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用填充床生物反应器连续灌流培养CHO细胞生产HBsAg 被引量:3
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作者 龚伟 方学平 +4 位作者 刘燕 王晓燕 范昌发 梅兴国 章扬培 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第7期82-84,共3页
为了获得重组CHO细胞持续高效表达HBsAg的最佳条件 ,应用填充床生物反应器和聚酯片 ,连续灌流培养分泌HBsAg的重组CHO细胞 ,考察灌流培养基中葡萄糖浓度对细胞代谢和HBsAg生产的影响。连续培养 60天 ,细胞密度可达 5 0× 1 0 6 ml... 为了获得重组CHO细胞持续高效表达HBsAg的最佳条件 ,应用填充床生物反应器和聚酯片 ,连续灌流培养分泌HBsAg的重组CHO细胞 ,考察灌流培养基中葡萄糖浓度对细胞代谢和HBsAg生产的影响。连续培养 60天 ,细胞密度可达 5 0× 1 0 6 ml。灌流培养液中葡萄糖浓度从5 0g L增加到 7 6g L时 ,葡萄糖消耗速率和乳酸浓度均随之上升。当葡萄糖浓度继续增加至9 3g L时 ,葡萄糖消耗速率和乳酸浓度呈下降趋势 ;当将葡萄糖浓度降回至 7 6g L后又开始回升。培养过程中最高抗原滴度达 1∶5 1 2 ,出现在以含 5 0g L葡萄糖的培养液灌流阶段的末期 ,即第 2 6天 ,维持 1 0天左右即迅速下降至 1∶1 2 8水平。共收液 335L ,纯化后获得抗原蛋白2 1 3 0 4mg ,平均产率为 635 94μg L ,较传统转瓶工艺 ( 4 1 4μg L)提高 5 3 6%。表明CHO细胞较长时间处于高乳酸水平下 ( >30mmol L)会严重影响产物的表达 ,应控制灌流培养液中的葡萄糖浓度在较低水平 ,或通过适当提高灌流速率使培养基中乳酸水平维持在较低水平 。 展开更多
关键词 填充床生物反应器 HBSAG 细胞培养 聚酯片 培养基
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Alternatives for large-scale production of cultured beef: A review 被引量:9
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作者 Matilda S M Moritz Sanne E L Verbruggen Mark J Post 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2015年第2期208-216,共9页
Cultured beef is a method where stem cells from skeletal muscle of cows are cultured in vitro to gain edible muscle tissue. For large-scale production of cultured beef, the culture technique needs to become more effic... Cultured beef is a method where stem cells from skeletal muscle of cows are cultured in vitro to gain edible muscle tissue. For large-scale production of cultured beef, the culture technique needs to become more efficient than today's 2-dimensional(2D) standard technique that was used to make the first cultured hamburger. Options for efficient large-scale production of stem cells are to culture cells on microcarriers, either in suspension or in a packed bed bioreactor, or to culture aggregated cells in suspension. We discuss the pros and cons of these systems as well as the possibilities to use the systems for tissue culture. Either of the production systems needs to be optimized to achieve an efficient production of cultured beef. It is anticipated that the optimization of large-scale cell culture as performed for other stem cells can be translated into successful protocols for bovine satellite cells resulting in resource and cost efficient cultured beef. 展开更多
关键词 cultured beef MICROCARRIERS aggregated cells packed bed bioreactor cell culture
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用筐架式填充床生物反应器高密度培养工程细胞
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作者 陈幼妹 朱慧 +2 位作者 宋后燕 国政 张雯英 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第S1期215-219,共5页
用圆盘型聚酯载体筐架式填充床内作为细胞生长分裂的支持物,通过笼状唧筒生物反应器连续培养能合成和分泌rtPA的工程细胞,经28d连续灌注培养,细胞密度达47×107/ml,rtPA浓度最高达99μg/ml,... 用圆盘型聚酯载体筐架式填充床内作为细胞生长分裂的支持物,通过笼状唧筒生物反应器连续培养能合成和分泌rtPA的工程细胞,经28d连续灌注培养,细胞密度达47×107/ml,rtPA浓度最高达99μg/ml,rtPA活性最高达4068IU/ml。 展开更多
关键词 生物反应器 填充床 工程细胞 聚酯载体
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一体化灌注法体外构建活化人工骨的实验研究 被引量:4
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作者 王林 马真胜 +5 位作者 雷伟 胡蕴玉 王臻 张扬 冯亚非 裴国献 《中华创伤骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期521-526,共6页
目的探讨一体化灌注法——灌注接种一灌注培养体外构建活化人工骨的效果。方法以多孔β-磷酸三钙(β-TCP)支架为载体,采用自行设计的灌注式生物反应器进行人胚成骨细胞的PSPC,并设静态接种-静态培养(SSSC)和静态接种-灌注培养(S... 目的探讨一体化灌注法——灌注接种一灌注培养体外构建活化人工骨的效果。方法以多孔β-磷酸三钙(β-TCP)支架为载体,采用自行设计的灌注式生物反应器进行人胚成骨细胞的PSPC,并设静态接种-静态培养(SSSC)和静态接种-灌注培养(SSPC)为对照组,通过葡萄糖日耗量、细胞活力测定、扫描电镜(SEM)、组织学观察与形态计量分析等检测方法,比较3种构建方法的细胞增殖和分布情况。结果培养2、4、6、8d,3组细胞葡萄糖日耗量均随培养时间的延长而增加,SSPC组和PSPC组均明屁高于SSSC组,差异有统计学意义(P〈0.05),培养6d内PSPC组明显高于SSPC组,差异有统计学意义(P〈0.05),培养8d时两组葡萄糖日耗量差异尤统计学意义(P〉0.05)。SSPC组(1.597±0.103)和PSPC组(1.668±0.129)细胞活力差异无统计学意义(P〉0.05),但均明显高于SSSC组(0.347±0.054),差异有统计学意义(P〈0.05)。SEM及组织学观察显示SSSC组细胞仅分布在支架周缘,而SSPC组和PSPC组细胞在支架内部及剧边均有分布,SSPC组、PSPC组细胞占孔率(18.66%±4.41%、19.34%±3.55%)均明显高于SSSC组(4.07%±1.78%),差异有统汁学意义(P〈0.05)。结论一体化灌注法体外构建活化人工骨的效果优于传统的静态方法;与静态接种-灌注培养相比,一体化灌注法可显著促进培养初期细胞增殖从而加快组织构建速度。 展开更多
关键词 组织工程 生物反应器 组织支架 细胞接种 灌注
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应用固定床式生物反应器大规模制备慢病毒 被引量:5
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作者 徐文涛 解国放 解正刚 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第1期73-76,共4页
目的研究应用固定床式生物反应器制备慢病毒的工艺。方法分别在2个1.5 L固定床式生物反应器中,加入50 g片状载体,接种293T细胞,当细胞生长3 d,细胞密度达1.0~1.5×10~7个/m L时,使用聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)作为转染介质... 目的研究应用固定床式生物反应器制备慢病毒的工艺。方法分别在2个1.5 L固定床式生物反应器中,加入50 g片状载体,接种293T细胞,当细胞生长3 d,细胞密度达1.0~1.5×10~7个/m L时,使用聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)作为转染介质转染质粒制备慢病毒;分别根据葡萄糖消耗进行换液培养收获和连续灌流收获病毒原液,采用逐孔稀释滴度测定法检测病毒滴度。结果换液培养共收获6 L慢病毒原液,收获时间持续5 d,病毒滴度最高可达5.13×10~7 TU/m L;连续灌流培养共收获9 L慢病毒原液,收获时间持续8 d,病毒滴度最高可达2.62×10~8 TU/m L。结论用固定床式生物反应器连续灌流培养可用于临床级别的慢病毒制备。 展开更多
关键词 生物反应器 固定床式 慢病毒 293T细胞
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