人参选育品系的遗传变异研究

目的通过对不同品系人参之间的遗传变异进行分析,为人参育种提供依据。方法采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)方法,对经过系统选育优选出的3个人参品系32个样本进行遗传多样性及遗传变异分析。结果21个随机引物共检测出170条扩增片段,其中多态性片段57条,占总扩增数的33.53%。由Nei’s和Shannon’s指数估算各品系间的遗传分化已较明显,分别占总变异的44.62%和43.04%。聚类分析结果显示各品系人参已纯化的较好,都先分别聚类后再与其他样品聚在一起。结论首次用RAPD方法在分子水平上对人参品系间和品系内的遗传变异性进行研究,证明采用系统选择的方法对人参进行培育是有效可行的。

活血止痛散的制备与质量控制

目的:制备活血止痛散并建立其质量控制方法。方法:采用薄层色谱法对活血止痛散中三七、乳香、血竭进行定性鉴别;采用薄层扫描法测定血竭中血竭素的含量。结果:血竭素高氯酸盐进样量在0.6μg～3.2μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为98.22%(RSD=1.53%)。结论:该制剂制备方法可行,质量控制方法简单、准确、重现性好。

双频超声强化对三七总皂苷提取的影响

采用双频超声(40 kHz/25 kHz)技术对三七总皂苷提取进行强化,选择乙醇质量分数、料液比、超声作用时间及提取温度因素进行正交试验,得出影响总三七总皂苷提取率的大小次序先后为:乙醇质量分数>超声作用时间>料液比>提取温度,优选出双频超声提取最佳工艺条件:质量分数为80%的乙醇,超声作用时间为30 m in,料液比为1∶20,提取温度为40℃.在这个最佳条件下试验,三七总皂苷提取率为82.41%.采用碘化钾溶液中碘的释放量来研究超声空化事件,结果表明:在相同的超声电功率下,双频超声释放碘的量远大于单频25 kHz超声和单频40 kHz超声释放的碘.

三七总皂苷微乳对小鼠模型的抗皮肤衰老作用

目的观察三七总皂苷微乳经皮给药抗皮肤衰老作用。方法昆明种小鼠每日颈背部皮下注射D-半乳糖(1 000 mg.kg-1.d-1)造成小鼠衰老模型,同时背部皮肤涂三七总皂苷微乳42 d后,测定小鼠背部皮肤组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化脂质代谢产物丙二醛(MDA)及皮肤羟脯氨酸含量;同时,对皮肤切片进行组织学病理形态观察及计算机图像定量分析。结果与对照组相比,三七总皂苷微乳使D-半乳糖所致的衰老模型对照组小鼠真皮厚度(594.11±156.96)μm较制剂组(848.29±123.57)μm显著变薄(P<0.01),胶原纤维增加,排列紧密,弹力纤维总面积也显著增加(P<0.01);皮肤中SOD活力(21.05±0.65)U.mg-1较模型组(14.51±1.8)U.mg-1及对照组(18.60±1.92)U.mg-1均显著提高;MDA含量(2.29±0.51)nmol.mg-1显著较模型组(3.88±1.62)nmol.mg-1和对照组(3.03±0.95)nmol.mg-1减少;羟脯氨酸含量(18.9±2.01)mg.g-1显著高于模型组(15.47±1.62)mg.g-1和对照组(16.4±1.73)mg.g-1。结论三七总皂苷微乳经皮给药对D-半乳糖所致的衰老模型小鼠皮肤有显著的抗衰作用。

人参产品中总皂苷、水分、灰分近红外光谱快速分析技术研究

建立一种利用近红外光谱技术快速测定人参产品中总皂苷、水分、灰分等指标的新方法。依据人参产品分等质量标准中总皂苷、水分、灰分含量测定方法,测定人参产品中总皂苷、水分、灰分等成分的含量,运用偏最小二乘法建立NIRS光谱与3种成分化学参考值之间的多元校正模型,对未知样品进行含量预测。结果表明,建立的定量模型准确性好,总皂苷、水分、灰分的内部交叉验证均方差分别是0.413、0.788、0.202;决定系数分别是0.9610、0.9529、0.8981;相对分析误差分别是5.06、4.63、3.13;对外部验证集样品进行外部验证,预测值与化学参考值的决定系数分别是0.9624、0.9475、0.8740;预测回收率是101.50%、95.60%、101.16%。近红外光谱法对人参产品中总皂苷、水分、灰分含量预测结果较好,为人参产品流通过程的快速、无损定量分析提供了依据。

三七不同种子贮藏方法对出苗及种苗质量的影响

研究了三七种子不同处理对出苗率、成苗率、平均苗重及第一、二级种苗比例的影响。试验设置4个处理,即A:种子采后带果皮立即播种;B:种子采后洗去果皮立即播种;C:种子采后洗去果皮置于4℃保鲜49d(种子装于自封袋内)后播种;D:种子采后洗去果皮湿沙室温层积49d后播种。结果显示:三七不同种子贮藏方法对其出苗率、成苗率及平均苗重的影响均达到极显著水平。较理想的方法是种子采收后洗去果皮立即播种。

人参茎叶中丙二酸单酰基人参皂苷高效液相色谱-质谱分析

采用高效液相色谱-质谱联用仪对储藏1年的干燥人参茎叶中丙二酸单酰基人参皂苷进行了定性分析。从干燥的人参茎、叶中鉴定了8种丙二酸单酰基人参皂苷类成分,分别是丙二酸单酰基三七人参皂苷R3(Malonyl notoginsenoside R3,M-NR3,1)、丙二酸单酰基人参皂苷Rg1(Malonyl ginsenoside Rg1,M-Rg1,2)、丙二酸单酰基人参皂苷Re(Malonyl ginsenoside Re,MRe,3)、丙二酸单酰基人参皂苷Rb1(Malonyl ginsenoside Rb1,M-Rb1,4)及其同分异构体、丙二酸单酰基人参皂苷Rc(Malonyl ginsenoside Rc,M-Rc,5)、丙二酸单酰基人参皂苷Rb2(Malonyl ginsenoside Rb2,M-Rb2,6)、丙二酸单酰基人参皂苷Rb3(Malonyl ginsenoside Rb3,M-Rb3,7)、丙二酸单酰基人参皂苷Rd(Malonyl ginsenoside Rd,M-Rd,8)。