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鼠伤寒沙门氏菌purB受purR调控的实验证据
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作者 张海宁 黄谊 +1 位作者 秦浚川 王敖全 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第2期145-149,共5页
通过遗传图和序列同源性分析获得了鼠伤寒沙门氏菌purB核苷酸序列. 为揭示鼠伤寒沙门氏菌purB是否受purR调控, 对purB基因的PUR box进行了功能分析. PCR扩增野生型PUR box和其第14位保守碱基发生突变(C→T)的DNA片段, 分别与从鼠伤寒沙... 通过遗传图和序列同源性分析获得了鼠伤寒沙门氏菌purB核苷酸序列. 为揭示鼠伤寒沙门氏菌purB是否受purR调控, 对purB基因的PUR box进行了功能分析. PCR扩增野生型PUR box和其第14位保守碱基发生突变(C→T)的DNA片段, 分别与从鼠伤寒沙门氏菌野生型菌株LT2提取的PurR粗制品进行了凝胶阻滞实验. 结果表明, purB基因的PUR box与PurR阻遏蛋白有很好的结合能力, 而突变的PUR box则不能与PurR阻遏蛋白结合. 可见, 野生型鼠伤寒沙门氏菌purB与嘌呤从头合成途径中其他结构基因一样是受purR基因协同调控的. 此外还对不受调控的实验现象的机制做了研究. 结果表明purB组成型表达是purB∷MudJ基因融合发生在PUR box上游(-554 bp)的结果. 这一结果还为鼠伤寒沙门氏菌purB基因与其上游ycfC基因属于同一个操纵子提供了有力的证据. 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门氏菌 purb 序列同源性分析 purbOX PU
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鼠伤寒沙门氏菌purB受purR负调控的实验证据
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作者 黄谊 戴秀玉 王敖全 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第S3期379-380,共2页
关键词 鼠伤寒沙门氏菌 负调控 结构基因 阻遏蛋白 purb PURR 微生物研究所 基因表达调控 中国科学院 合成途径
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Experimental proof for the regulation of Salmonella typhimurium purB by purR
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作者 ZHANG Haining HUANG Yi +1 位作者 QIN Junchuan WANG Aoquan 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2001年第14期1191-1194,共4页
Salmonella typhimurium purB encodes adeny-losuccinate lyase (ASL), the enzyme that catalyzes step 8 in the pathway for de novo synthesis of inosine 5’-monophos-phate (IMP) and also the final reaction in the two-step ... Salmonella typhimurium purB encodes adeny-losuccinate lyase (ASL), the enzyme that catalyzes step 8 in the pathway for de novo synthesis of inosine 5’-monophos-phate (IMP) and also the final reaction in the two-step sequence from IMP to adenosine monophosphate (AMP). The nucleotide sequence ofpurB was obtained by the genetic map and sequence homologous analysis. The conserved pur operator in purB was identified to be located 185 bp downstream of the initiation codon and overlaps codons 62 - 67 in the protein-coding region. The binding of PurR to this operator was demonstrated by gel retardation experiment and site-directed mutagenesis, indicating that the purB is under the control of purR. We also answered why previous study had conflicting report concerning the regulation of purB by purR by identifying the junction site of purB to lacZ in a purB-MudJ (lacZ, Kan’) fusion strain. This result strongly supports that the purB is the second gene in the ycfC-purB operon. 展开更多
关键词 SALMONELLA TYPHIMURIUM purb PUR box purb::MudJ.
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