UPLC法测定西洋参不同部位中皂苷类成分及质量评价研究

本文旨在建立超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-PDA)法同时测定山东西洋参中16种皂苷类成分的方法,并对山东省威海市5个地区11批西洋参芦头、主根、侧根和须根不同部位的皂苷含量进行测定,以期为山东西洋参质量控制与评价提供科学依据。采用Acquity UPLC BEH C_(18)柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为水-乙腈,梯度洗脱,流速0.4 mL/min,柱温为30℃,进样量为2μL,PDA检测器,检测波长为203 nm。16种皂苷在0.05~1.00 mg/mL范围内线性良好,相关系数均大于0.999 1,加标回收率为92.45%~103.24%,RSD为0.31%~4.60%,灵敏度、准确度及精密度均符合要求。山东省威海地区西洋参芦头、主根、侧根和须根部位皂苷含量分别为(42.69±7.01) mg/g、(32.63±4.71) mg/g、(30.80±5.15) mg/g和(37.55±5.23) mg/g。通过主成分分析及正交偏最小二乘法分析,初步筛选出人参皂苷Re、Rc、Rb_(1)、Rb_(3)和Rb_(2)作为西洋参不同部位鉴别的潜在质量标志物。本研究建立的方法可用于西洋参皂苷含量测定及不同部位的区分,对西洋参质量进行初步评价。

A new triterpenoid saponin from the leaves and stems of Panax quinquefolium L.

One new triterpcnoid saponin, quinquenoside L17 （1）, was isolated from the leaves and stems of Panax quinquefolium L., and its structure was elucidated as 20-O-[（β-D-xylopyranosyl-（1-6）-O-β-D-glucopyranosy）]-6-O-β-D-glucopyranosy1-dammar-24-ene- 3,6,12,20-tetraol, by the combination analysis of one-dimensional NMR and two-dimensional NMR, mass spectrometry, CD spectrum and chemical evidences.

Isolation and Characterization of a Bioactive Polysaccharide from Panax Quinquefolium L.

ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆａＢｉｏａｃｔｉｖｅＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＰａｎａｘＱｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍＬ．ＭＡＸｉｕ－ｌｉ＊，ＨＡＯＣｈｕｎ－ｙａｎ，ＬＵＳｈｉ－ｘｉａｎｇ，ＳＵＮＹｕｎ－ｘｉｕ，Ｌ...

西洋参中人参皂苷类HPLC测定及其指纹图谱研究

对12种西洋参中的7种人参皂苷进行HPLC同时测定,建立西洋参中人参皂苷含量测定的现代分析方法,并建立起西洋参人参皂苷类的色谱指纹图谱。HPLC测定条件:梯度洗脱,AlltimaC18色谱柱,乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相,流速为1.2ml/min,柱温为35℃,紫外检测器,检测波长203nm。在选定的最佳色谱条件下每种成分在各自的浓度范围内均具有较好的线性相关性,7种人参皂苷的加标回收率为94.1%～97.9%。对色谱指纹图谱进行相似度和聚类分析计算,得到了令人满意的结果。该法为西洋参样品的质量和品种鉴定提供了较全面的信息,并为HPLC应用于样品复杂组分的分析和鉴别开拓了新的领域。

西洋参皂苷的HPLC测定及不同提取方法比较

建立西洋参中7种人参皂苷含量测定的分析方法，并以7种人参皂苷的提取率为指标，对西洋参皂苷不同提取溶剂和不同提取方法进行比较。采用梯度洗脱，使用Alltima C18色谱柱，乙腈-0．05％磷酸水溶液为流动相，流速为1．2mL／min，柱温为35℃，检测波长为203nm；分别选用不同的提取溶剂和不同的辅助提取方法提取西洋参皂苷。在选定的色谱条件下每种成分在各自的浓度范围内均具有较好的线性相关性，7种人参皂苷的加标回收率为94．1-97．9％。本法操作简便，重现性好，结果准确；各人参皂苷不同提取溶剂和不同提取方法的提取率有一定的差异。

RP-HPLC-ICP-MS技术用于西洋参中多元素溶出特性及形态分析

采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)和反相高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术(RP-HPLC-ICP-MS)对西洋参(Panaxquinque folium.L)及西洋参提取物中多种元素的含量及元素的形态进行了研究.对西洋参中的多种元素用水、乙醇和氯仿等不同极性的溶剂进行提取,考察了这些元素在不同溶剂中的溶出特性,采用ICP-MS法对其进行定量测定;并采用RP-HPLC-ICP-MS联用技术对西洋参水提取液中多种元素(P,Mg,Al,Ca,Mn,Fe,Zn,Ni,Cu和Sr)的形态进行了分析.结果表明,元素提取率随提取溶剂极性的增加而增大,特别表现在Mg,Ca,P,Mn,Sr,Mo和Pb等元素上;采用HPLC-ICP-MS技术在以0.1mol/L的稀硝酸和超纯水为流动相,流速为0.4mL/min,进样量为20μL的条件下,各元素的无机态和有机态均得到良好分离.

基于转录组学测序探讨西洋参、丹参配伍对心肌梗死后大鼠心肌缺血的影响

目的:运用转录组学测序探讨西洋参、丹参治疗心肌梗死后心肌缺血的作用靶点。方法:通过结扎左冠状动脉前降支构建心肌梗死大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组(MOD组,等量蒸馏水)、西洋参+丹参低剂量组[XD-L组,西洋参1.5 g/(kg·d)+丹参4.5 g/(kg·d)]、西洋参+丹参高剂量组[XD-H组,西洋参3 g/(kg·d)+丹参9 g/(kg·d)]、ACEI组[培哚普利0.84 mg/(kg·d)];并以假手术大鼠作为对照组(CON组,等量蒸馏水),每组6只,连续灌胃4周。采用超声心动图测定大鼠心功能;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理改变。采用转录组学测序筛选西洋参、丹参治疗心肌梗死后缺血区的差异表达基因(DEGs),并对DEGs进行基因本体(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果:西洋参、丹参可改善心肌梗死后大鼠心功能,减轻心肌组织病理损伤。转录组学测序结果表明,与CON组比较,MOD组大鼠12个基因上调,13个基因下调。西洋参、丹参回调了MOD组的6个基因。DEGs主要富集在三羧酸(TCA)循环、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)等信号通路;与免疫炎症反应、细胞凋亡、血管新生等有关。结论:西洋参、丹参可能通过上调Wnt4表达,抑制细胞凋亡和炎症反应,从而改善心肌梗死后大鼠心功能。

HPLC 法鉴别西洋参和人参

用ＨＰＬＣ法测定了２４种西洋参根皂苷、５种西洋参茎叶皂苷、７种人参根皂苷、一种人参茎叶皂苷及８种单体皂苷（Ｒｏ，Ｒｅ，Ｒｇ１，Ｒｆ，Ｒｂ１，Ｒｇ２，Ｒｃ，Ｒｂ２）．结果表明，西洋参与人参的明显区别在于：人参含有Ｒｆ及Ｒｇ１；

西洋参皂甙的核磁共振波谱研究——Ⅰ.西洋参叶中 Ocotillol型皂甙的结构分析

本文用常规一维~1H、^(13)C核磁共振波谱和远程异核化学位移相关谱。异核化学位移相关谱和同核化学位移相关谱技术研究了西洋参叶中首次分离出的一种Ocotillol型皂甙,确认了化学结构,并对其^(13)C、~1H NMR谱线进行了归属。

三七与西洋参种间杂交F1代无性系SSR分子标记及倍性鉴定

目的:通过SSR分子标记技术及流式细胞术对三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen与西洋参Panax quinquefolium L.杂交F1代杂种进行真实性鉴定。方法:设计、筛选引物,对随机选取的60份杂交F1代无性系幼苗进行SSR分子鉴定;裂解样品细胞,利用流式细胞仪对60份样品进行倍性分析。结果:筛选出Q2、Q5两条引物可用于三七与西洋参杂交F1代的鉴定,在60份样品中,共有39份具有双亲互补条带;利用流式细胞仪对相同的60份样品进行检测,三倍体样品数为39份,表现为双亲互补条带的样品倍性检测结果均为三倍体,可认定为真杂种。结论:杂交F1代的真实杂种率为65%,SSR分析与倍性检测结果相互印证,证实了鉴定结果的可靠性。

加拿大产西洋参茎叶中的新三萜皂苷——西洋参皂苷L2

加拿大产西洋参茎叶中的新三萜皂苷———西洋参皂苷Ｌ２王金辉１）李铣（沈阳药科大学天然药物研究室，沈阳１１００１５）李文（沈阳药科大学分析测试中心，沈阳１１００１５）曾报道从加拿大产西洋参茎叶中分离得到了一个新的三萜皂苷———西洋参皂苷Ｌ１〔１〕．通过...

西洋参多糖对BABL／C小鼠肝癌肿瘤的抑制效果

目的研究西洋参根中多糖对肝脏恶性肿瘤的抑制作用，探索西洋参多糖对肝脏肿瘤的治疗作用。方法我们建立了BABL／C小鼠肝癌模型，用多糖干扰小鼠肝癌的发生发展，观测小鼠肝脏肿瘤以及脾脏的变化，评估小鼠的抗肝癌效果和西洋参多糖的免疫调节效果。结果随着多糖用量的加大，小鼠肿瘤重量明显减小，肿瘤抑制率明显增加（P〈0．05），小鼠免疫调节越显著。结论可见西洋参多糖对肿瘤的抑制作用明显，可以为肿瘤免疫治疗提供一条新途径。

陕西留坝西洋参药材HPLC指纹图谱的建立

目的:利用RP-HPLC法建立陕西留坝西洋参药材的化学指纹图谱。方法:采用低压梯度洗脱方法进行色谱分离。实验测定28批药材并记录指纹图谱,不同样品之间的相似度采用国家药典委员会开发的中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算。结果:测定28批陕西留坝西洋参样品,标定共有峰14个,其指纹图谱相似度均在0.9以上,特征峰的相对含量分布差异导致色谱概貌存在一定差异。结论:该法简便、快速、精密度高、重现性好,为留坝西洋参药材的定性鉴别及内在质量评价提供了科学依据。

加拿大产西洋参茎叶中一种ionol型葡萄糖苷

利用大孔树脂、硅胶柱色谱及ＨＰＬＣ反相柱色谱法，从加拿大产西洋参（ＰａｎａｘｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍＬ．）茎叶水提液的正丁醇萃取部分分离得到了一种ｉｏｎｏｌ型葡萄糖苷（１），根据其理化性质分析和光谱解析鉴定其为ｌｉｎａｒｉｏｎｏｓｉｄｅＡ，ｉｏｎ...

西洋参根腐病拮抗菌XT-25的生防作用研究

为探讨西洋参根腐病的生物防治技术,本研究以西洋参根腐病病原茄病镰孢菌(Fusarium solani)和土赤壳属的Ilyonectria mors-panacis为靶标,从西洋参根际土中筛选具有拮抗作用的生防菌,通过对峙培养、菌丝抑制活性、抑菌促生物质测定和离体接种防效等试验,初步探讨拮抗菌株对西洋参根腐病的抑菌机制和防治效果。结果表明,分离到1株对2种西洋参致病菌的抑菌率皆在55%以上的菌株XT-25;结合形态学特征及16S rRNA、atpD和rpoB基因序列系统发育分析结果,将菌株XT-25鉴定为淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulae);菌株XT-25对黄瓜枯萎病菌等6种病原菌的抑菌率为59%~70%。菌株XT-25不仅具有分泌蛋白酶、淀粉酶以及β-1,3葡聚糖酶等抑菌物质的能力,还具有溶解有机磷、无机磷、产氨、固氮、以及分泌IAA和ACC脱氨酶等促生物质能力。菌株XT-25挥发性气体对F.solani的抑菌率为9.04%;其可造成F.solani、I.mors-panacis菌丝的畸形。离体接种西洋参的防效试验结果表明,菌株XT-25对致病菌F.solani和I.mors-panacis引致的西洋参根腐病的防治效果分别为40.00%和24.74%。本研究结果为防治由镰孢菌和土赤壳菌引起的西洋参根腐病提供了生防材料和理论参考。

RP-HPLC同时测定人参总皂苷粗提物中人参皂苷Re和Rh_2

利用反相-高效液相色谱法（RP-HPLC）建立了快速测定人参皂苷Re和Rh2含量方法。色谱柱为Agilent Extend C18（4.6×150 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.05%乙酸梯度洗脱溶液,流速1.00 m L/min,波长203 nm,柱温30.0℃。人参皂苷Re和Rh2的线性范围分别为0.17～456.6 mg/L和6.00～449.4 mg/L;人参皂苷Re和人参皂苷Rh2的平均加标回收率分别为99.60%和99.78%。本方法快速、灵敏、准确性好,可用于测定人参和西洋参提取物中人参皂苷Re和人参皂苷Rh2的含量。

西洋参各部位皂苷成分的HPLC测定

采用索氏技术提取样品液,HPLC法测定西洋参中6种主要单体皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rd的含量。比较分析西洋参各部位总皂苷及单体皂苷的含量差异。色谱条件:Hypersil-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),水和乙腈梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长203 nm,进样量20μl。在选定的色谱条件下,各单体皂苷在其浓度范围内线性关系较好。测定结果表明,西洋参各部位皂苷成分的含量存在一定差异。该方法分析人参皂苷成分简捷有效。适用于西洋参不同样品材料的人参皂苷含量分析。

HPLC-ESI-MS法在西洋参总皂苷提取工艺研究中的应用

优选西洋参中总皂苷提取的最佳工艺。采用紫外-可见分光光度法,以人参皂苷Re为指标成分,总皂苷含量为评价指标,通过正交试验考察索氏提取法的溶剂量、提取次数、提取时间和水饱和正丁醇萃取次数对西洋参中总皂苷含量的影响,优选西洋参索氏提取工艺。采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用法比较加热回流法、超声提取法和索氏提取法3种不同方法提取的12种皂苷单体含量,确定西洋参最佳提取工艺。总皂苷最佳提取方法为索氏提取法,最佳工艺为甲醇2个虹吸量、提取温度87℃、提取次数3次、每次提取1h、水饱和正丁醇萃取3次。优选的提取工艺有效成分提取率高、所得皂苷纯度高、方法合理,为西洋参的开发利用提供参考。

HPLC法同时测定不同生长年限、部位西洋参中2类成分

目的建立HPLC法同时测定西洋参中丙二酰基人参皂苷、中性人参皂苷的含有量。方法西洋参80%甲醇提取液的分析采用COSMOSIL 5C18-MS-Ⅱ柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-磷酸缓冲盐,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃,检测波长203 nm。结果丙二酰基人参皂苷、中性人参皂苷在0.010~0.640 mg/mL范围内线性关系良好(r>0.9991),平均加样回收率96.2%~104.6%,RSD 0.74%~2.58%。结论该方法简便、重复性好,可用于西洋参的质量控制。

西洋参根腐病抗性相关基因PqDELLA1的克隆及表达分析

目的:克隆西洋参PqDELLA1基因,进行生物信息学分析,并探讨其在西洋参抗根腐病中的表达模式。方法:根据已获得的西洋参转录组数据,设计PqDELLA1基因全长扩增引物,利用无缝克隆的方法获得全长互补脱氧核糖核酸(cDNA);采用国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)在线Blastp、DNAMAN和MEGA 6.0等软件对序列进行生物信息学分析;通过实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测PqDELLA1基因的组织表达及诱导表达模式。结果:扩增得到西洋参PqDELLA1基因,其cDNA序列为1743 bp,编码580个氨基酸;PqDELLA1蛋白相对分子质量为63910,理论等电点为5.01,不含信号肽,为非跨膜蛋白,定位于细胞核,与番茄SlDELLA蛋白氨基酸相似度最高。qPCR结果显示PqDELLA1基因在叶中表达量最高,其次为茎,根中最少;该基因的表达受根腐病病原菌茄病镰刀菌(Fusarium solani)的诱导,接种后5 d内持续升高后降低。结论:首次克隆出西洋参PqDELLA1基因并进行了生物信息学和表达特性分析,发现该基因可响应F.solani的侵染,为后续解析其参与西洋参抗病反应的分子机制提供参考。