贵州省马铃薯S病毒的发生及防治

对大西洋原原种连续繁种的生产试验及其PVX、PVY、PVS、PLRV病毒的DAS-ELISA检测结果表明,在以上4种病毒中,马铃薯感染S病毒的比例最高,危害较严重,针对此现象提出了贵州省马铃薯S病毒相应的防治措施。

贵州省2006-2010年脊髓灰质炎实验室监测与评价

目的分析贵州省脊髓灰质炎(脊灰)实验室监测数据,评估运转情况,为贵州省继续维持无脊灰状态提供实验室数据。方法采用病毒分离、鉴定与核苷酸序列分析的方法,对贵州省2006-2010年报告的急性弛缓性麻痹(AFP)病例、接触者及其他人群粪便标本进行病毒学检测和结果分析。结果 2006-2010年贵州省脊灰实验室共收到2 204份AFP病例粪便标本,332份AFP病例接触者粪便标本,310份其他人群粪便标本。从AFP病例中分离到非脊灰其他肠道病毒(NPEV)209株,脊灰病毒(PV)54株;从AFP病例接触者中分离到NPEV33株,PV6株;其他人群中分离到NPEV27株,PV9株。所有PV阳性分离物均送到国家脊灰实验室进行型内鉴定,全部为疫苗相关株。贵州省脊灰实验室每次均通过WHO和国家脊灰实验室的能力验证和现场认证评估。结论 2006-2010年贵州省脊灰实验室监测系统运转正常,未发现脊灰野病毒(WPV)或疫苗衍生脊灰病毒(VDPV)。贵州省继续保持无脊灰状态。

L20B细胞用于脊髓灰质炎病毒分离鉴定的实验观察

应用RD、Hep-2、L20B细胞对64株已知病毒和73份粪便标本悬液进行脊髓灰质炎病毒（PV）分离鉴定及效价滴定．实验结果证明，L20B细胞具有很好的特异性，用该细胞检测已知病毒标本，PV检出率达100％；检测粪便标本悬液PV检出率可达13.70％，均高于RD、Hep-2细胞的检出率，而对其它肠道病毒均不增殖．用RD、L20B进行病毒分离优于RD、Hep-2，用前者PV检出率可提高4.11％．从29株病毒效价滴定结果分析，三种细胞对病毒的敏感度依次为RD＞L20B＞Hep-2．

不同细胞在脊髓灰质炎病毒检测中敏感性的比较

细胞的敏感性在脊髓灰质炎病毒（PV）检测中具有重要意义，运用RD、Hep-2及新引入的L20B细胞同时进行肠道病毒的分离及鉴定，结果3种细胞对PV出现了不同程度的漏检，RD细胞的漏检率较高．L20B细胞对PV具有较强的敏感性和特异性，但也出现了1株PV的漏检．不同细胞对PV检出率差异的原因有待于继续研究．

体外研究脊髓灰质炎病毒Ⅰ型疫苗株结构蛋白对人呼吸道上皮细胞内天然免疫反应系统的作用及其免疫学意义

尽管针对脊髓灰质炎病毒已经有长达数百年的研究并成功研制出了预防性疫苗,但是对于该病毒如何启动机体天然免疫反应,进而激活获得性免疫反应这一过程的具体分子机理仍有诸多空白。本研究通过体外分析脊髓灰质炎病毒Sabin减毒株Ⅰ型的结构蛋白对人呼吸道上皮细胞内天然免疫反应信号分子的影响,了解脊髓灰质炎病毒在上皮细胞中启动免疫信号的具体分子机制。采用PCR方法扩增脊髓灰质炎病毒四种结构蛋白VP1、VP2、VP3和VP4,经酶切纯化后与pcDNA3.1+真核表达载体连接,分别构建含目的基因的四种重组质粒。将重组质粒分别转染至人呼吸道上皮细胞16HBE中,48h后收集培养上清、细胞。提取细胞的总RNA,利用Q-PCR法分别检测四种结构蛋白表达所诱导的天然免疫信号分子的mRNA表达量。同时,上清、细胞裂解物分别与人T细胞共培养,检测其对T细胞增殖的影响。体外在16HBE细胞中分别表达SabinⅠ病毒VP1～VP4四种结构蛋白均可刺激如LTα3、NIK等NF-κB天然免疫信号通路相关分子的表达,并且表达这四种蛋白的细胞裂解物与T细胞共培养后均表现出刺激T细胞非特异性增殖的效应。但是,仅有VP1、VP2表达所诱导分泌相关因子的培养上清才表现出间接刺激T细胞增殖的能力。SabinⅠ毒株的四种结构蛋白可激活NF-κB信号通路,促进T细胞的非特异性增殖,从而激活适应性免疫应答。

福建省2000—2012年AFP阳性病例流行病学特征

目的了解福建省在无脊髓灰质炎后,病毒分离阳性的AFP病例流行特征。方法对2000—2012年病毒分离阳性的AFP病例进行流行病学分析。结果 13年共报告AFP病例1 822例,年均发病率1.70/10万。共采集1 807例标本进行病毒分离,PV阳性4.6%,NPEV阳性11.1%,PV+NPEV混合阳性0.4%,阴性83.9%。PV组中,<1岁占44.6%,流动人口占10.8%,未全程免疫占24.1%,残留麻痹率27.7%,均高于其他组;NPEV组中,<1岁仅占9.5%,流动人口仅占2.5%,未全程免疫仅占9.0%,残留麻痹率仅12.4%。结论在维持无脊灰阶段,需继续提高口服脊灰疫苗(OPV)覆盖率,重点是流动儿童和边远山区儿童。加强NPEV防控亦可减少AFP病例及致残率。

福建省脊髓灰质炎疫苗转换前后AFP病例病原学监测结果分析

自2016年5月1日起,我国与全球另外154个国家和地区同步实施脊髓灰质炎(以下简称"脊灰")疫苗免疫策略转换,停用三价口服脊灰减毒活疫苗,改用二价口服脊灰减毒活疫苗。为探讨脊灰疫苗转换对福建省急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例监测结果产生的变化,本研究收集2012-2018年福建省AFP病例的流行病学及实验室监测数据,对脊灰疫苗转换前后AFP病例的监测结果进行描述性分析,采集AFP病例及其接触者粪便标本,并使用RD细胞和L20B细胞进行病毒分离;对L20B阳性分离物进行脊灰病毒(Poliovirus,PV)的型内鉴别(Intratypic differentiation,ITD),对PV衣壳蛋白VP1编码区核苷酸序列测定和分析。使用SPSS 21.0软件对数据进行统计检验,比较采用χ^(2)检验。结果显示,2012-2018年福建省累计报告AFP病例1776例,根据AFP病例分类流程确诊的AFP病例1283例,排除的非AFP病例493例,疫苗转换前后报告发病率平均为2.83/10万和2.71/10万。实验室共检测3123份粪便标本(包括AFP病例、非AFP病例及接触者),其中合格标本采集率为92.42%,7日及时送检率为97.85%,14日内病毒分离完成率接近100%,疫苗转换前后PV平均分离率分别为1.91%(38/1986)、1.58%(18/1137),非脊灰肠道病毒平均分离率分别为10.22%(203/1986)、5.45%(62/1137)。2016年5月1日之前分离出Ⅰ型PV 6株,Ⅱ型PV 13株,Ⅲ型PV 19株;2016年5月1日之后分离出Ⅰ型PV 6株,Ⅲ型PV 12株。本研究结果提示,脊灰疫苗转换前后福建省AFP监测系统运转正常,始终保持较高的敏感性和及时性。2012-2018年福建省分离出的PV均为脊灰疫苗株,毒株血清型别以Ⅲ型为主,VP1编码区核苷酸以低变异为主,未发现疫苗衍生脊灰病毒及脊灰野病毒,疫苗转换后再未检出II型PV,提示II型脊灰疫苗株病毒可能已被阻断。