应用噬菌体十二肽库筛选卫氏并殖吸虫抗原模拟表位

目的 从噬菌体 12肽库中筛选卫氏并殖吸虫抗原模拟表位。 方法 将卫氏并殖吸虫病患者血清免疫粗球蛋白 (Ig )作为靶分子筛选噬菌体随机 12肽库。经过 5轮淘筛 ,随机挑取 2 4个蓝色噬菌斑进行扩增 ,以ELISA检测其免疫活性并分析其诊断并殖吸虫病的价值。 结果 2 4个克隆中有 12个可以被卫氏并殖吸虫病患者血清Ig所识别 ,其中有 2个克隆 (P5、P6)具有较好的特异性和敏感性 ,可能为特异性的卫氏并殖吸虫抗原模拟表位。 结论 应用噬菌体肽库筛选可以获得卫氏并殖吸虫抗原模拟表位 ,为并殖吸虫病诊断抗原和短肽疫苗的研究提供了新的方法学依据。

两种不同噬菌体筛选方法所获的卫氏并殖吸虫抗原模拟表位抗原性比较

目的比较从兔抗蚯蚓血清免疫球蛋白(E-Ig)结合后的噬菌体12肽库中和从噬菌体肽库中筛选出的两种卫氏并殖吸虫抗原模拟表位的抗原性。方法以肺吸虫病患者血清免疫球蛋白(Pw-Ig)作为靶分子,分别对噬菌体12肽库(PwA)和经过 E-Ig 筛选一轮后的肽库(PwB)进行3轮吸附-洗脱-扩增的淘筛,随机挑取 PwA 和 PwB 蓝色噬菌斑各24个扩增,用 ELISA 方法检测并比较两者的抗原性。结果24个 PwA 克隆中有12个可以与肺吸虫病患者血清发生免疫反应,其中 A_(491)nm 值较高的2个克隆具有较好的特异性和敏感性;24个 PwB 克隆中有10个可以被卫氏并殖吸虫病患者血清所识别,其中 A_(491)nm 值较高的2个克隆具有较好的抗原性。结论从 PwA 和 PwB 中均筛选到了对肺吸虫具有潜在诊断价值的抗原模拟表位,提示以异源性抗体结合后的肽库作为源肽库来筛选寄生虫抗原模拟表位是可行的,为研制新型诊断试剂提供了一条新的着眼点。