Study on the mechanism of Salvia miltiorrhiza-Pueraria lobata in the treatment of type 2 diabetes mellitus based on network pharmacology

Objective:To explore the synergistic mechanism of salvia miltiorrhiza and Pueraria lobata of multi-component,multi-target and multi-pathway in the treatment of type 2 diabetes mellitus(T2DM).Methods:The chemical components of Salvia miltiorrhiza and Pueraria lobata were queried and screened through the pharmacological database and analysis platform of traditional Chinese medicine system,and the chemical components were predicted by SwissTargetPrediction database.At the same time,the related targets of T2DM were searched and screened from GeneCards,TTD,DrugBank and Disgenet databases.The chemical composition targets and disease targets are intersected,and the PPI network of intersection targets is constructed by using STRING11.0 database,and the PPI network nodes are screened to get the key targets.The GO function and KEGG pathway enrichment analysis of the key targets are carried out.Results:A total of 70 chemical constituents and 51 key targets for the interaction between chemical components and diseases were obtained through retrieval and screening.After enrichment and analysis of 51 key targets,a total of 71 cellular components,85 molecular functions,559 biological processes and 137 signal pathways were obtained.The treatment of T2DM with Salvia miltiorrhiza and Pueraria lobata may be related to AGE-RAGE,Pl3K-Akt,ErbB,insulin resistance,HIF-1 and other signal pathways.Conclusion:This study preliminarily reveals the action mechanism of Salvia miltiorrhiza and Pueraria lobata on the treatment of T2DM with multi-components,multi-targets and multi-pathways,which provides a certain basis for the study of the molecular mechanism of Salvia miltiorrhiza and Pueraria lobata pairs.

Research progress of modern pharmacological effects of Pueraria lobata and its compound clinical application

As a traditional Chinese medicine, Pueraria lobata has been widely recorded in Chinese herbal works of the past dynasties. Modern studies have found that its main chemical components are isoflavones, triterpenoids, saponins, etc., which have antipyretic, anti⁃inflammatory, anti⁃infection, blood pressure, blood sugar, blood lipid, and pharmacological effects such as improving reproductive function. Clinically, it is used in the treatment of diabetic diseases, gastrointestinal diseases, cardiovascular diseases, etc. in the form of traditional Chinese medicine compound prescriptions. This reseach aims to summarize related articles of Pueraria lobata in the past 5 years, focusing on its pharmacological effects and clinical application of the compound, and provide references for its further development and utilization.

Two new C-glucofuranosyl isoflavones in puerarin injection

Two new C-glucofuranosyl isoflavones of impurities in puerarin injection were isolated. Their structures were detemained to be 8-C-α-glucofuranosyl-7, 4P-dihydroxyisoflavone and 8-C-β-glucofuranosyl-7, 4＇-dihydroxy- isoflavone by chemical and spectral analysis.

Study on the Production Technology of Pueraria lobata Jelly

An orthogonal experiment was carried out to investigate the optimal production formula of Pueraria lobata jelly combining P. lobata,red beans and sugar as the main raw materials. The isoflavone contents in P. lobata and the P. lobata jelly were determined by colorimetry and sensory evaluation. The results showed that the optimal formula for the product was: P. lobata paste 50%,red bean paste 60%,and white granular sugar and agar 20% and 3% of the total weight of P. lobata paste and bean paste,respectively. The development of this product is of great significance to the utilization of P. lobata.

基于网络药理学探讨葛根治疗肝损伤的作用机制

目的:探究葛根治疗肝损伤的有效成分、靶标和作用通路,为葛根用于肝损伤的治疗提供理论依据。方法:基于中医药整合药理学网络计算平台(TCMIP)、中药综合资源数据库(TCMID)、中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)、人类基因数据库(GeneCards)等公共数据库和KEGG通路分析等网络药理学基本方法预测葛根治疗肝损伤的作用机制。结果:葛根主要活性成分靶点与肝损伤靶点具有交集,功能分析、富集分析和分子对接发现,刺芒柄花素、β-谷甾醇与雌激素受体1(ESR1),香豆雌酚、3′-甲氧基大豆黄素与PPARG与之间对接具有良好的亲和力,其中刺芒柄花素与ESR1之间作用力最强(-8.04 kcal/mol)。推断葛根治疗肝损伤的机制与ESR1和PPARG介导的路径相关。结论:葛根治疗肝损伤可能通过ESR信号通路、PPAR-γ激活和调节靶基因转录等发挥调节肝细胞的生长、分化和生理功能,减轻氧化应激性肝损伤和肝细胞凋亡的作用。

葛根主要成分、生物学功能及其在畜禽生产中的应用

葛根属传统中草药,富含蛋白质、膳食纤维、氨基酸、矿物质等营养物质和多种生物活性成分,具有良好的抗炎、抗氧化和增强免疫等作用。饲粮中添加适量葛根可提升畜禽的生产性能及产品品质,调节胃肠道菌群稳态或增加有益菌丰度,促进畜禽机体健康。本文综述了葛根的主要成分、生物学功能及其在畜禽生产中应用的研究进展,为其在动物生产中的应用提供参考。

基于GEO数据库结合网络药理学及分子对接逆向挖掘干预肝癌的中药

基于GEO(gene expression omnibus)数据库结合网络药理学及分子对接,从分子水平逆向挖掘具有抗肝癌活性的中药。通过GEO、GeneCards、OMIM和TTD等疾病靶点数据库获取肝癌的重要靶点。利用STRING平台获取核心靶点,结合TCMIP(integrative pharmacology-based research platform of traditonal Chinese medicine)和TCMID(traditional Chinese medicine integraive database)数据库筛选核心成分,采用TCMSP(traditonal Chinese medicine system pharmacology database and analysis platform)数据库筛选核心中药,通过分子对接和细胞实验验证筛选结果。从疾病靶点数据库得到398个肝癌的重要靶点,进一步筛选出8个核心靶点、11个核心成分和1味核心中药葛根;分子对接结果表明葛根的3个核心成分(槲皮素、黄岑素、豆甾醇)可以与部分核心靶点(CDK1、CDC20)自发地结合;细胞实验结果表明葛根提取物可以有效抑制肝癌细胞HepG2的增殖。该结果可以为葛根的研究与开发提供参考,为葛根抗肝癌活性成分的挖掘提供理论依据。

葛根乳酸菌饮料发酵工艺优化及其品质分析

该研究以葛根为原材料,以酶解率和异黄酮含量为考察指标,通过单因素试验和正交试验优化复合酶法处理葛根的酶解条件;以酶解液为发酵基质,植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)STDA5为发酵菌种,制备葛根乳酸菌饮料,通过单因素试验和响应面试验优化发酵工艺条件,并对其品质指标进行测定。结果表明,葛根最佳酶解条件为:复合酶添加量1.2%、酶解pH 6.5、酶解温度65℃、酶解时间240 min;葛根乳酸菌饮料最佳发酵工艺条件为:接种量1×10^(5)CFU/mL、发酵温度38℃、发酵时间12 h、蔗糖添加量10%,在此优化条件下,葛根乳酸菌饮料乳酸菌活菌数为6.89×10^(8)CFU/mL,还原糖含量为17.37 g/L,总酸含量为43.50 g/L,可溶性固形物含量为14.10%,异黄酮含量为0.71 g/L,葛根素含量为27.60μg/mL。

基于网络药理学探讨丹参-葛根药对治疗心肌纤维化的作用机制

目的采用网络药理学探讨丹参-葛根药对治疗心肌纤维化的活性成分及作用机制。方法从中药系统药理学分析平台获取丹参-葛根药对活性成分和作用靶点,通过GeneCards数据库获取心肌纤维化的相关靶点,使用Venny 2.1软件获取两者共同靶点;运用STRING数据库和Cytoscape 3.7.1软件构建共同靶点的蛋白-蛋白互作(PPI)网络并进行拓扑学分析;采用ClusterProfiler R功能包对共同靶点进行基因本体(GO)功能和KEGG通路富集分析;最后使用Cytoscape 3.7.1软件构建“活性成分-靶点-通路”网络并分析。结果筛选得到丹参-葛根药对候选活性成分30个,活性成分和心肌纤维化共同靶点41个。共同靶点PPI网络的平均点度值为19.7,平均介数为19.1,度值和介数均超过平均值的靶点共有14个。KEGG显著富集到73条通路,其中与心肌纤维化相关的通路有6条。“活性成分-靶点-通路”网络显示,丹参中的木犀草素、丹参酮IIA和葛根中的葛根素、β-谷甾醇等活性成分通过共同调控脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的AGE-RAGE、血流剪切力与动脉粥样硬化、缺氧诱导因子-1(HIF-1)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介数-17(IL-17)等信号通路起到抗心肌纤维化的功效。结论揭示了丹参-葛根药对多成分、多靶点、多通路治疗心肌纤维化的作用特点,为进一步研究丹参-葛根药对治疗心肌纤维化的作用机制提供理论依据和新的思路。

葛根的药食功效和现代应用探析

葛根是我国药食同源目录中的品种,其含有黄酮、三萜、香豆素、皂苷等活性化合物,安全有效,应用前景广阔。葛根味甘、辛,性凉,归脾、胃、肺经,具有解肌退热、生津止渴、透疹、升阳止泻、通经活络、解酒毒等功效。作为食品,大葛根汤和葛根粥等深受人们喜爱,常用来解渴、治疗溃疡等。作为药品,葛根素注射液、葛根胶囊、葛根芩连丸、蜂胶葛根软胶囊等在临床中具有显著疗效,如降血压、降血糖、调血脂、抗炎、抗氧化、神经保护、调节骨代谢、抗肿瘤等。近年来,随着研究的不断深入,葛根的用途更加广泛。对葛根发展历史、化学成分、药理作用及现代应用等方面进行归纳总结,以期为葛根药食同源资源的合理开发和综合利用提供参考。

“葛根-桑叶”药对治疗糖尿病肾脏病作用机制探讨

目的:通过使用网络药理学的方法,探究“葛根-桑叶”药对治疗糖尿病肾脏病的作用机制。方法:首先,利用TCMSP平台筛选出“葛根-桑叶”药对的活性成分和作用靶点,利用GeneCards、DrugBank、OMIM、PharmGkb、TTD共5个数据库筛选出糖尿病肾脏病的相关靶点基因,用R语言得到药物-疾病的共同靶点,并绘制韦恩图,利用Cytoscapes软件构建并分析药物成分-靶点调控网络。使用STRING数据库平台构建PPI网络并筛选核心靶点。通过R语言对关键靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果:“葛根-桑叶”药对共有33个有效活性成分,52个靶点,beta-sitosterol活性成分同时存在于中药葛根与桑叶之中。药对与糖尿病肾脏病存在167个共同靶点,关键靶点48个。药对与疾病的交集基因的PPI网络包涵618条边和167个节点,其核心基因有GSK3B、PGR、HSP90AA1、ESR1等。通过GO富集分析,获得条富集结果,从BP、CC、MF三个层次分析基因的形式功能。KEGG富集分析(P<0.01)获得30条相关信号通路,基于P-value前30条进行分析,得到主要通路包括神经变性的途径--多种疾病信号通路、PI3K-Akt信号通路、血脂与动脉粥样硬化信号通路等。结论:“葛根-桑叶”药对通过参与炎症反应、氧化应激等生物学过程发挥治疗糖尿病肾脏疾病的作用。

粉葛与野葛中异黄酮的HPLC指纹对照和比色测定

目的：建立粉葛与野葛药材异黄酮的HPLC指纹对照测定法、定性和定量相似性评价指标、以及粉葛与野葛总异黄酮含量的比色测定法。方法：采用C18色谱柱,甲醇-0.1%甲酸溶液梯度程序洗脱测定粉葛与野葛药材异黄酮的HPLC指纹图谱,统计分析确定共有模式;以最接近共有模式的粉葛与野葛药材为指纹对照,采用夹角余弦法和相对欧氏距离法,分别从化学成分定性和含量2个方面对不同产地粉葛与野葛药材的HPLC指纹图谱进行定性与定量相似性评价。以葛根素为对照,Folin-phenol试剂为显色剂,未加供试品的溶液为空白,70℃水浴显色后,在750 nm下比色法测定粉葛与野葛药材的异黄酮总量。结果：建立的粉葛与野葛异黄酮成分HPLC指纹图谱分离好、专属性强,野葛色谱图中有20个特征指纹峰,粉葛色谱图中有11个特征指纹峰。比色法测定异黄酮总量的线性范围为12-40 mg·L^-1（r=0.999 5）,平均回收率101.1%（n=6）。结论：粉葛与野葛异黄酮指纹图谱以指纹对照品为参照,同时进行夹角余弦法定性和相对欧氏距离法定量相似性评价,重复性和耐用性良好,并且更全面和实用。Folin-phenol试剂比色法测定粉葛与野葛异黄酮总量准确灵敏。

不同品种葛根中葛根素及总黄酮的含量测定

目的建立不同品种葛根中葛根素及总黄酮的含量测定方法。方法采用RP—HPLC法，以甲醇-水（32：68）为流动相，检测波长为250nm测葛根素含量；紫外分光光度法测柴葛、粉葛中总黄酮含量。结果葛根素峰分离度提高，峰形改善；葛根素0．204—2．04μg范围内与峰面积线性关系良好（r=0．9999），回收率为98．7％（n=5），精密度RSD=0．86％。总黄酮浓度在4．08—16．32μg／ml范围内与吸收度线性关系良好（r=0．9998）。结论该法灵敏、准确、简便易行，重复性好，可用于中药葛根药材及饮片的质量控制。

葛根总黄酮提取新工艺的研究

采用微波辅助浸取新工艺从葛根中提取总黄酮.通过单因素和正交实验相结合的方法,研究了新工艺的实验条件.结果表明:在常压下,当微波功率为700 W,葛根粒度为80目,预泡1 h,固液比为1:25,乙醇溶剂浓度为60%,微波辐射40 s,间歇辐射3次,可得到最佳提取率83.92%,比传统回流浸取和超声浸取葛根总黄酮工艺具有快速、节能和浸取率高等优点.

葛根质量标志物(Q-marker)探讨分析

以葛根为主药的中药制剂临床疗效显著,但是葛根素口服吸收差,消除快,生物利用度低,若以葛根素为质量控制指标,无法完全反映葛根为主药的中药制剂疗效。基于刘昌孝院士提出的中药质量标志物(Q-marker)新概念,从成分特有性、传统功效、传统药性、成分可测性、中药配伍环境(药对配伍、复方配伍、经典方配伍)、成分有效性等几个方面对葛根质量标志物(Q-marker)进行探讨分析,为葛根及其制剂质量评价研究提供思路。

葛根异黄酮对MPP＋诱导的PC12细胞凋亡的保护作用

目的探讨葛根异黄酮(Total isoflavones from puerarialobata,TIP)对甲基-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyr-idinium,MPP+)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及其机制。方法用不同浓度TIP预处理体外培养的PC12细胞后,加入MPP+诱导多巴胺能神经损伤模型,用MTT法检测PC12细胞活力,采用实时定量RT-PCR检测Bcl-2和BaxmRNA的表达水平。结果MPP+处理48~96 h,细胞活力较空白对照组降低,阴性对照组Bax 2-ΔΔCt升高,而Bcl-22-ΔΔCt降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组比较,葛根异黄酮组Bax 2-ΔΔCt降低,而Bcl-2 2-ΔΔCt升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论葛根异黄酮对MPP+诱导的PC12细胞凋亡具有抑制作用,下调Bax和上调Bcl-2 mRNA表达可能是其作用的机制之一。

葛根淀粉生产工艺的研究

采用Ｃａ（ＯＨ）２水溶液代替清水作为浸泡剂，可以有效地提高淀粉的抽提率及淀粉的品质，也使功能性保健因子葛根总黄酮在淀粉中的保留量大为提高。正交试验研究的结果表明，葛根淀粉生产的最优工艺条件为：料液比１∶４，浆料ｐＨ８．５，浸泡时间３ｈ，浸泡温度３０℃。

野葛块根异黄酮的提取及抗氧化研究

以土家山区野葛块根为试验材料,采用超声波辅助乙醇提取野葛块根异黄酮。在单因素试验的基础上,以提取率为响应值,运用4因素4水平响应面分析法研究提取过程中工艺参数对提取率的影响,并对异黄酮提取物的抗氧化性能进行了研究。结果表明:最适提取工艺条件为乙醇浓度81.0%,超声时间41.2min,提取温度61.2℃,料液比(m/V)1∶9.5,原料粒径40目。在此工艺条件下,野葛块根异黄酮的平均提取率为3.43%。所提取的野葛块根异黄酮的抗氧化效果低于Vc,但能与其产生一定的协同作用。

酶法提取葛根渣中异黄酮的研究

葛粉提取后形成的葛根渣含有活性成分异黄酮,将葛根渣的酶法预处理与乙醇抽提工艺相结合,可使异黄酮的提取率明显提高。以10 g葛根渣为原料,当纤维素酶用量为10 FPIU(以每克葛根渣计,下同),处理12 h后,总异黄酮得率可增至1.14%,为常规醇提法的1.36倍;在木聚糖酶用量为300 IU的条件下,处理6 h后,总异黄酮得率1.28%,为常规醇提法的1.52倍。纤维素酶和木聚糖酶之间存在着协同作用:每克葛根渣采用300 IU的木聚糖酶和7.5 FPIU的纤维素酶协同处理6 h后,总异黄酮得率可达1.38%,为常规醇提法的1.64倍。

葛根多菌种混合发酵研制醋饮料试验

为了开发一种富含葛根黄酮的益生菌饮料,采用协同酶解和多菌种混合发酵的方法分别进行葛根酶解和醋饮料发酵技术研究.结果表明:葛根酶解的最优条件为料液质量比1∶20,p H 5.0,纤维素酶加量1 mg·g-1,中温α-淀粉酶加量20 mg·g-1,糖化酶加量10 mg·g-1,50℃下酶解1 h,在此条件下,葛根异黄酮提取率达到7.51%,溶液中的还原糖含量达到20.76%;葛根醋饮料多菌种混合发酵的最优条件为乳酸菌、醋酸菌和酵母菌质量比2∶2∶1,菌种接种量为原料的0.5%,料液质量比1∶12,大米蛋白肽添加量为0.2 g·g-1,30℃发酵5 d,在此条件下可得发酵醋饮料总酸含量为17.90 g·L-1,葛根异黄酮量6.59 g·L-1.