochrome c、AKT、m TOR及PI3K蛋白和基因表达,从而抑制细胞增值、促进细胞凋亡。

异芒果苷通过调节PTEN-PI3K-AKt-mTOR通路抑制恶性胶质瘤的恶性行为

目的 探索异芒果苷对恶性胶质瘤细胞U251的抑制作用及可能机制。方法 常规培养U251细胞,以一定浓度梯度的异芒果苷与U251细胞共孵育,MTT法检测细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测集落形成能力,Transwell小室迁移和侵袭实验检测纵向迁移能力,划痕实验检测横向迁移能力,western blot实验检测PTENPI3K-AKt-mTOR通路的变化,PTEN-siRNA予以验证。结果 与一定浓度梯度的异芒果苷共孵育后,MTT法检测发现U251细胞的增殖能力以时间依赖性和浓度依赖性下降,平板克隆形成实验检测发现U251细胞的集落形成能力浓度依赖性下降,Transwell小室迁移和侵袭实验检测发现U251细胞的纵向迁移和侵袭能力浓度依赖性下降,划痕实验发现U251细胞的横向迁移能力浓度依赖性下降,免疫印迹检测发现,PTEN表达呈浓度依赖性上调,而磷酸化的PI3K、磷酸化的AKt及磷酸化的mTOR呈浓度依赖性下降。PTEN-siRNA沉默PTEN可抵消异芒果苷的抑制作用。结论 异芒果苷可以抑制恶性胶质瘤U251细胞的恶性生物学行为,作用机制与调控PTEN-PI3K-AKtmTOR通路有关。

番茄红素对脑缺血再灌注大鼠海马神经元PTEN-PI3K/Akt信号通路的影响

目的:探讨番茄红素对脑缺血再灌注(IR)大鼠海马神经元PTEN-PI3K/Akt信号通路的影响。方法:36只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、番茄红素组,每组12只。除假手术组外,余2组线栓法制备脑IR模型。建模成功第2天开始,番茄红素组按10 mg/kg灌胃番茄红素1次/12 h,假手术组和模型组灌胃等剂量玉米油。治疗7 d后,制备脑组织冠状切片,TTC染色观察脑梗死面积;取海马组织行HE染色,TUNEL染色法检测海马神经元凋亡情况,Western blot法测定海马组织中PI3K、p-Akt、PTEN、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠脑梗死面积和凋亡细胞增加,海马组织中PTEN、Bax表达水平升高,PI3K、p-Akt、Bcl-2表达水平降低(P<0.05)。与模型组比较,番茄红素组脑梗死面积和凋亡细胞减少,海马组织中PTEN、Bax表达水平降低,PI3K、p-Akt、Bcl-2表达水平升高(P<0.05)。结论:番茄红素能够抑制IR大鼠海马神经元的凋亡,其作用可能与抑制PTEN表达,激活PI3K/Akt信号通路有关。

银杏内酯B对体外培养神经干细胞内HIF-1α及PI3K/Akt信号通路的影响

目的探讨银杏内酯B(GKB)对体外培养神经干细胞(NSCs)内低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/Akt信号通路表达的影响。方法在建立谷氨酸对神经干细胞损伤的模型基础上,给予银杏内酯B、PI3K/Akt特异性抑制剂wortmannin进行干预,将实验分为两大组:即正常细胞组、谷氨酸损伤组,各组下又分为4个小组:(1)GKB组;(2)对照组;(3)wortmannin+GKB组;(4)wortmannin组。采用Western blot印迹来检测各组NSCs中HIF-1α、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白水平的表达。结果无论正常细胞组还是谷氨酸损伤细胞组,NSCs经GKB处理后HIF-1α、p-Akt表达均较对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);经wortmannin处理后HIF-1α、p-Akt蛋白表达受抑制,较对照组明显减弱(P<0.05);wortmannin+GKB组和wortmannin组比较,HIF-1α、p-Akt表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCs经谷氨酸处理后,HIF-1α、p-Akt表达较未受损的NSCs表达增强(P<0.05)。结论银杏内酯B是神经干细胞保护作用机制之一,可能与激活PI3K/Akt信号通路、进一步上调HIF-1α表达有关。

淫羊藿素通过PI3K/AKT信号通路抑制非小细胞肺癌H460细胞增殖

目的:探讨淫羊藿素(icaritin)通过PI3K/AKT信号通路对非小细胞肺癌H460细胞增殖的影响。方法:采用MTT比色实验检测,不同浓度(0、5、10、20、40、80μmol/L)淫羊藿素处理H460细胞24、48、72h后细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测不同浓度淫羊藿素对H460细胞凋亡的影响,Western blot实验检测不同浓度淫羊藿素对H460细胞中PI3K、AKT、p-AKT、Cleaved-Caspase-9蛋白质表达水平的影响。结果:淫羊藿素可抑制非小细胞肺癌H460细胞的增殖,并表现为剂量和时间依赖性(P<0.05)。0、5、10、20μmol/L淫羊藿素处理H460细胞24 h后,H460细胞凋亡率分别为(4.90±1.20)%、(13.5±2.32)%、(16.47±1.90)%和(27.43±3.15)%,P<0.05。淫羊藿素可下调PI3K、AKT的表达水平,降低AKT的磷酸化(p-AKT)水平,上调Cleaved-Caspase-9表达水平(P<0.05)。结论:淫羊藿素可能通过抑制PI3K/AKT信号通路激活,抑制H460细胞增殖。

脓毒症心肌抑制大鼠PTEN-PI3K-Akt信号通路的激活对心肌组织损伤及凋亡的影响

目的探讨脓毒症心肌抑制大鼠心肌组织PTEN-PI3K-Akt信号通路的激活对大鼠心肌组织损伤及细胞凋亡的影响.方法采用盲肠结扎穿孔术构建脓毒症心肌抑制大鼠模型,并分成对照组、模型组及BPV干预组,每组10只.采用RT-PCR及Western blot检测心肌组织PTEN-PI3K-Akt信号通路关键因子磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、Akt-1、Cyclin D1 mRNA及蛋白的表达,采用TUNEL法检测心肌组织细胞凋亡情况,采用HE染色观察不同组大鼠心肌组织结构.结果BPV干预组PTEN基因的mRNA及蛋白表达量较模型组下降(P<0.05),同时PI3K-Akt信号通路PI3K、Akt、Akt-1、Cyclin D1的mRNA及蛋白表达量上升(P<0.05);BPV干预组心肌组织细胞的凋亡率低于模型组(P<0.05).正常组大鼠心肌细胞结构整齐,无病理迹象;模型组大鼠心肌细胞呈现脓毒症心肌抑制的典型损伤特征;BPV干预组心肌损伤有所改善.结论激活PTEN-PI3K-Akt信号通路有助于减少细胞凋亡,改善心肌损伤.

黄连-大黄-肉桂复方对肝癌细胞增殖及PTEN-PI3K-AKT/SGK1信号通路的影响

目的:观察黄连-大黄-肉桂复方对肝癌细胞增殖的抑制作用,并探索其作用机制。方法:采用醇提法提取黄连-大黄-肉桂复方药液,观察药物作用24 h后SMMC-7721人肝癌细胞株细胞形态的改变;通过MTT法检测不同浓度药物作用24 h、48 h和72 h对肝癌细胞增殖的影响;采用RTq PCR法检测肝癌细胞PTEN、AKT和SGK1基因的mRNA表达。结果:较低浓度的黄连-大黄-肉桂复方作用24 h对肝癌细胞的形态影响较小,而浓度增至2.1 mg/ml可使肝癌细胞部分固缩,大多细胞凋亡,其对肝癌细胞的恶性增殖具有显著抑制作用,并存在时效和量效关系,0.5 mg/ml药物作用48 h即可致肝癌细胞增殖半数得到抑制;药物作用后AKT mRNA表达明显降低,PTEN mRNA表达上调、SGK1 mRNA表达降低。结论:黄连-大黄-肉桂复方能有效抑制肝癌细胞的恶性增殖,且具有时效和量效关系;其抑制作用可能与调节细胞PTEN-PI3K-AKT/SGK1信号转导通路有关。

抑癌候选基因NDRG2对PTEN-PI3K/AKT信号通路的调节作用

研究发现NDRG2具有多方面的抑癌作用,然而其背后的确切机制我们却知之甚少,经典的信号通路PI3K/AKT与肿瘤的发生发展有密切关系,了解NDRG2与PI3K/AKT信号通路的关系,可为进一步探究NDRG2的抑癌机制提供线索和思路。

从PTEN-PI3K-AKT信号通路探讨补肾疏肝方含药血清抑制人肺腺癌A549细胞增殖和转移的机制

目的:通过研究补肾疏肝方含药血清对PTEN-PI3K-AKT信号通路的影响,探讨补肾疏肝方抑制肺腺癌细胞增殖和转移作用机制。方法:大鼠60只,随机分为6组,每组10只,分别为生理盐水组(NS为2 m L),顺铂组(8 mg·kg-1),补肾疏肝方低剂量组(15 g·kg-1),补肾疏肝方高剂量组(30 g·kg-1),联合顺铂低剂量组(15 g·kg-1+8 mg·kg-1),联合顺铂高剂量组(30 g·kg-1+8 mg·kg-1),每只大鼠ig,2 m L,每天2次,共5 d。制备药物血清:经药物作用后的大鼠,经腹主动取血,分离血清,灭活,过滤,冻存。MTT法检测补肾疏肝方含药血清对A549细胞增殖的影响。三维细胞培养观察并计数各组细胞形成管状结构数量。RT-PCR检测含药血清对A549肺腺癌细胞AKT-1,Cyclin D1,NF-κB mRNA水平的表达,Western blot检测含药血清对PTEN,p-PI3K,p-AKT蛋白水平的表达。结果:低剂量补肾疏肝方含药血清对A549细胞有抑制作用,低剂量中药与顺铂联用有协同作用且以时间依赖方式,即补肾疏肝方低剂量组与联合顺铂低剂量组在48,72,96 h的抑制率均高于其他组(P<0.05,P<0.01);补肾疏肝方低剂量组与联合顺铂低剂量组拟态血管数目均低于其他组(P<0.05,P<0.01);补肾疏肝方低剂量组与联合顺铂低剂量组PTEN蛋白表达均高于其他组(P<0.05,P<0.01),补肾疏肝方低剂量组与联合顺铂低剂量组p-PI3K,p-AKT蛋白,Akt1,Cyclin D1,NF-κB的mRNA表达均低于其他组(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾疏肝方含药血清可通过PTEN-PI3K-AKT信号通路抑制人肺腺癌A549细胞增殖和转移。

沉默lncRNA TPT1-AS1对非小细胞肺癌生物学行为的影响及机制研究

目的研究长链非编码RNA(lncRNA)TPT1-AS1在非小细胞肺癌组织中的表达及对沉默lncRNA TPT1-AS1非小细胞肺癌生物学行为的影响及机制。方法检测非小细胞肺癌组织和癌旁组织lncRNA TPT1-AS1表达情况,做细胞培养及lncRNA TPT1-AS1转染,分为空白组、过表达组、沉默组,过表达组转染si-TPT1-AS1-NC质粒,沉默组转染si-TPT1-AS1质粒,空白组细胞不做任何处理,转染24h后鉴定转染效率。检测各组细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及PTEN-PI3K-AKT信号通路蛋白表达情况。结果与癌旁组织相比,癌组织TPT1-AS1 mRNA表达量升高(P<0.05)。与空白组相比,过表达组TPT1-AS1 mRNA表达量升高,沉默组TPT1-AS1 mRNA表达量降低(P<0.05),说明转染成功。与过表达组相比,沉默组各时间点细胞增殖率、细胞迁移数、侵袭数、p-PI3K、p-AKT、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达量降低,凋亡率、PTEN、Bax蛋白表达量升高(P<0.05)。结论lncRNA TPT1-AS1在非小细胞肺癌组织高表达,沉默lncRNA TPT1-AS1可抑制肺癌细胞增殖、迁移、侵袭,促进凋亡,其机制可能与调控PTEN-PI3K-AKT信号通路相关。

卵巢癌的二元论及其相关蛋白表达差异

目的比较E-钙粘附素(E-Cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(PKB/Akt)以及P53蛋白,在低级别浆液性癌(LGSC)、高级别浆液性癌(HGSC)、早期透明细胞癌(ECCC)与晚期透明细胞癌(ACCC)中表达的差异,探讨卵巢癌(OC)的二元论发病机制。方法收集我院2002年1月~2017年11月100例OC石蜡包埋组织,应用M.D.Anderson癌症中心的两级组织学分级系统将卵巢浆液性癌(OSC)进行分级,运用国际妇产科联盟(FIGO)分期系统将OC分期,采用免疫组织化学法检测22例LGSC、38例HGSC、20例ECCC以及20例ACCC组织中E-Cadherin、β-Catenin、PTEN、PI3K110α、p-AktSer 473以及P53蛋白表达,并结合临床病理特征进行统计分析。结果E-Cadherin、β-Catenin蛋白表达在LGSC与HGSC以及ECCC与ACCC之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。PTEN、PI3K110α、p-AktSer 473以及P53蛋白表达在LGSC与HGSC以及ECCC与ACCC之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。在LGSC与ECCC中E-Cadherin、β-Catenin蛋白表达均呈负相关(P<0.05),在HGSC中PTEN与PI3Kp110α、p-AktSer473以及P53蛋白表达均呈负相关(P<0.05),在ECCC中PTEN与PI3Kp110α以及p-AktSer473蛋白表达均呈负相关(P<0.05)。发病年龄≤50与>50、G1~2与G3以及Ⅰ~Ⅱ与Ⅲ~Ⅳ期在LGSC与HGSC以及ECCC与ACCC之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论E-Cadherin蛋白表达的缺失和β-Catenin蛋白的过度激活共同参与LGSC以及ECCC的发生、发展,而PTEN蛋白表达的缺失,PI3K110α以及p-AktSer 473蛋白的过度激活共同参与HGSC及ECCC的发生、发展,P53蛋白的过度激活参与HGSC及ACCC的发生、发展,这为探讨OC的二元论发病机制、临床诊治以及预后判断提供了依据。

沉默神经元HIF-1α和PTEN的表达对体外培养的大鼠神经元氧糖剥夺损伤的影响

目的利用RNA干扰技术分别沉默神经元中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和磷酸酶并和张力蛋白同源物(PTEN)基因,论证它们在神经元体外氧糖剥夺(OGD)损伤后的功能调控作用。方法构建并筛选靶向HIF-1α及PTEN基因的shRNA慢病毒载体;提取并将原代神经元分为4组:(1)NC组,仅加空载病毒;(2)NC+OGD组,加空载病毒后缺氧;(3)Si-hif-1α+OGD组,加Si-hif-1α病毒后缺氧;(4)Si-pten+OGD组,加Si-pten病毒后缺氧,均在培养第3天感染病毒,第7天OGD损伤模拟细胞缺氧。缺氧后24 h行荧光实时定量PCR(qRT-PCR)法检测干扰效率,行乳酸脱氢酶(LDH)检测及AnnexinV-FITC/PI检测神经元细胞损伤、凋亡变化,Western blot检测相应蛋白表达变化。结果慢病毒介导的shRNA能有效沉默目的基因mRNA的表达;HIF-1α沉默后,缺氧细胞的损伤及凋亡加重,PTEN蛋白的表达升高,p-PTEN、p-AKT、NR2A及VEGFa表达降低(P<0.05);PTEN沉默后,缺氧细胞的损伤及凋亡有所减轻,p-PTEN、p-AKT表达升高(P<0.05),HIF-1α、NR2A及VEGFa的表达无显著变化(P>0.05)。结论慢病毒介导的shRNA能有效沉默神经元HIF-1α及PTEN的表达,逆转神经元缺氧损伤中HIF-1α升高对PTEN活性的抑制,参与神经元损伤调控。

消瘀泄浊饮对急性肾损伤小鼠自噬水平的影响

目的:探讨消瘀泄浊饮对急性肾损伤(AKI)小鼠肾组织自噬水平的影响。方法:30只清洁级C57BL/6小鼠按随机数字表法分为5组:假手术组,模型组,消瘀泄浊饮低、中、高剂量组,每组6只,采用肾脏缺血再灌注法构建AKI模型。药物干预14天后,测定小鼠体重、肾重并计算其肾脏指数,测定小鼠血清肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)、尿素(UREA)、尿酸(UA)、总胆固醇(CHO)及肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮合成酶(NOS)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)的含量。HE观察肾组织病理变化,PAS观察肾间质基质沉积情况,免疫组化和Western Blot检测肾组织中相关蛋白表达情况。结果:与假手术组相比,模型组小鼠肾脏指数,血清中CRE、BUN、UREA、UA、CHO及肾组织NOS和MDA的含量均显著上升(P<0.01),SOD、GSH-PX和CAT的含量显著性降低(P<0.01)。与模型组相比,用药后肾组织中SOD、GSH-PX和CAT的含量显著性上升(P<0.05或P<0.01),NOS和MDA的含量显著性降低(P<0.05或P<0.01)。病理染色结果显示,给药组可改善肾小管扩张情况,减少炎性细胞浸润。Western Blot检测显示消瘀泄浊饮可上调LC3Ⅱ/Ⅰ、BECLIN1的蛋白表达,下调P62、P-PI3K/PI3K、P-AKT/AKT、P-MTOR/MTOR的蛋白表达。结论:消瘀泄浊饮能够改善AKI小鼠肾损伤情况,其可能是通过调节PI3KAKT/MTOR通路来改善自噬作用实现的。

种植牙早期感染危险因素及其炎症因子水平

目的 探究早期感染对种植牙周围骨丧失、磷脂酰肌醇(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路及相关炎症因子水平影响。方法 选择2018年3月-2021年3月于海口市第三人民医院进行植牙手术患者为研究对象,植牙术后1周牙周感染患者54例为感染组,未出现牙周感染患者76例为非感染组,比较两组患者植牙术后1周种植牙周围骨丧失情况和PI3K/AKT信号通路及相关炎症因子水平变化。单因素及多因素回归分析种植牙术后早期感染的影响因素。结果 两组患者种植牙周围骨丧失发生率(7.41%vs 3.95%),比较差异无统计学意义(Z=0.218,P=0.640)。感染组患者PI3K mRNA、AKT mRNA、NF-kB mRNA、IL-6、TGF-β1水平均高于非感染组(P<0.05),NF-kB mRNA、IL-6及吸烟史是种植牙术后早期感染的危险因素(P<0.05)。结论 早期感染不会导致种植牙周围骨丧失发生率升高,但是会诱使PI3K/AKT信号通路激活,上调炎症因子水平,NF-kB mRNA、IL-6及吸烟史是种植牙术后早期感染的危险因素。