三七皂甙Rb1对急性呼吸衰竭大鼠的影响及作用机制的研究

目的探讨三七皂甙Rb1对急性呼吸衰竭大鼠肺脏线粒体功能的影响及作用机制。方法将Wistar大鼠随机分为4组,分别为对照组、呼吸衰竭模型组、Rb1治疗1组(低剂量组5 mg/kg)、Rb1治疗2组(高剂量组10 mg/kg),每组10只。采用舌静脉注射内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)复制大鼠急性呼吸衰竭模型,于大鼠急性呼吸衰竭3小时后,迅速取出大鼠肺脏,低温差速离心法提取肺脏组织线粒体,用荧光偏振法检测肺脏线粒体膜的流动性和膜的微粘度。用RT-PCR测定细胞色素氧化酶ⅡmRNA表达的变化,用[3H]油酸标记的大肠杆菌作为底物,测定呼吸衰竭大鼠分泌性磷脂酶A2活性的变化。结果大鼠呼吸衰竭肺脏线粒体膜的流动性下降,呼吸衰竭组线粒体膜细胞色素氧化酶Ⅱ基因表达增强,2小时达高峰。分泌型磷脂酶A2活性1小时增强,5小时达高峰,三七皂甙Rb1低剂量组(5 mg/kg)可使线粒体膜流动性下降,细胞色素氧化酶ⅡmRNA表达增强,三七皂甙Rb1高剂量组(10 mg/kg)与模型组相比有统计学意义(P<0.01)。结论三七皂甙Rb1对呼吸衰竭有保护作用(P<0.05),其中高剂量组对呼吸衰竭大鼠有显著的保护作用(P<0.01)。

三七皂甙Rb1对肺系疾病的影响及作用机制概述

三七总皂甙是中药三七的主要成分之一,三七皂甙Rb1又是其代表成分。大量研究证实,三七皂甙Rb1表达的高低与呼吸衰竭、慢性阻塞性肺病、肺纤维化等肺系疾病的发生及发展密切相关,其作用机理多为三七皂甙Rbl通过抑制分泌性磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,s PLA2)、磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)、细胞色素氧化酶(eytochrome oxi-dase,COX-2)的活性,对呼吸衰竭起到保护作用。三七皂甙Rb1还可以通过保护肺脏线粒体结构与功能而起到防治慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary diseases,COPD)的作用。同时,有研究显示,三七皂甙Rb1抗肺纤维化作用机理可能与抑制肺组织蛋白酶的活性有关。由此可见,三七皂甙Rb1在临床治疗中具有广阔的前景,值得进一步研究,以便为中医治疗肺系疾病提供更好的临床思路。

PLGA携三七皂苷Rb1微球的制备及实验条件优化研究

目的:使用聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)携带包载三七皂苷Rb1制备纳米微球并优化实验条件,寻求包封率及平均粒径的最优制备条件。方法:制备纳米微球使用复乳-溶剂挥发法,使用高效液相色谱仪测定包封率,激光粒度分析仪测定平均粒径。使用SPSS 13.0统计学软件,对影响包封率及平均粒径的因素分别进行五因素四水平正交实验,分析包封率及粒径制备的最优条件。结果:PLGA浓度10 mg/mL,O︰W1为10︰3,W2︰W1/O为2︰1,第1次超声乳化时间10 s,第2次超声乳化时间90 s的条件下制备的微球包封率最佳。对于粒径来说,每个因素最佳的水平分别为PLGA浓度20 mg/mL,O︰W1为1︰5,W2︰W1/O为2︰1,第1次超声乳化时间10 s,第2次超声乳化时间120 s。结论:高分子有机化合物PLGA可作为为外壳材料包被携带三七皂苷Rb1,通过实验优化可获得其包封率及粒径制备的最优条件。

三七皂甙单体Rb_1对大鼠脑缺血再灌注时脑细胞凋亡及cPLA_2蛋白表达的影响

目的:观察三七皂甙单体Rb1对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑细胞凋亡和胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)及相关蛋白表达的影响。方法:用线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注(MCA-IR)模型,用原位末端标记(TUNEL)法检测脑细胞凋亡,用免疫组织化学法检测cPLA2、c-fos和c-jun在脑细胞中的表达,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果:在大鼠MCA-IR脑损伤时,三七Rb1明显降低凋亡细胞数和血清中TNF-α水平及cPLA2、c-fos和c-jun在脑细胞中的表达,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:三七Rb1通过抑制cPLA2及相关蛋白表达,对大脑中动脉缺血再灌注脑损伤有良好的保护作用。

三七及其主要皂苷组分在心血管疾病中的作用研究进展

血瘀是心血管疾病发生的主要病理因素。三七为活血化瘀代表药之一,其活性部位三七总皂苷的有效成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd及三七皂苷R1等对心血管疾病均有较好干预作用,为近年研究热点。本文综述三七及其主要皂苷组分在心血管疾病领域的研究进展,为临床防治、药物研发提供思路。

高效液相色谱梯度洗脱法同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rb_1、人参皂苷Rg_1和三七皂苷R_1含量

目的 采用高效液相色谱梯度洗脱法测定三七总皂苷中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量。方法 色谱柱为C18柱（250 mm×4.6 mm,3.5μm）,流动相为乙腈-水、梯度洗脱,检测波长为203nm,流速1.0 mL/min,柱温为室温。结果 人参皂苷Rg1进样量线性范围是6.0~18μg（r=0.996 7）,平均回收率为98.79%,RSD=0.33%（n=6）;人参皂苷Rb1进样量线性范围是6.0~18μg（r=0.996 4）,平均回收率为98.64%,RSD=0.46%（n=6）;三七皂苷R1进样量线性范围是1.6~4.8μg（r=0.997 1）,平均回收率为98.84%,RSD=0.56%（n=6）。结论 该方法准确、灵敏度高,可用于三七总皂苷的质量控制。

抵挡汤早期干预对2型糖尿病大鼠肿瘤坏死因子-α与血管细胞黏附分子-1表达的影响

目的观察抵挡汤早期干预对2型糖尿病大鼠血管病变中大血管的保护作用,探讨其机制。方法采用高脂饲料喂养及链脲佐菌素诱导方法制成大鼠糖尿病模型,抵挡汤早期干预组、抵挡汤中期干预组和抵挡汤晚期干预组分别于实验成模前4周、成模和成模后4周给予抵挡汤灌胃,辛伐他汀组和罗格列酮组大鼠于成模时分别给予辛伐他汀和罗格列酮灌胃,至实验24周时结束。酶联免疫吸附法检测大鼠血清血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平,实时荧光定量PCR法检测主动脉肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清VCAM-1水平明显升高(P<0.05),主动脉TNF-αmRNA表达明显升高(P<0.05);与模型对照组比较,抵挡汤早期干预组和辛伐他汀组大鼠血清VCAM-1水平明显降低(P<0.05),并且抵挡汤早期干预组、抵挡汤中期干预组和罗格列酮组大鼠主动脉TNF-αmRNA的表达明显降低(P<0.05)。结论抵挡汤早期干预能抑制大鼠主动脉TNF-αmRNA表达升高,抑制大血管病变的炎性损伤,延缓糖尿病大血管病变的发展,发挥其保护大血管的作用。

三七总皂苷传递体的处方优化研究

目的:优化三七总皂苷(PNS)传递体的处方。方法:用薄膜分散法制备PNS传递体。以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的包封率为指标,考察脱氧胆酸钠用量、胆固醇用量、水化液相对离子强度与p H值各因素的影响,进而采用均匀设计试验优化PNS传递体的处方,并对优化处方制备的PNS传递体进行初步质量评价。结果:薄膜分散法制备PNS传递体的最优处方为:蛋黄磷脂0.45 g,胆固醇0.05 g,维生素E 0.01 g,脱氧胆酸钠0.119 g,PNS0.1 g,水化液为p H 4.75柠檬酸-磷酸缓冲液(0.1 mol/L柠檬酸溶液与0.2 mol/L磷酸氢二钠溶液按合适比例混合,对应离子强度为合适)10 m L。经优化处方制备的PNS传递体平均粒径为(121.8±3.9)nm,PDI值为0.136±0.007,Zeta电位为(-8.24±0.63)m V,人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的包封率分别为88.0%、98.7%。结论:单因素试验结合均匀设计试验可用于优化PNS传递体的处方。

人参皂苷Rg1与Rb1在心肌缺血复合肿瘤病理环境下的作用研究

目的:观察三七总皂苷主要成分人参皂苷Rg1和Rb1在心肌缺血复合肿瘤病理环境下的作用,并通过研究血管新生探索其可能的作用机制。方法:采用小鼠经皮下移植LLCs肿瘤细胞及腹腔注射异丙肾上腺素的方法制备肿瘤复合心肌缺血动物模型,再随机分为模型组、人参皂苷Rg1组、人参皂苷Rb1组;另设正常对照组。Rg1组和Rb1组分别予腹腔注射Rg1、Rb1(50 mg/kg);正常组与模型组给予等体积生理盐水。连续干预15 d后,比较各组小鼠的肿瘤生长情况、心肌组织病理形态学变化及通过免疫组织化学的方法检测心肌和肿瘤组织中CD34、vWF的蛋白表达。结果:人参皂苷Rg1及Rb1治疗组小鼠移植肿瘤生长显著受到抑制,其平均瘤重显著低于模型组(P<0.05);两组心肌组织缺血损伤显著改善,胶原含量明显减少(P<0.05,P<0.01);同时心肌组织中CD34和vWF蛋白表达量显著升高,而肿瘤组织中CD34和vWF蛋白表达量显著降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:三七总皂苷主要活性成分人参皂苷Rg1和Rb1在心肌缺血复合肿瘤病理环境下显著抑制LLCs肿瘤生长,并显著改善心肌缺血损伤,其双向作用的机制可能与对血管生成双向调节作用有关。

三七皂苷Rb1对急性呼吸窘迫综合征大鼠的影响及作用机制

目的研究三七皂苷Rb1对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠的治疗作用及机制。方法将50只Wistar大鼠分为对照组、模型组和低、中、高剂量实验组,每组10只。模型组和实验组均腹腔注射5 mg·kg^(-1)大肠埃希菌脂多糖构建ARDS模型,建模成功后,低、中、高剂量实验组分别腹腔注射2.5,5.0,10.0mg·kg^(-1)的三七皂苷Rb1,模型组和对照组腹腔注射等量生理盐水,连续干预5d。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组大鼠肺组织细胞色素氧化酶Ⅱ(COXⅡ)mRNA表达情况,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清炎性因子水平,并检测肺组织线粒体膜流动性及膜电位。结果模型组和对照组的COXⅡmRNA表达量分别为2.32±0.05,1.23±0.02,差异有统计学意义(P<0.01),实验组COXⅡmRNA表达量随三七皂苷Rb1浓度的增大逐渐降低,且中、高剂量实验组COXⅡmRNA相对表达量(1.62±0.05,1.39±0.04)均显著低于模型组(均P<0.01)。低、中、高剂量实验组血清IL-6含量分别为(279.15±22.58),(251.23±22.13),(221.36±20.34)pg·mL^(-1),INF-γ含量分别为(39.21±6.47),(38.21±5.69),(35.12±5.33)pg·mL^(-1),实验组随三七皂苷Rb1浓度的增大血清IL-6和INF-γ含量逐渐降低,且低于模型组的(448.12±34.36),(57.15±7.65)pg·mL^(-1)(均P<0.01)。实验组随三七皂苷Rb1干预浓度的增大膜荧光偏振度和微黏度逐渐降低,膜电位逐渐升高,且与模型组相比差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论三七皂苷Rb1可降低ARDS模型大鼠机体炎症程度,通过改善肺组织线粒体结构与功能起到肺保护作用。

三七不同炮制品中皂苷类成分的含量比较

目的:建立一种RP-HPLC同时测定三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re含量的分析方法,并比较不同炮制品中这4种成分含量的异同。方法:采用高效液相色谱法。色谱条件:色谱柱:Ultimate XB-C18(250mm×4.6 mm,5μm);柱温:25℃;流动相:乙腈-水梯度洗脱;检测波长:203nm。.结果:蒸三七中三七皂苷R1的平均含量为0.806%、Rg1为3.18%、Re为1.00%、Rb1为0.998%,高于相应生三七和油炸三七中相应的成分;其中,生三七中上述成分的含量分别为0.747%、3.24%、0.961%、0.977%,油炸三七中分别为0.765%、2.84%、0.860%、0.847%。结论:三七不同炮制品中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re的含量存在差异;炮制对三七皂苷类成分的含量有影响。

三七中总皂苷含量测定的对照品筛选

目的:考察选用不同皂苷类对照品为指标对样品中三七总皂苷含量测定的影响。方法:以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1、三七总皂苷为对照品,香草醛-高氯酸显色,采用紫外分光光度法测定三七中三七总皂苷的含量。结果:以不同对照品为指标测定三七总皂苷含量时,结果存在明显差异。结论:紫外分光光度法测定三七及其制剂中总皂苷含量时,可用三七总皂苷作对照品,为含有三七的制剂含量测定提供较为可靠的实验数据。

HPLC法测定三七总皂苷传递体中2个成分的含量和包封率

目的：建立测定三七总皂苷传递体中人参皂苷Rg1（Rg1）和人参皂苷Rb1（Rb1）含量和包封率的方法。方法：采用HPLC法测定Rg1和Rb1的含量，测定中色谱柱为Ultimate XB-NH2（4.6 mm ×250 mm，5 μm），流动相为乙腈-水，采用梯度洗脱，检测波长为203 nm，柱温30 ℃。以HPLC法结合离心超滤法测定包封率。结果：Rg1和Rb1线性范围分别为0.03472-0.3472、0.03420-0.3420 mg·mL -1（r≥0.999），平均回收率（n=9）分别为100.3%、100.9%；测得PNS传递体中Rg1、Rb1含量分别为3.26、2.60 mg·mL -1，包封率分别为87.9%、98.6%。结论：该法可用于三七总皂苷传递体中Rg1和Rb1的含量测定，方法准确、可靠，专属性强；离心超滤法可用于包封率的测定。

冰片对黄芪甲苷和三七总皂苷配伍有效成分在脑缺血/再灌注模型大鼠脑组织分布的影响

目的探讨冰片是否具有促进黄芪甲苷(AST IV)和三七总皂苷(PNS)配伍时主要有效成分透过大脑中动脉栓塞(MCAO)再灌注模型大鼠血脑屏障的作用。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、冰片组、AST IV组、PNS组、AST IV+PNS组、冰片+AST IV+PNS组,制备MCAO再灌注大鼠模型,以液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)测定大鼠患侧与健侧大脑皮层、小脑中AST IV和PNS有效成分(人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1)的含量。结果 AST IV无论是单用还是与PNS、冰片配伍,其口服后主要分布在大脑皮层,尤其是患侧大脑皮层。冰片+AST IV+PNS能使患侧与健侧大脑皮层中AST IV含量显著增加。PNS单用,其有效成分人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1主要分布在患侧小脑。冰片+AST IV+PNS能使患侧大脑皮层中人参皂苷Rb1含量显著增加,使健侧和患侧大脑皮层中人参皂苷Rg1含量增加,使大脑皮层尤其是患侧大脑皮层及小脑中三七皂苷R1含量增加。结论大鼠脑缺血再灌注后,AST IV与PNS的有效成分人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1在大脑皮层和小脑均有一定的分布。AST IV单用时,AST IV主要分布在大脑皮层;PNS单用时,人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1主要分布在小脑。冰片与AST IV、PNS合用后,能促进AST IV及人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1向大脑皮层富集,尤其是向缺血再灌注侧大脑皮层富集;而且能不同程度地促进AST IV,人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1在大脑皮层的吸收,尤其是在患侧大脑皮层的吸收。

基于成分状态分析溶液环境对三七总皂苷超滤分离行为的影响

目的基于三七总皂苷(PNS)存在状态,明确溶液环境对其分离行为的影响。方法以成分透过率、溶液表面张力为指标,分析单因素乙醇、无机盐、表面活性剂和pH值对PNS存在状态的影响,进而采用Box-Behnken中心组合设计建立数学模型,考察乙醇浓度、氯化钠浓度、溶液pH值对三七皂苷R1(R1)和人参皂苷Rb1(Rb1)超滤分离的影响,分析因素交互作用,明确影响规律。结果乙醇可以降低皂苷分子间作用力,pH值促进皂苷离子化,增加临界胶束浓度,PNS超滤透过率增加;无机盐的盐析作用降低临界胶束浓度,PNS透过率降低;表面活性剂类型与PNS超滤分离行为相关;通过响应面分析成分超滤透过行为,Rb1对考察因素的敏感度高于R1。结论明确了溶液环境因素对PNS超滤分离的影响规律,可以动态调节成分状态,实现皂苷类成分的目的性分离。

基于传质模型分析三七总皂苷超滤界面层分布特征及影响规律

目的 基于传质模型,探索三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)超滤膜界面层浓度分布特征及影响规律。方法 以PNS中4种指标性成分三七皂苷R_(1)(R_(1))、人参皂苷Rg_(1)(Rg_(1))、人参皂苷Rb_(1)(Rb_(1))和人参皂苷Rd_(1)(Rd_(1))为检测指标,收集膜通量与指标成分截留率,基于超滤分离系数与膜通量、溶质截留率的相关性,拟合界面层浓度幂函数方程。对比混合溶液、单体溶液、成分组合对指标性成分界面层浓度的影响规律,采用响应曲面法考察成分组合配比(Rg_(1)-Rd)、超滤膜截留相对分子质量、跨膜压力差对界面层浓度分布的影响规律,探讨超滤分离机制。结果 界面层浓度幂函数回归系数均大于0.95,指标性成分界面层浓度与溶质浓度、跨膜压力差呈正性相关,随着截留相对分子质量的增加,PNS的超滤过程以界面层过滤向溶液过滤分离逐步过渡,表现出界面分布趋向性人参三醇型皂苷>人参二醇型皂苷,其中Rg_(1)可以抑制Rd进入界面层,从而影响其分离过程。结论 构建了皂苷类成分超滤界面层浓度计算方法,初步阐明了PNS界面层分布特征和影响规律。

三七总皂苷白蛋白微球注射液在家兔体内的药物代谢动力学研究

目的:对三七总皂苷白蛋白微球注射液(PNS-BSA-MS-inj)在家兔体内的药物代谢动力学进行研究。方法:以新西兰大白兔为模型动物,以血塞通注射液为对照制剂,关节腔注射PNS-BSA-MS-inj和血塞通注射液,运用UPLC-MS/MS技术检测家兔体内人参皂苷Rb1的血药浓度变化,同时建立人参皂苷Rb1的血浆定量分析方法。利用DAS 2.0软件分析PNS-BSA-MS-inj和血塞通注射液的药物代谢动力学参数差异。结果:家兔关节腔注射PNS-BSA-MS-inj和血塞通注射液后,药物代谢动力学参数如下:半衰期(t_(1/2))分别为59.350 h和35.694 h,药峰浓度(C_(max))分别为34.340μg/mL和42.340μg/mL;达峰时间(t_(max))分别12 h和1 h;药时曲线下面积(AUC_(0-∞))分别为2265.702 mg/(L·h^(-1))和1961.411 mg/(L·h^(-1));PNS-BSA-MS-inj的相对生物利用度为116%。结论:与血塞通注射液相比,PNS-BSA-MS-inj能显著提高药物在家兔体内的滞留时间,并能提高药物在家兔体内的生物利用度,说明PNS-BSA-MS-inj具有缓释效果。