人工虫草对链脲佐菌素所致小鼠1型糖尿病的降糖作用及机制

目的:探讨人工虫草(蝙蝠蛾拟青霉人工发酵菌丝培养物,PHC)对小鼠1型糖尿病的降糖作用及机制。方法:采用少量多次腹腔注射STZ的方法建立1型糖尿病模型,观察药物对胰腺组织、血糖、肝脏SOD、LPO含量、血清IL-2和IL-10分泌以及小鼠脾T淋巴细胞增殖的影响。结果:低剂量PHC能明显降低糖尿病高血糖,升高血清SOD活力,降低LPO含量,且明显降低IL-2水平,抑制脾T淋巴细胞增殖反应。结论:低剂量PHC对STZ所致小鼠1型糖尿病有明显降糖作用,降糖机制与抑制T细胞应答或细胞因子对胰岛β细胞的破坏,以及清除自由基有关。

人工发酵虫草菌丝对链佐霉素致大鼠1型糖尿病的防治作用

目的:研究蝙蝠蛾拟青霉人工发酵虫草菌丝(Paecilomyces Hepiali Chen,PHC)对链佐霉素(Streptozotocin,STZ)所致大鼠1型糖尿病(Insulin dependent diabetes mellitus,IDDM)的防治作用。方法:一次性腹腔注射50 mg·kg-1 STZ溶液,建立大鼠IDDM模型。阳性对照组和预防组造模24 h前分别灌胃给予盐酸二甲双胍溶液和PHC,连续给药28 d;治疗组造模7 d后灌胃给予PHC,连续给药21 d。以大鼠饮水量、体重以及血糖值为观察指标,28 d后取胰腺组织HE染色,取血清进行SOD值检测。结果:PHC预防给药第7 d开始,IDDM大鼠的高血糖、多饮和体重减轻情况明显改善,28 d后测得血清SOD活力显著升高;胰腺病理形态学观察可见胰岛基本无炎性细胞浸润。治疗组IDDM大鼠高血糖症状无明显改善,但血清SOD活力升高。胰腺腺泡间有以淋巴细胞为主的炎性细胞,胰岛周围见数个淋巴细胞、单核细胞。结论:PHC预防给药对STZ所致大鼠IDDM有明显降低血糖作用,推测其降糖机制主要与其防止炎症细胞浸润,保护胰岛细胞免受损伤有关,与其清除自由基作用无明显相关性。

一种拟青霉菌丝体冻干粉对小鼠的镇静催眠作用

目的研究一种拟青霉菌丝体(HPC)冻干粉的镇静催眠作用。方法采用自发活动仪记录法、小鼠走动时间和举双肢法、阈下剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠法观察受试药的镇静催眠作用。结果HPC可抑制小鼠的自发活动;缩短小鼠入睡潜伏期,延长小鼠睡眠持续时间。结论HPC具有一定的镇静催眠作用。

发酵虫草菌丝体多糖提取条件优化及其结构分析

采用响应面法优化蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖的提取工艺,并对提取所得多糖的结构进行初步分析。结果表明:发酵虫草菌丝体多糖提取最佳工艺条件为提取温度98.0℃、提取时间4.5 h、液固比25∶1(mL/g),该条件下多糖得率为9.69%。菌丝体多糖主要由中性糖(84.7%)和糖醛酸(9.5%)组成。采用高效体积排阻色谱、红外光谱扫描和离子色谱对多糖结构进行光谱分析和单糖组成分析,结果表明该多糖主要为分子质量61.6 kD的单一色谱峰且可能呈吡喃环结构。另外,菌丝体多糖由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和半乳糖醛酸组成,其物质的量比为2.5∶31∶36∶1∶15∶4。研究成果可为日后发酵虫草菌丝体多糖精细结构与活性研究以及产品开发提供一定理论依据。

联合用药延缓阿霉素肾病大鼠肾间质纤维化的研究

目的:探讨贝那普利和蝙蝠蛾拟青酶Cs-4联合应用对阿霉素肾病模型大鼠肾纤维化的保护作用及调节机制。方法:将60只SD大鼠随机分为模型组(M组)、贝那普利组(B组)、联合治疗组(U组)3组,每组20只。8周后观察各组大鼠24 h尿蛋白定量、血脂、血浆总蛋白(TP)、血浆白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的水平及肾脏病理改变,免疫组化检测肾层粘连蛋白(LN)、肾组织中纤连蛋白(FN)、胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ)、转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,RT-PCR方法测定肾皮质转化生长因子β1(TGF-β1)和纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)、组织性金属蛋白酶抑制物1(TIMP-1)mRNA的表达。结果:U组、B组分别和M组相比,24 h尿蛋白定量、BUN、Scr、甘油三脂(TG)、总胆固醇(Cho)明显降低(P<0.01),TP和ALB明显升高(P<0.01),U组和B组相比,BUN、Scr、TG、Cho亦明显降低(P<0.05);M组肾脏病理肾间质纤维化较重,而B组较轻,U组最轻;免疫组化可见B组和U组中LN、FN、ColⅣ、TGF-β1的表达明显低于M组(P<0.01),并且U组和B组相比,ColⅣ、TGF-β1的表达明显降低(P<0.05);RT-PCR显示B组、U组TGF-β1mRNA、PAI-1mRNAT、IMP-1mRNA的表达,均较M组降低(P<0.01),U组较B组亦明显降低(P<0.05)。结论:蝙蝠蛾拟青酶Cs-4和贝那普利联合应用有相加作用,能有效的延缓肾间质纤维化。

蝙蝠蛾拟青霉的抑菌活性与菌丝体发酵化学组分的研究

目的检测从云南省德钦县白马雪山采集的冬虫夏草分离到的内生真菌蝙蝠蛾拟青霉Paecilomyces hepiali Chen et Dai JY 8-8的抑菌活性,了解其菌丝体发酵物的部分化学组分.方法选择26种病原指示菌,采用纸片扩散法对蝙蝠蛾拟青霉Paecilomyces hepiali Chen et Dai JY 8-8进行抑菌活性试验.采用检测方法 NY/T 1653和GB 5009.5分别检测蝙蝠蛾拟青霉Paecilomyces hepiali Chen et Dai JY 8-8菌丝体发酵物干品中8种矿质元素和总氮的含量.结果蝙蝠蛾拟青霉Paecilomyces hepiali Chen et Dai JY 8-8对病原细菌、植物病原真菌和皮肤致病真菌共19种病原微生物有较为明显的抑制作用.菌丝体发酵物中含有8种矿质元素,总氮平均含量是3.19%.结论蝙蝠蛾拟青霉Paecilomyces hepiali Chen et Dai JY 8-8中存在抗菌活性物质,菌丝体发酵物中化学组分全面,为进一步开发保健药物提供了资源.

蝙蝠蛾拟青霉菌发酵菌丝体的化学成分研究

目的对冬虫夏草真菌蝙蝠蛾拟青霉菌Paecilomyces hepiali发酵菌丝体进行化学成分研究。方法利用硅胶柱、凝胶柱、高效液相色谱等技术对蝙蝠蛾拟青霉菌发酵菌粉的95%乙醇提取物进行分离纯化,并通过核磁共振谱、质谱等谱学方法鉴定化合物结构。结果从95%乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部分分离得到11个化合物,分别鉴定为(22E,24R)-麦角甾-7,9,22-三烯-3β-醇(1)、(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(2)、(22E,24R)-麦角甾-6β-甲氧基-7,22-二烯-3β,5α-二醇(3)、胡萝卜苷(4)、环(亮-色)二肽(5)、环(异亮-色)二肽(6)、环(缬-色)二肽(7)、4-(2-甲酰基-5-羟甲基-1-氢-吡咯-1-基)丁酸(8)、4-(2-甲酰基-5-甲氧基甲基-1-氢-吡咯-1-基)丁酸(9)、5-羟甲基糠酸(10)、琥珀酸(11)。结论化合物1、2、4～9均为首次从拟青霉(瓶梗青霉)属真菌中分离得到。

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体化学成分的分离与鉴定(Ⅱ)

目的研究蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali Chen et Dai)菌丝体中的化学成分。方法采用正相硅胶柱、ODS柱色谱法和半制备型高效液相色谱法等分离技术,对蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的正丁醇层化学成分进行分离、纯化,并通过化合物的理化性质与波谱特征鉴定其结构。结果与结论从蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的正丁醇层中分离并鉴定了8个已知化合物,分别为2′-O-methyluridine(1)、2′-deoxythymidine(2)、3′-hydroxylgenistein(3)、6-hydroxyl-4″-O-methyldaidzin(4)、N-phenylethylacetamide(5)、cyclo(4-hydroxy-Pro-Phe)(6)、cyclo(Ala-Tyr)(7)、cyclo(Ser-Phe)(8)。化合物1~8均为首次从瓶梗青霉属中分离得到。