下调Pannexin2通道能增强顺铂诱导睾丸癌(I-10)细胞凋亡

目的探讨Pannexin2(Panx-2)蛋白在睾丸癌细胞中的表达水平以及干扰Panx-2表达对顺铂诱导睾丸癌(I-10)细胞凋亡的影响。方法免疫印迹法Panx-2蛋白在睾丸癌细胞中的表达水平;以睾丸癌I-10细胞株为研究对象,实验分为转染试剂对照组(mork组)、阴性对照质粒组(NC组)、干扰Panx-2组(shRNA1质粒组和shRNA2质粒组),采用免疫印迹法验证Panx-2的表达;在转染细胞中添加16μmol/L的顺铂诱导细胞死亡,通过MTT法分别检测细胞在24、48、72 h的存活率,集落克隆法检测细胞的集落形成能力;在顺铂(16μmol/L)处理8 h后,采用AnnexinV/PI双染法检测细胞的早期凋亡;在顺铂(16μmol/L)作用24 h后,免疫印迹法检测细胞凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2和Bax的表达水平。结果与I-10细胞和Tcam-2细胞相比,I-10/DDP细胞(P<0.001)和Tcam-2/DDP细胞(P<0.01)中Panx-2的表达显著增加;干扰Panx-2基因后,免疫印迹结果显示,与NC组相比,shRNA1和shRNA2组中Panx-2的表达量下降(P<0.05);MTT法显示shRNA1和shRNA2组细胞的存活率均低于NC组(P<0.001);在含顺铂培养基的培养下,集落克隆法显示shRNA1和shRNA2组细胞的集落形成能力低于NC组(P<0.001);AnnexinV/PI双染法显示shRNA1和shRNA2组的早期凋亡率(P<0.01)均低于NC组;免疫印迹结果显示,与NC组相比,shRNA1和shRNA2组中凋亡相关蛋白caspase-3表达升高(P<0.05),Bcl-2表达降低(P<0.01),Bax表达升高(P<0.05)。结论下调Pannexin2通道能增强顺铂诱导睾丸癌(I-10)细胞凋亡。