CircPARD3调控miR-326/CXCL3轴对口腔鳞状细胞癌细胞迁移、侵袭及上皮间质转化的影响

目的探究环状RNA PARD3(circPARD3)靶向微小RNA-326(miR-326)/趋化因子配体3(CXCL3)轴对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响。方法qRT-PCR法分析OSCC组织及细胞中circPARD3和miR-326表达水平。双荧光素酶实验验证circPARD3和miR-326、CXCL3和miR-326的靶向关系。在OSCC细胞CAL-27中转染si-NC、si-circPARD3、si-circPARD3+anti-NC、si-circPARD3+anti-miR-326、miR-NC、miR-326 mimics,将未转染的CAL-27细胞设为对照组。平板克隆实验检测细胞增殖;细胞划痕实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭能力。Western blot法检测上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达。小鼠移植瘤实验验证circPARD3对OSCC肿瘤生长及miR-326/CXCL3的影响。结果在OSCC组织与细胞中,circPARD3表达上调,miR-326表达下调,抑制circPARD3表达可以显著抑制OSCC细胞增殖、迁移、侵袭及EMT。抑制miR-326可以逆转抑制circPARD3表达对OSCC细胞增殖、迁移、侵袭及EMT的抑制作用。小鼠移植瘤实验结果显示,抑制circPARD3表达,移植瘤体积及质量降低,miR-326表达水平升高,CXCL3表达水平降低。结论circPARD3在OSCC组织与细胞中表达上调,抑制circPARD3表达,上调miR-326表达,进而抑制CXCL3表达,抑制OSCC细胞迁移、侵袭及EMT。

极性蛋白Pard3在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征的相关性

目的:探讨极性蛋白Pard3在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征的相关性。方法:收集2017年6月至2019年12月我院外科行乳腺癌切除术的93例女性乳腺癌患者的乳腺癌组织、癌旁正常组织和临床资料。采用免疫组化技术检测Pard3在乳腺癌组织和癌旁正常组织中的表达情况,并结合临床资料,分析Pard3在乳腺癌组织中的表达量与患者临床病理特征之间的关系。采用二分类的Logistic回归分析进行Pard3在乳腺癌组织中的表达与患者临床病理特征相关性分析。结果:免疫组化结果显示,在乳腺癌组织中Pard3的表达水平明显下降。乳腺癌组织中阳性率为31.2%(29/93),显著低于癌旁正常组织中的阳性率72.0%(67/93),差异有统计学意义(P=0.000)。临床病理特征相关性分析结果显示Pard3的表达与患者年龄、肿瘤大小、病理类型、淋巴结转移情况之间的关系差异无统计学意义(P>0.05);与TNM分期、组织分化程度、ER、PR、HER-2、Ki-67表达之间的关系差异有统计学意义(P<0.05)。经Logistic回归分析结果显示,Pard3的表达与分化程度、ER表达呈正相关,与TNM分期呈负相关,与PR、HER-2、Ki-67表达无相关性。结论:极性蛋白Pard3在乳腺癌组织中的表达显著低于癌旁正常组织,其在乳腺癌组织中的表达量与组织分化程度、ER表达呈正相关,与TNM分期呈负相关。

VE-cad与Pard3在血管内皮中的相关研究进展

血管内皮是存在于血流与血管壁之间的一层上皮细胞,在血液与组织液之间起着天然屏障[1]。血管内皮还是人体最大的内分泌器官以及多种血管活性物质的靶器官,具有维持血液正常流动、调节血管的舒缩状态、抑制血小板聚集、抗炎等重要作用。在某些病理状态下,血管内皮容易受到各种理化因素的刺激而受损,引起内皮功能障碍。内皮细胞连接处有许多黏附分子,VE-cad是黏附连接的主要黏附分子,

PARD3B、HNT基因多态性与宁夏人群高血糖的相关性研究

目的探讨PARD3B基因rs849230及HNT基因rs3099797位点单核苷酸多态性与宁夏地区人群高血糖之间的相关性。方法 1)选取宁夏2型糖尿病患者及糖代谢异常者300例为高血糖病例组,血糖正常人群300例为对照组,两组人群同性别、同民族、同年龄(±3岁)、同居住地。并记录血压、体重、身高、腰围、臀围、空腹血糖、空腹胰岛素、血脂等临床指标。2)采用上海天昊生物科技有限公司的改进的多重高温连接酶检测反应技术(improved multiple ligase detection reaction,i MLDR)检测高血糖组和对照人群的rs849230、rs3099797位点的单核苷酸多态性,运用SPSS 17.0软件对两组样本各项数据进行统计学分析,基因交互作用采用多因子降维法分析。结果 1)高血糖组和对照组的性别、民族、年龄、文化程度、身高、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、空腹胰岛素差异均无统计学意义(P均>0.05),但是两组的体重、腰围、臀围、收缩压、舒张压、体质指数、总胆固醇、甘油三酯和胰岛素抵抗指数差异具有统计学意义(P<0.01)。2)PARD3B基因rs849230位点AA、AG+GG基因型频率在高血糖组和对照组中分别为94.0%、6.0%和93.0%,7.0%,等位基因频率分别为97.0%、3.0%和96.3%、3.7%;HNT基因rs3099797位点CC、CT+TT基因型频率在两组中分别为87.2%、12.8%和82.9%,17.1%,等位基因频率为93.3%、6.7%和91.1%、8.9%,两位点基因型和等位基因分布在两组中差异均无统计学意义(P>0.05)。回、汉民族两组两位点的基因型和等位基因分布差异亦无统计学意义(P>0.05),MDR分析两位点无交互作用(P>0.05)。结论尚不能认为HNT(rs3099797)、PARD3B(rs849230)基因多态性与宁夏回、汉人群的高血糖的易感性有关。

极性蛋白PARD3对结直肠癌转移的影响

目的观察极性蛋白PARD3在结直肠癌转移中的作用。方法应用免疫组织化学和Western blot检测38例结直肠癌组织标本中PARD3的表达，探讨PARD3与临床病理特征的相关性。实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot分别检测结直肠癌细胞中PARD3中的表达。通过RNA干扰技术敲除PARD3后，检测上皮-间充质转化（EMT）相关蛋白表达变化及Transwell实验检测细胞迁移能力的改变。结果结直肠癌组织中PARD3表达水平明显低于正常切缘组织（0.33±0.03比0.47±0.03）。PARD3低表达与患者性别、年龄及肿瘤浸润程度无明显相关（P＝0.209、0.405、1.000），而与淋巴结转移明显相关（P＝0.013）。PARD3在结直肠癌细胞株中均表达，其中SW620和LoVo中PARD3表达水明显低于其他结直肠癌细胞。SW480和LoVo细胞敲除PARD3后，E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达降低，N-钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）表达升高。Transwell实验显示小干扰RNA（siRNA）转染组中细胞穿过膜的数量明显多于对照组（214.00±35.93比66.00±13.45、521.00±26.27比146.00±23.29）。 结论PARD3表达下调促进结直肠癌转移。

Par3蛋白对体外培养子宫颈癌SiHa细胞生物学性状的影响

目的探讨Par3蛋白对子宫颈癌SiHa细胞生物学性状的影响。方法采用基因过表达和RNA干扰技术分别上调和下调子宫颈癌SiHa细胞中PARD3的表达;qRT-PCR和Western blot法检测PARD3 mRNA和Par3蛋白水平变化。Transwell小室体外实验检测其对SiHa细胞侵袭、迁移能力的影响;应用流式细胞术分析其对SiHa细胞周期及凋亡的影响。结果 SiHa细胞转染基因PARD3过表达质粒后mRNA和蛋白表达水平显著增高,PARD3 siRNA干扰SiHa细胞后PARD3 mRNA和Par3蛋白表达水平显著降低;Transwell小室体外实验表明Par3过表达后细胞侵袭、迁移能力降低,而经干扰组蛋白表达下调后细胞侵袭、迁移能力增强;流式细胞术检测提示与空白对照组相比,PARD3基因被干扰后细胞被阻滞在S期,干扰组细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。然而,上调PARD3的表达后细胞被阻滞在G_0/G_1期,过表达组细胞凋亡率明显增高(P<0.01)。结论 Par3蛋白参与子宫颈癌SiHa细胞的增殖、迁移、侵袭以及凋亡的过程,PARD3基因的异常低表达很可能对子宫颈癌的发生、发展以及侵袭、转移起促进作用。

抑制分离缺陷基因3表达的宫颈癌细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移能力观察

目的观察抑制分离缺陷基因3(PARD 3)表达的宫颈癌细胞系SiHa增殖、凋亡、侵袭及迁移能力变化,并探讨其可能作用机制。方法取对数生长期SiHa细胞分为siRNC组、siRNA1组及siRNA2组,分别用骨架质粒、PARD 3siRNA1(抑制PARD3基因表达)、PARD 3siRNA2(抑制PARD3基因表达)腺病毒真核载体转染。采用qRTPCR法检测三组转染后细胞PARD3、JAK2 mRNA。培养24、48 h时采用WesternBlotting法检测三组PARD3蛋白,培养48 h时检测三组细胞JAK2、p-JAK2蛋白。采用CCK-8法观察三组细胞增殖情况,细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况。培养48 h时取各组细胞,采用Transwell小室观察细胞迁移、侵袭情况。结果与siRNC组比较,siR⁃NA1组、siRNA2组PARD3 mRNA相对表达量低(P均<0.05);与siRNA1组比较,siRNA2组PARD3 mRNA相对表达量低(P<0.05)。与siRNC组比较,培养48 h时siRNA1组、siRNA2组p-JAK2蛋白相对表达量均增加(P均<0.05)。与siRNC组比较,培养24、48 h时siRNA1组、siRNA2组细胞的OD450值增加(P均<0.05)。与siRNC组比较,siRNA2组细胞凋亡率降低(P<0.05)。与siRNC组比较,培养48 h时siRNA1组、siRNA2组细胞迁移数、侵袭数增加(P均<0.05)。结论抑制PARD3表达的SiHa细胞细胞增殖能力升高、细胞凋亡能力降低、侵袭迁移能力增强。PARD3可能通过上调p-JAK2表达促进SiHa细胞的增殖、侵袭及迁移,抑制细胞凋亡。

候选基因多态性与湘西地区侗族2型糖尿病相关性研究

目的探讨PARD3B、LOC729993、EPHA4、HNT基因多态性与湘西地区侗族人群2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法按照WHO 1999年2型糖尿病(T2DM)诊断标准,将研究对象分为T2DM患者、糖调节受损者(IGR)和正常糖耐量者(NGT),通过问卷调查、体格测量获得人口统计学资料,同时抽取血样用于生化指标检测,采用多重PCR-SNaPshot基因分型技术,对PARD3B、LOC729993、EPHA4、HNT基因的4个多态位点rs849230、rs149228、rs16862811、rs3099797进行基因分型,分析各因素与2型糖尿病的相关性。结果结果发现年龄、胰岛素抵抗指数(INSIR)、β细胞功能指数(INSβC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)、糖尿病家族史、rs849230的AA基因型及其风险等位基因A与糖尿病和糖调节受损有关(均P<0.05);调整年龄和BMI后,rs849230位点的AA基因型与T2DM相关(OR=2.557,95%CI:1.039~6.303,P<0.05)。结论PARD3B基因的rs849230基因位点是湘西地区侗族T2DM的风险基因,可能通过影响胰岛β细胞功能引起糖尿病。