木瓜蛋白酶水解对β-酪蛋白膜的润湿性和构象的影响

目的:评价木瓜蛋白酶水解对牛β-酪蛋白(β-CN)膜的润湿性和构象的影响。方法:将β-CN通过自组装固定于芯片表面,采用消散因子石英晶体微天平(quartz crystal microbalance with dissipation,QCM-D)测量β-CN膜频率(ΔF)变化。β-CN膜水解前后的润湿性和构象变化分别通过接触角测量仪和掠角红外光谱(GA-FTIR spectra)仪测量。结果:水解后β-CN膜接触角变小,伴随酶的浓度从0.5～12.5mg/L增加,β-CN膜由疏水性向亲水性转变。FTIR测量表明β-CN膜水解后的构象发生了改变。除α-螺旋结构外,β-CN膜含有的二级结构(%)均变小,表明水解反应首先发生与β-CN分子的疏水性C端。疏水性反应和氢键结合是水解反应的主要驱动力。结论:木瓜蛋白酶水解β-酪蛋白β-CN膜导致了润湿性和构象的改变,其生物学意义有待于进一步研究。