Determination of 10 Kinds of Inorganic Elements in Paris polyphylla Smith var. yunnanensis(Franch.) Hand.-Mazz.(and Polygerm Varieties)

[Objectives] To determine the content of 10 kinds of inorganic elements(Pb,Cu,As,Cd,Hg,Zn,Fe,Mn,Sr and Cr) in samples of Paris polyphylla Smith var. yunnanensis( Franch.) Hand.-Mazz.( and polygerm varieties) produced in different areas. [Methods] The wet digestion and technique of inductively coupled plasma optical emission spectrometry( ICP-OES) were used. [Results] Under the experimental conditions,elements were not related to each other,and several kinds of elements could be measured at the same time. The content of Pb exceeding the standard only in sample S4 of P. polyphylla Smith var. yunnanensis( and polygerm varieties),Hg was not detected in all samples,and the rest heavy metals did not exceed the limit. [Conclusions] This study was expected to provide a certain reference for the development and utilization of P. polyphylla Smith var. yunnanensis( and polygerm varieties).

Identification of Paris polyphylla Smith var. yunnanensis(Franch.) Hand.-Mazz.(Polygerm Varieties) Produced in Gaoligong Mountain Areas

[Objectives] To make original plant and microscopic identification and study the traits of Paris polyphylla Smith var. yunnanensis( Franch.) Hand.-Mazz.( polygerm varieties) produced in Gaoligong Mountain areas,and provide experimental data for their identification and application. [Methods] The original plant powder was used,and paraffin sections and physicochemical properties were identified. [Results]P. polyphylla Smith var. yunnanensis( polygerm varieties) produced in Gaoligong Mountain areas showed obvious microscopic features and physicochemical properties. [Conclusions] This study was expected to provide certain reference for identification of original plant and medicine and formulation of quality standard for P. polyphylla Smith var. yunnanensis( polygerm varieties) produced in Gaoligong Mountain areas,and provided basis for their further research and development.

云南重楼果皮中1个新的C_(21)甾体皂苷

目的:研究云南重楼果皮中的甾体皂苷类成分。方法:采用HPD-100大孔吸附树脂柱、正相硅胶柱、ODS柱、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱和半制备型高效液相色谱等方法对云南重楼果皮70%乙醇渗漉提取物中的甾体皂苷类成分进行系统研究,通过现代波谱学技术结合参考文献对化合物结构进行鉴定。结果:从云南重楼果皮中分离得到8个甾体皂苷类化合物,分别鉴定为:17α-hydroperoxide pregn-5-en-20-one-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)]-β-D-glucopyranoside(1)、重楼皂苷Ⅳ(2)、ypsilandroside L(3)、重楼皂苷Ⅲ(4)、pregna-5,16-dien-3β-ol-20-one-3β-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)]-β-D-glucopyranoside(5)、pregna-5,16-dien-3β-ol-20-one-3β-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[α-L-arabinopyranosyl-(1→4)]-β-D-glucopyranoside(6)、pregna-5,16-dien-3β-ol-20-one-3β-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)]-β-D-glucopyranoside(7)、aethioside A(8)。结论:其中,化合物1为一个新的C_(21)甾体皂苷类化合物,化合物3、5、6、8为首次从重楼属植物中分离得到。

云南重楼果皮化学成分研究

目的:研究云南重楼Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand._Mazz.果皮中的化学成分。方法:采用HPD-100大孔吸附树脂柱层析、硅胶柱层析、ODS柱层析、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱层析和半制备型高效液相色谱等方法对云南重楼果皮70%乙醇渗漉提取物中的化学成分进行系统研究,通过NMR和HR-MS现代波谱学技术结合参考文献对化合物的结构进行鉴定。结果:从云南重楼果皮的70%乙醇渗漉提取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为:山柰酚(1)、槲皮素(2)、异鼠李素(3)、山柰酚-3-O-β-D-半乳糖苷(4)、紫云英苷(5)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(6)、异槲皮苷(7)、金丝桃苷(8)、kaempferol-3-O-β-D-galactopyranosyl-(l→6)-β-D-glucopyranoside(9)、isorhamnetin-3-O-β-D-galactopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(10)、异鼠李素-3-O-β-D-龙胆二糖苷(11)、20-羟基蜕皮素(12)、薯蓣皂苷(13)、diosgenin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→4)-α-L-rhamnopyranosyl(1→4)-[α-L-rhamnopyranosyl(1→2)]-β-D-glucopyranoside(14)、偏诺皂苷元(15)、4-butyl-5-ethyl-3,4-dihydropyran-2-one(16)。结论:其中,化合物4、7、9、10、16为首次从云南重楼中分离得到,化合物9、10、16为首次从重楼属植物中分离得到。

滇重楼的化学成分研究

目的研究滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis根茎中的化学成分。方法利用正相硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、反相制备色谱等手段进行分离纯化,并通过1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS等波谱技术进行结构鉴定。结果从醋酸乙酯层中分离得到了7个化合物,分别鉴定为豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅰ)、1-O-(β-D-葡萄糖基)-(2S,3S,4E,8E)-2-[(2′R)-2′-羟基十六酰氨基]-4(E),8(E)-十八二烯-1,3-二醇(Ⅱ)、β-蜕皮激素(Ⅲ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅵ)和偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅶ)。结论化合物Ⅱ为首次从该属植物中分离得到。

云南重楼种子萌发过程内源激素含量及酶活性变化研究

为探讨云南重楼种子萌发不同阶段的酶和内源激素的变化,本研究采用生理生化方法测定云南重楼种子萌发不同阶段超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、苹果酸脱氧酶(MDH)和6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6-PDH)活性,以及吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA_3)、脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)、反玉米素(TZ)、茉莉酸(JA)6种内源激素的含量,并分析比较其差异。结果表明,云南重楼种子在即将出苗阶段的SOD、POD活性迅速升高,CAT、MDH和G-6-PDH活性降低;IAA、GA_3含量均在即将出苗阶段显著高于其他阶段,种子休眠解除后ABA含量迅速下降。胚根刚突破种皮阶段,其SA、TZ、JA含量均最高,SOD、POD、IAA、GA_3间呈极显著正相关(P<0.01),MDH与G-6-PDH呈极显著正相关(P<0.01),ABA与GA_3呈显著负相关(P<0.05),SA、TZ、JA间呈极显著正相关(P<0.01),IAA/ABA、GA_3/ABA、SA/ABA在种子休眠解除和出苗阶段均呈上升趋势。综上,SOD、POD、GA_3是种子出苗阶段的关键物质,TZ、SA和JA对种子休眠解除具有重要的影响,IAA/ABA、GA_3/ABA及SA/ABA增大对种子休眠解除和出苗均有促进作用。本研究结果为云南重楼种子繁殖提供了理论依据和实践指导。

AM真菌对滇重楼根际土壤微生物数量及酶活性的影响

目的:研究接种AM真菌后滇重楼根际土壤微生物和酶活性的变化规律,为人工栽培滇重楼提供技术基础。方法:通过室温盆栽接种试验与室内分析相结合的方法,观察灭菌土壤条件下接种28种丛枝菌根(AM)真菌对滇重楼根际土壤微生物和土壤酶活性的影响。结果:滇重楼与AM真菌之间存在一定的相互选择性。AM真菌诱导处理后,不同AM真菌对滇重楼根际土壤微生物的数量、微生物生物量碳和土壤酶活性的影响有所差异,AM真菌的施用降低了滇重楼根际土壤中可培养真菌的数量,而对可培养细菌、放线菌数量呈现出增加的趋势,并提高了根际土壤微生物多样性指数、微生物生物量碳含量以及蛋白酶、脲酶、磷酸酶、过氧化氢酶和蔗糖酶活性。结论:滇重楼人工栽培中施用AM真菌能促使滇重楼根际微生物区系从低肥力的"真菌型"向高肥力的"细菌型"转化的趋势,提高根际土壤微生物多样性和酶活性,有助于维持滇重楼根际微生态系统的稳定性与和谐性,证明了田间人工栽培滇重楼施加AM菌剂的有效性及可能性。

滇重楼内生真菌的生物学性状及其甾体化合物含量

从滇重楼根状茎中分离到133株内生真菌,对其中的7株真菌进行了生物学性状观察和甾体化合物含量测定。结果表明,2号、8号和12号真菌能合成大量的甾体化合物,培养液中甾体化合物的产率分别为208.62,144.97和198.79 mg/L。

滇重楼不同部位氨基酸测定及营养评价

【目的】研究了滇重楼茎、叶、花和根茎的氨基酸组成、含量以及营养价值,为滇重楼资源的综合利用提供理论依据。【方法】滇重楼茎、叶、花和根茎的氨基酸测定采用日立L-8800氨基酸自动分析仪,营养评价采用氨基酸比值系数法。【结果】滇重楼茎、叶、花和根茎中均检测出17种常见氨基酸(色氨酸被水解破坏未检出),其氨基酸总量叶(13.96%)>花(10.92%)>茎(4.54%)>根茎(4.02%);滇重楼茎、叶、花和根茎中富含药效氨基酸,且均检出γ-氨基丁酸;滇重楼的茎、叶、花和根茎中均含有8种呈味氨基酸,其含量分别为2.86%、8.21%、6.18%、2.34%;滇重楼的茎、叶、花和根茎中必需氨基酸与总氨基酸的比值(E/T)分别为0.35、0.39、0.39、0.38,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值(E/N)分别为0.53、0.65、0.65、0.61,氨基酸配比较为合理;滇重楼植株的必需氨基酸含量接近FAO/WHO推荐的标准模式谱,有较高的营养价值;滇重楼茎、叶、花和根茎中蛋氨酸+胱氨酸均为第一限制氨基酸,营养价值从高到低依次为根茎>叶>茎>花。【结论】滇重楼地上部分具有较高的营养价值和保健作用,可作为动物饲料对其进行开发利用。

滇重楼内生真菌抗菌活性的筛选和菌株鉴定

以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)和产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)为指示菌种,采用滤纸片法对分离自滇重楼〔Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.〕的10株内生真菌进行抗菌活性检测。结果发现,10株被测菌株的发酵物乙醇提取物中有3株无抗菌活性,另外7株均只对金黄色葡萄球菌有抑制作用。其中菌株YL0401发酵物乙醇提取物具有较高的抗菌活性,抑菌圈直径为30.7 mm,抑菌效果为72.7%。结合形态学特征和ITS-rDNA序列分析确定菌株YL0401为墙粘鞭霉(Gliomastix murorum)。

滇重楼新品种选育研究进展

对滇重楼新品种选育研究现状,滇重楼新品种选育目标和方法进行了总结,分析了滇重楼育种中存在的问题,提出单株混合选择和集团混合选择是目前简单有效快速的滇重楼育种方法,加速滇重楼遗传变异规律的研究可提高育种效率,加速性状相关性及组织培养技术的研究。

滇重楼表型性状变异、主成分、相关及通径分析

目的：调查滇重楼居群表型性状的变异范围,寻找与产量密切相关的表型性状,为今后滇重楼品种选育提供参考。方法：以云南省西双版纳地区经3年引种栽培的野生滇重楼居群为研究对象,随机标记滇重楼植株,观测其表型性状,并进行表型性状变异、主成分、相关性、方差和通径分析。结果：该滇重楼居群11个表型性状变异较大,主要分布在产量、长势、遗传特征几个方面。不同生长年限（4-10年）滇重楼植株地上部分性状包括茎高、茎粗、花茎高、花茎粗、叶数、叶长、叶宽无显著性差异（P〉0.05）,地下部分性状包括根重、根长、根粗随植株生长年限增加而增加,差异显著（P〈0.05）。滇重楼各主要性状对根重的作用效应依次为：根粗（0.2550）〉根年限（0.1183）〉根长（0.0202）〉茎粗（0.0081）〉茎高（0.0044）〉叶数（0.0025）〉叶长（0.0018）〉叶宽（0.0004）〉花茎高（0.0003）〉花茎粗（0.0001）。结论：该滇重楼居群表形性状在产量、长势、遗传特征几个方面变异丰富,其中地上部分表型性状差异与生长年限无关,生长年限影响的主要是地下部分性状。在滇重楼不同根茎类型挑选时,根粗可以作为首选性状,在不方便获得根茎性状信息的情况下,茎粗可以作为首选性状。

不同加工方法对滇重楼中4种重楼皂苷成分含量的影响

目的:优选出滇重楼药材的最佳加工方法。方法:以重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ和重楼皂苷Ⅶ4种主要有效成分含量为主要指标,采用超高效液相色谱测定不同前处理方法、不同干燥方法和不同炮制方法的重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ含量。色谱柱为Shim-pack XR-ODSⅢ(150 mm×2.0 mm,2.2μm),流动相为乙腈(A)-0.05%甲酸水(B),检测波长为203 nm。结果:不同加工方法对滇重楼中4种重楼皂苷成分含量的影响有显著差异,除烘箱干燥外重楼皂苷Ⅵ在所有样品中均未被检测到。不同前处理方法对滇重楼中4种重楼皂苷含量均有不同程度的影响,重楼总皂苷含量为:沸水处理>盐水处理>蒸汽处理>微波处理。不同干燥方法对滇重楼中4种重楼皂苷含量也有不同程度的影响,重楼总皂苷含量为:烘箱干燥>晒干>阴干。不同炮制方法对滇重楼中4种重楼皂苷含量同样有不同程度的影响,加工炮制一体化重楼总皂苷含量明显高于传统炮制重楼总皂苷含量。结论:加工炮制一体化方法为滇重楼药材的最佳加工方法,不仅避免因为复杂的加工炮制造成的中药材损耗和质量下降,同时还能减少人力资源和能源的消耗,加快饮片上市时间,达到降低中药材加工成本和提高中药饮片质量的目的。

滇重楼茎秆软腐病病原鉴定

【目的】明确滇重楼茎秆软腐病的病原,以期为该病的防治提供依据。【方法】通过田间调查采样,初步掌握滇重楼茎秆软腐病的发生规律,通过稀释分离、柯赫氏法则验证获得病原菌,基于形态特征和16S r DNA、gyr B、rpo B基因序列特征对病原菌进行鉴定。【结果】从发病植株上分离出1株细菌,经柯赫氏法则验证为滇重楼茎秆软腐病病原菌,基于形态和分子生物学特征将其鉴定为胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum。【结论】胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种P.carotovorum subsp.carotovorum是滇重楼茎秆软腐病的病原菌。

鄂西北地区重楼药材中皂苷含量比较

目的分析鄂西北地区重楼药材中重楼皂苷的含量。方法收集鄂西北地区相同产区和不同产区的重楼药材样品,进行重楼皂苷的含量分析。结果不同产区、相同产区不同批次的样品中重楼皂苷含量差别较大。结论生长环境和年限都是影响重楼药材质量的重要因素;要实现中药现代化必须大力推进重楼人工种植,鄂西北地区具备推行重楼人工种植的地理条件。

三种植物EST-SSR引物在滇重楼上的通用性分析

为了筛选适合用于滇重楼种质资源整理、评价和遗传研究的SSR标记,首次利用百合(35对)、延龄草(10对)、薯蓣(5对)的EST-SSR标记对5份滇重楼材料进行PCR扩增,分析3种植物引物在滇重楼中的通用性。结果显示,40对引物在滇重楼中能有效扩增,占引物总数的80.0%,其中32对引物具有多态性,占引物总数的64.0%,引物通用率较高;利用15对具有多态性的引物对35份滇重楼材料进行多态性检测,等位基因数(A)、有效等位基因数(Ae)、Nei’s基因多样性(H)、Shannon指数(I)及多态位点百分比(PPB%)分别为1.9955、1.2634、0.1811、0.3075和99.5%,滇重楼显示出较为丰富的遗传多样性。3种植物的ESTSSR引物在滇重楼中具有较高的通用性,通过对3种植物EST-SSRs引物的开发,有助于重楼属在遗传多样性、基因定位、连锁图谱的构建及比较基因组学等方面的研究。

滇重楼药材产品质量分级标准研究

测定不同类型的滇重楼[Paris polyphylla Smith var.Yunnanensis(Franch)Hand.-Mazz]药材产品根茎粗、根茎长、根茎鲜重、根茎干重和根茎有效成分(重楼皂苷I、II、Ⅵ、Ⅶ)含量,使用SPSS和DPS统计分析软件,对所测数据进行K-均值聚类和灰色关联度分析。结果把滇重楼产品质量分成4个等级,并制定出了质量分级标准,具有生产实用性,可作为滇重楼产品质量控制标准。

栽培滇重楼种子采收期研究

目的明确滇重楼种子适宜采收期,为滇重楼的科学采种提供参考。方法通过室内分析、发芽和播种试验,分别比较了两个滇重楼种植基地采收的橙色、红色和深红色外种皮种子的大小、千粒重、发芽率、成苗率及种苗农艺性状。结果深红色外种皮种子大小和千粒重的数据高于其它两种颜色外种皮种子;深红色外种皮种子的发芽率和成苗率明显高于其它两种颜色外种皮的种子,且差异有统计学意义;深红色外种皮种子繁殖种苗的主要农艺性状优于其它两种颜色外种皮种子的种苗。结论滇重楼种子的最适宜采收期为果实裂开后外种皮为深红色时。

水分胁迫下丛枝菌根真菌对滇重楼品质的初步影响

目的:研究水分胁迫下丛枝菌根(AM)真菌对滇重楼根茎品质及其根茎甾体皂苷类成分的影响。方法:采用盆栽实验,接种AM真菌,观察滇重楼根茎的品质和根茎中甾体皂苷的含量。结果:与对照组(CK)相比,水分胁迫下接种AM真菌对滇重楼根系的菌根侵染率无影响,但能增强菌根侵染强度和改善滇重楼根茎的品质,根茎中甾体皂苷组分的相对比例也有不同程度的改变。结论:水分胁迫下接种AM真菌,有利于提高滇重楼根系侵染强度、改善滇重楼根茎的品质,并影响滇重楼根茎甾体皂苷数量和主要组分的含量。

云南重楼生物量积累与营养分配研究

文章对不同繁殖方式、不同生长年限的云南重楼进行了生物量积累和营养分配研究。结果表明,1～8年生云南重楼根茎切段苗、实生苗生物量逐年递增,未有最高峰值。各营养器官折干率和营养分配高低顺序：根茎〉叶〉茎〉须根。根茎干物质积累及全株总生物量积累分为3个生长阶段：缓慢期、增重快速期、增重加速期;叶、茎干物质积累可分为缓慢期、增重快速期、增重平缓期。