利用低盐度养殖的凡纳滨对虾培育亲虾初探

以在盐度2-3条件下养殖至9月龄的凡纳滨对虾（ Litopenaeus vannamei ）成虾为材料, 研究低盐度养殖对虾在不同盐度驯养条件下的繁殖性能, 以期为利用低盐度养殖对虾培育亲虾提供科学依据。实验盐度梯度设置为1、8、15、23和30。雌虾经剪切单侧眼柄后进行促熟培育, 促熟期间的雄虾养殖水温控制在（27±0.5）℃, 雌虾水温控制在（28±0.5）℃。定期检查雌虾卵巢和雄虾精荚的发育情况, 采用精荚人工移植技术对不同盐度条件下培育的亲虾进行组合交配, 统计受精率和孵化率, 组织切片观察卵巢发育, 综合评价各实验组合的繁殖性能。结果表明, 在实验盐度梯度范围内, 雌虾卵巢都可发育成熟; 盐度1组雌虾成熟比例仅10%, 且全部死亡; 盐度8和15下发育成熟的雌虾达70%, 可正常产卵, 但产出的卵子受精率较低, 不能孵化出无节幼体; 盐度23和30下发育成熟的雌虾超过76%, 可正常产卵、孵化, 但孵化率较低。组织切片观察, 盐度8-30范围内各组雌虾卵巢发育无明显差异。在盐度8~30范围内, 凡纳滨对虾雄虾精巢都能够正常发育成熟, 但盐度30和23实验组的雄虾精巢发育速度明显快于盐度15和8组; 随着盐度的降低, 精荚发育成熟所需要的时间明显延长; 所有盐度实验组的精荚被移植后都可与卵子受精并孵化出无节幼体。

固定化酵母细胞增加酱油香气的研究

在酱油生产中添加酵母可以有效的增加酱油的香气,实验选择不同种的酵母细胞,将其固定化后应用于酱油酿造过程中,应用单标法以2-乙基-4-羟基-5甲基-3(2H)呋喃酮(HEMF)为标准品进行气相色谱检测,结果表明固定化的莫格球拟酵母在酿造过程中产生对酱油香气有较大影响的HEMF。

凡纳滨对虾繁殖中不同亲本对子代遗传贡献率的差异

利用5个含有稀有等位基因的高度多态性微卫星位点比较了凡纳滨对虾繁殖中不同亲本对子代遗传贡献率的差异。通过稀有等位基因的5个微卫星位点能够对亲代和子代的谱系进行明确的鉴别。10个亲代个体中有8个个体对子代群体的基因库有贡献,不同个体之间的贡献率存在差别,最高为54.28%,最低为8.57%。在亲代和子代群体遗传结构的分析中,子代等位基因的数目与亲代相比降低了11.11%。子代的平均期望杂合度(He)、平均观测杂合度(Ho)和平均多态性信息含量(PIC)等指标均低于亲代。实验结果表明:亲本对子代基因库的贡献率的差异也是造成子代群体遗传变异水平降低的原因之一;微卫星标记可作为一种有效的工具用于对虾系谱的确认。

越冬亲虾及其环境的细菌学研究

通过对亲虾越冬系统的外蓄水池、预热池水、虾池水、亲虾用饵料、虾体及其病患作细菌分析,发现从外蓄水至虾体这五个环节存有细菌等微生物富集过程。稳定的环境、过多的营养、残饵、污物、病虾等是亲虾池细菌富集的要因;不健康亲虾富集并扩散病原微生物。对虾病病因、种类、亲虾成活率等的分析,发现至少31％的疾病与细菌等微生物有关。亲虾成活率与环境微生物一些参数,如几丁质降解菌含量、C/H％和V/H％间有很好的负相关。结果表明,监测亲虾越冬期各类细菌消涨势态,防治病害等是提高亲虾质量数量乃至育苗成功不可少的工作。

中国对虾亲虾反季节培育技术的初步研究

20 0 1年 1 1月 1 8～ 2 8日自日照水产研究所等几处中国对虾越冬室筛选性腺有一定发育并已交尾的雌虾 36尾 ,并采用光线控制、水温控制、饵料调节、性腺催熟等方法 ,促使对虾性腺快速发育。至 2 0 0 2年 1月 1 0日从性腺培育成熟的对虾亲虾中选取 3尾 ,使用 0 5m3 塑料桶进行苗种培育。实验结果表明 ,中国对虾不经过常规的越冬管理 ,只要具备对虾亲虾发育的环境条件 ,在一定时间内性腺即可发育成熟 。

简易过滤装置对罗氏沼虾亲虾越冬池水质的净化作用

于1993年3－4月在南汇县东海水产养殖公司罗氏沼虾育苗厂，以自制简易循环过滤装置对罗氏沼虾亲虾池水质进行净化处理。经一个月的试验，试验池水的NH3-N、NO2-N与COD值分别为对照地的32％、33％与63％；此3种指标的去除率分别为44％－62％、58％－69％与16％－19％；碎螺狮壳、沙与石子等滤料的平均净化率为16g／m3·h，活性炭为6g／m3·h。简易过滤装置可有效地净化亲虾池水质，提高亲虾养殖密度与成活率。

基于环境DNA的进口凡纳滨对虾携带水传播虾肝肠胞虫风险评估

【目的】基于环境DNA(eDNA)分析进口凡纳滨对虾携带水传播和运输虾肝肠胞虫(EHP)的风险性,为环境水中疫病监测和风险评估提供参考依据。【方法】取60批进口亲虾携带水用0.45μm硝酸纤维素膜过滤并提取eDNA,挑取10个携带水样滤膜eDNA用于凡纳滨对虾物种特异性鉴定,采用实时荧光定量PCR对所有携带水样滤膜进行EHP检测;同时以EHP阳性进口亲虾携带水开展人工感染试验,感染10 d后分别取养殖水样及虾体进行EHP检测;对进口亲虾携带水EHP阳性滤膜进行宏基因组测序分析,采用Krona对物种注释结果进行可视化展示,并将宏基因组测序分析结果与NCBI已公布的EHP氨基酸序列进行BLAST比对分析。【结果】进口亲虾携带水检测结果显示,成功从10个携带水滤膜eDNA扩增出凡纳滨对虾347 bp的特异目的片段,与原始序列片段的相似性达100%;在60批进口亲虾携带水样品中有2批携带水呈EHP阳性。EHP阳性进口亲虾携带水能成功感染虾苗组,且在虾苗肝胰腺组织分离获得成熟的EHP孢子,但亲虾组的虾体EHP检测呈阴性。宏基因组测序得到EHP的物种相对丰度值占真核动物物种的0.7%;与NCBI已公布的EHP氨基酸序列进行BLAST比对,结果获得213个同源EHP氨基酸序列;从进口亲虾携带水样品中分离鉴定获得的EHP与已报道物种黄道蟹肠孢虫(Enterospora canceri)和毕氏肠胞虫(Enterocytozoon bieneusi)的亲缘关系较近,对应的氨基酸序列相似性为别为83%和81%。【结论】进口凡纳滨对虾亲虾携带水具有传播EHP的可能性,即仅针对亲虾虾体进行EHP检测具有不完全性。eDNA检测可用来补充传统的虾体疫病监测方法,作为水环境疫病检测和风险评估的重要手段。

不同盐度季节凡纳滨对虾亲虾生物饵料营养成分测定分析

【目的】测定比较不同盐度季节下凡纳滨对虾亲虾饵料生物的营养成分组成及差异,分析营养成分的季节性变化与亲虾繁殖性能的相关性,为实现凡纳滨对虾在广西沿海全年稳定高效繁殖提供理论参考。【方法】委托广西分析测试中心对不同盐度季节的沙蚕、鱿鱼和牡蛎等亲虾饵料进行营养成分测定,分别采用火焰发射光谱法、氨基酸自动分析仪和脂肪酸气相色谱法测定微量元素、氨基酸和脂肪酸的组成及含量。【结果】在低盐季节中,饵料牡蛎、鱿鱼和沙蚕中多种矿物质元素(尤其是镁、锌和硒)含量显著降低,但磷含量显著升高,过高的磷含量会抑制其他矿物元素的吸收从而抑制对虾的生长。此外,鱿鱼的必需氨基酸比例仅在高盐季节达到标准,低盐季节未达到FAO/WTO的理想模式,蛋白质量较差。与此同时,3种生物饵料在低盐季节的20∶5n-3(EPA)和22∶6n-3(DHA)含量均呈不同程度的下降,而这两种不饱和脂肪酸与对虾繁殖性能密切相关。【结论】低盐度季节中亲虾鲜活饵料的微量元素含量、必需氨基酸比例及不饱和脂肪酸含量等营养指标显著下降或异常变化,导致饵料营养质量降低,推测其是造成亲虾摄食生长状态和繁殖性能显著降低的重要原因。

环境DNA方法对进口亲虾携带水中宿主物种的鉴定

为深入了解进口亲虾携带水中物种情况,本试验设计凡纳滨对虾物种特异性引物,采用环境DNA(eDNA)方法对境外进口亲虾携带水进行凡纳滨对虾物种鉴定,分析不同过滤膜、不同样本体积对于获取eDNA浓度的影响;对比不同来源水样、不同过滤膜和样品取样时间等因素对水样中凡纳滨对虾物种鉴定的影响;用宏基因组测序方法对水过滤膜eDNA进行测序分析。结果显示,本试验所设计的凡纳滨对虾物种特异性引物特异性好、灵敏度高,可以有效地从虾体和水中进行凡纳滨对虾物种鉴定;硝酸纤维素膜、玻璃纤维膜均有不同的过滤优势,水样品体积增加,得到的eDNA浓度也随之增加;虾体生存时间、样品取样时间对于宿主物种鉴定均会产生重要影响;宏基因组测序所得的对虾属序列中,凡纳滨对虾的物种序列占40%,物种丰度占比最高。结果表明,eDNA检测方法具有较好的灵敏性和特异性,可以作为监测水生动物携带水外来物种入侵的一个有效手段。

脊尾白虾工厂化育苗生产技术研究

通过升温孵幼,2006年6月在150 m^3的室内育苗水体内累计出虾苗690.22万尾,仔虾体长6.4～8.1 mm,平均体长为7.3 mm,平均出苗密度4.60万尾/m^3,最高出苗率63.5%,最低出苗率41.3%,平均育成率51.26%。