氟伐他汀钠通过下调lncRNA PTPRG-AS1表达对结直肠癌SW620细胞增殖凋亡的影响

目的:探究氟伐他汀钠对结直肠癌SW620细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。方法:体外培养SW620细胞、正常结直肠上皮FHC细胞,qRT-PCR法检测细胞中lncRNA PTPRG-AS1表达。SW620细胞分为对照组、氟伐他汀钠-低、中、高组、si-PTPRG-AS1组、si-NC组、氟伐他汀钠+pcDNA-PTPRG-AS1组、氟伐他汀钠+pcDNA组。CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞术分别检测细胞活性、克隆形成数、凋亡率,Western blot法检测凋亡相关蛋白(cleaved-caspase3、cleaved-caspase9)表达。结果:结直肠癌SW620细胞中lncRNA PTPRG-AS1表达量高于FHC细胞(4.38±0.31 vs 1.00±0.00,P<0.05);氟伐他汀钠-低、中、高组细胞活性、克隆形成数均低于对照组(P<0.05),细胞凋亡率、蛋白(cleaved-caspase3、cleaved-caspase9)表达均高于对照组(P<0.05),且lncRNA PTPRG-AS1表达量低于对照组(P<0.05);si-PTPRG-AS1组细胞活性、克隆形成数均低于si-NC组(P<0.05),细胞凋亡率、蛋白(cleaved-caspase3、cleaved-caspase9)表达均高于si-NC组(P<0.05);氟伐他汀钠+pcDNA-PTPRG-AS1组细胞活性、克隆形成数均高于氟伐他汀钠+pcDNA组(P<0.05),细胞凋亡率、蛋白(cleaved-caspase3、cleaved-caspase9)表达均低于氟伐他汀钠+pcDNA组(P<0.05)。结论:氟伐他汀钠可能通过下调lncRNA PTPRG-AS1表达抑制结直肠癌SW620细胞增殖,并促进其凋亡。

lncRNA PTPRG-AS1通过靶向miR-124-3p调控肝癌细胞凋亡和放射敏感性的研究机制

目的:探讨lncRNA PTPRG-AS1对肝癌细胞凋亡和放射敏感性的影响及作用机制。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2、SMMC-7721和BEL-7402,qRT-PCR检测细胞中PTPRG-AS1和miR-124-3p表达水平。转染si-PTPRG-AS1、miR-124-3p mimics至HepG2细胞,抑制HepG2细胞中PTPRG-AS1表达或过表达miR-124-3p,流式细胞术检测细胞凋亡,克隆形成实验检测细胞放射敏感性,Western Blot法检测Bcl-2和Bax蛋白表达。生物信息学软件预测PTPRG-AS1与miR-124-3p存在互补的核苷酸序列,双荧光素酶报告基因实验验证PTPRG-AS1与miR-124-3p之间的调控关系。结果:与正常肝细胞L02相比,肝癌细胞HepG2、SMMC-7721和BEL-7402中PTPRG-AS1表达显著升高(P<0.05),miR-124-3p表达显著降低(P<0.05)。抑制PTPRG-AS1或过表达miR-124-3p均可促进肝癌HepG2细胞的凋亡,增强肝癌HepG2细胞的放射敏感性,抑制Bcl-2蛋白表达,促进Bax蛋白表达。PTPRG-AS1负调控miR-124-3p表达。抑制miR-124-3p表达可部分逆转抑制PTPRG-AS1表达对肝癌HepG2细胞凋亡的促进作用以及放射敏感性的增强作用。结论:抑制PTPRG-AS1表达可能通过上调miR-124-3p表达促进肝癌细胞的凋亡并提高其放射敏感性,是肝癌治疗的潜在作用靶点。

LncRNA PTPRG-AS1通过靶向miR-5590-3p调控乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的探讨LncRNA PTPRG-AS1对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法以正常乳腺上皮细胞MCF-10A为对照,qRT-PCR法检测乳腺癌细胞系(MCF-7、T47D和BT549)中 LncRNA PTPRG-AS1 和 miR-5590-3p 表达。分别转染 si-LncRNA PTPRG-AS1、miR-5590-3p mimics、共转染si-LncRNA PTPRG-AS1与anti-miR-5590-3p至乳腺癌MCF-7细胞,用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell检测检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹法检测细胞中CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA PTPRG-AS1和miR-5590-3p的调控关系。结果与MCF-10A细胞比较,乳腺癌细胞系(MCF-7、T47D和BT549)中LncRNA PTPRG-AS1表达升高,差异有统计学意义(P<0.05),miR-5590-3p表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。敲减LncRNA PTPRG-AS1或过表达miR-5590-3p后,MCF-7细胞增殖活性、迁移数、侵袭数及细胞中CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。LncRNA PTPRG-AS1靶向负调控miR-5590-3p。敲减miR-5590-3p逆转了敲减LncRNA PTPRG-AS1对MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结论 LncRNA PTPRG-AS1可能靶向下调miR-5590-3p促进乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。

lncRNA PTPRG-AS1通过调控PI3K/Akt信号通路对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)蛋白酪氨酸磷酸酶受体G基因反义链1(PTPRG-AS1)调控磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路对卵巢癌细胞增殖和凋亡中的影响。方法:qRT-PCR法检测卵巢癌组织、配对癌旁正常卵巢组织、正常卵巢上皮细胞HOSE和3种卵巢癌细胞株PTPRG-AS1的表达水平;构建抑制PTPRG-AS1表达的SKOV3细胞株,MTT法检测细胞增殖情况,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot检测Cyclin D1、Bax、Bcl-2、PTPRG、Akt、p-Akt的表达。结果:与正常卵巢上皮细胞HOSE比较,3种卵巢癌细胞株中PTPRG-AS1的表达升高;与配对癌旁正常卵巢组织比较,卵巢癌组织中PTPRG-AS1的表达升高(P<0.05)。抑制PTPRG-AS1表达可抑制细胞活力,促进细胞凋亡,抑制Cyclin D1、Bcl-2、p-Akt表达,促进PTPRG表达(P<0.05)。激活PI3K/Akt信号通路能够逆转抑制PTPRG-AS1对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响(P<0.05)。结论:抑制lncRNA PTPRG-AS1表达通过抑制PI3K/Akt信号通路降低卵巢癌细胞增殖能力,促进细胞凋亡,其机制可能与上调PTPRG表达有关。