Determination of 10 Kinds of Inorganic Elements in Paris polyphylla Smith var. yunnanensis(Franch.) Hand.-Mazz.(and Polygerm Varieties)

[Objectives] To determine the content of 10 kinds of inorganic elements(Pb,Cu,As,Cd,Hg,Zn,Fe,Mn,Sr and Cr) in samples of Paris polyphylla Smith var. yunnanensis( Franch.) Hand.-Mazz.( and polygerm varieties) produced in different areas. [Methods] The wet digestion and technique of inductively coupled plasma optical emission spectrometry( ICP-OES) were used. [Results] Under the experimental conditions,elements were not related to each other,and several kinds of elements could be measured at the same time. The content of Pb exceeding the standard only in sample S4 of P. polyphylla Smith var. yunnanensis( and polygerm varieties),Hg was not detected in all samples,and the rest heavy metals did not exceed the limit. [Conclusions] This study was expected to provide a certain reference for the development and utilization of P. polyphylla Smith var. yunnanensis( and polygerm varieties).

Identification of Paris polyphylla Smith var. yunnanensis(Franch.) Hand.-Mazz.(Polygerm Varieties) Produced in Gaoligong Mountain Areas

[Objectives] To make original plant and microscopic identification and study the traits of Paris polyphylla Smith var. yunnanensis( Franch.) Hand.-Mazz.( polygerm varieties) produced in Gaoligong Mountain areas,and provide experimental data for their identification and application. [Methods] The original plant powder was used,and paraffin sections and physicochemical properties were identified. [Results]P. polyphylla Smith var. yunnanensis( polygerm varieties) produced in Gaoligong Mountain areas showed obvious microscopic features and physicochemical properties. [Conclusions] This study was expected to provide certain reference for identification of original plant and medicine and formulation of quality standard for P. polyphylla Smith var. yunnanensis( polygerm varieties) produced in Gaoligong Mountain areas,and provided basis for their further research and development.

滇重楼根茎有效成分与土壤钾状况的关系研究

通过对滇重楼(Paris polyphylla var.yunnanensis)主要分布区25个县(市)、75个采样点根茎的总皂甙、多糖含量与土壤全K和速效K含量的相关分析,探讨了土壤K素营养在滇重楼品质形成中的作用。结果显示,土壤全K和速效K含量与根茎中总皂甙含量呈极显著正相关,与根茎中多糖含量呈显著正相关。根茎总皂甙和多糖含量与根茎K含量呈显著正相关。研究表明,丰富的土壤全K和速效K供应有利于滇重楼根茎总皂甙和多糖的合成与积累。

滇重楼的化学成分研究

目的研究滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis根茎中的化学成分。方法利用正相硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、反相制备色谱等手段进行分离纯化,并通过1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS等波谱技术进行结构鉴定。结果从醋酸乙酯层中分离得到了7个化合物,分别鉴定为豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅰ)、1-O-(β-D-葡萄糖基)-(2S,3S,4E,8E)-2-[(2′R)-2′-羟基十六酰氨基]-4(E),8(E)-十八二烯-1,3-二醇(Ⅱ)、β-蜕皮激素(Ⅲ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅵ)和偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅶ)。结论化合物Ⅱ为首次从该属植物中分离得到。

滇重楼高效繁育和高产栽培研究

在丽江市鲁旬乡对云南稀缺名贵药材滇重楼进行种子与根茎繁殖、不同遮荫方武的栽培技术研究。结果显示：根茎切割繁殖与种子繁殖相比，由于种植周期短，根茎增重快，具有更高的经济效益，且带顶芽切块繁殖优于不带顶芽切块繁殖，但繁殖系数低且易感病害；滇重楼在遮荫网下种植效果较好，其透光率以20％～30％为宜。

云南重楼高产栽培施肥研究

为探明肥料施用对云南重楼产量的影响，采用不同梯度施肥水平研究有机肥对云南重楼产量的影响；采用三元二次回归正交设计方法研究NPK无机肥对云南重楼产量的影响。结果表明，云南重楼的高产需要较高的肥力条件，在中等以下的土壤肥力条件下，云南重楼的最佳农家肥施肥量为3000～4500kg/667m2之问。N素和P素是云南重楼生长的养分限制因子。可见，施用适宜有机肥和N、P无机肥可以大幅度提高云南重楼单位面积产量。

不同海拔、土壤类型及肥力对云南重楼产量和质量的影响研究

研究了不同海拔高度、土壤类型及肥力条件下云南重楼的生长情况。结果表明,在1700～3100 m海拔范围内,云南重楼的产量与海拔高度没有相关关系,但与土壤的类型、肥力和耕作水平有关系;云南重楼在经常翻用、有机质含量或速效肥力较高的壤土中生长可获得较高的产量。不同海拔、土壤类型及肥力对云南重楼质量没有影响。

滇重楼授粉特性的初步研究

通过对滇重楼授粉特性初步研究，结果表明：①滇重楼是常异花授粉植物，且不存在无融合生殖；②自然界中的滇重楼通过昆虫进行传粉，属虫媒植物；③澳重楼自花授粉结籽率低，人工异花授粉是提高种子产量的有效措施；④滇重楼的最佳授粉期是在花粉囊裂开后的第5天，花粉囊裂开后的5d内完成人工授粉效果最好，授粉后到完成受精有效时间为24—96h。本文为滇重楼育种和提高种子产量提供科学依据。

云南重楼种子萌发过程内源激素含量及酶活性变化研究

为探讨云南重楼种子萌发不同阶段的酶和内源激素的变化,本研究采用生理生化方法测定云南重楼种子萌发不同阶段超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、苹果酸脱氧酶(MDH)和6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6-PDH)活性,以及吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA_3)、脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)、反玉米素(TZ)、茉莉酸(JA)6种内源激素的含量,并分析比较其差异。结果表明,云南重楼种子在即将出苗阶段的SOD、POD活性迅速升高,CAT、MDH和G-6-PDH活性降低;IAA、GA_3含量均在即将出苗阶段显著高于其他阶段,种子休眠解除后ABA含量迅速下降。胚根刚突破种皮阶段,其SA、TZ、JA含量均最高,SOD、POD、IAA、GA_3间呈极显著正相关(P<0.01),MDH与G-6-PDH呈极显著正相关(P<0.01),ABA与GA_3呈显著负相关(P<0.05),SA、TZ、JA间呈极显著正相关(P<0.01),IAA/ABA、GA_3/ABA、SA/ABA在种子休眠解除和出苗阶段均呈上升趋势。综上,SOD、POD、GA_3是种子出苗阶段的关键物质,TZ、SA和JA对种子休眠解除具有重要的影响,IAA/ABA、GA_3/ABA及SA/ABA增大对种子休眠解除和出苗均有促进作用。本研究结果为云南重楼种子繁殖提供了理论依据和实践指导。

云南重楼根状茎切段苗繁育技术研究

研究了不同生长调节剂、种植时间、土壤湿度、基质等因素对云南重楼根状茎切段潜伏芽萌发和出苗的影响。结果表明:用6-BA 2 mg/L和生根粉ABT1适宜浓度能提高云南重楼根茎切段的繁殖率。其中6-BA 2 mg/L处理云南重楼根茎切段可显著提高切段多芽率。大田常规切段种植时,冬季是进行根状茎切段种植的合适时间;集中育苗时,切段在壤土中进行潜伏芽的萌发效果较好。土壤相对含水量60%左右,可使繁殖材料损失率降低到10%以内。

滇重楼内生真菌的生物学性状及其甾体化合物含量

从滇重楼根状茎中分离到133株内生真菌,对其中的7株真菌进行了生物学性状观察和甾体化合物含量测定。结果表明,2号、8号和12号真菌能合成大量的甾体化合物,培养液中甾体化合物的产率分别为208.62,144.97和198.79 mg/L。

云南重楼植物内生真菌的分离及抗菌活性筛选

从云南重楼[Paris polyphylla Smithvar.yunnnanensis(Franch.)Hand.Mazz.]块状茎中分离出166株内生真菌,对其进行形态分类鉴定归于4目,6科,20个属,体现了云南重楼植物内生真菌的生物多样性特征。同时,选择与人类和植物相关的37株病原微生物作为抗菌活性筛选指示菌,进行了云南重楼植物内生真菌抗菌活性的初步研究。结果表明,4株内生真菌对细菌、植物致病真菌、皮肤致病真菌多种病原微生物具有显著抑制生长的作用。

不同遮荫方式及遮荫率对滇重楼生长的影响研究

【研究目的】探讨不同遮荫方式及遮荫率对滇重楼根茎增重倍数、存活率及产量的影响,为确定合理的栽培措施提供依据。【方法】比较了遮阳网、向日葵、玉米、三分三4种不同遮荫方式条件下滇重楼生长情况。【结果】优选出最适宜的遮荫方式和遮荫率。【结论】10g左右的种苗移栽种植3年期间,最佳的重楼遮荫方式采用遮阳网,遮荫率在60%左右。

云南重楼不同地理种源分析评价与研究利用

在相同种植条件下,对来源于云南省23份云南重楼种源进行了物候期、形态特征及经济性状的观察、分析与评价。结果表明,不同地理种源的重楼生长物候期、形态特征及经济性状因地理来源不同有一定的差异;综合物候期、形态特征及经济性状的分析与评价,来自于鹤庆县马鞍山、玉龙县巨甸的重楼为优势种源,可作为今后良种选育的种质材料。

AM真菌对滇重楼根际土壤微生物数量及酶活性的影响

目的:研究接种AM真菌后滇重楼根际土壤微生物和酶活性的变化规律,为人工栽培滇重楼提供技术基础。方法:通过室温盆栽接种试验与室内分析相结合的方法,观察灭菌土壤条件下接种28种丛枝菌根(AM)真菌对滇重楼根际土壤微生物和土壤酶活性的影响。结果:滇重楼与AM真菌之间存在一定的相互选择性。AM真菌诱导处理后,不同AM真菌对滇重楼根际土壤微生物的数量、微生物生物量碳和土壤酶活性的影响有所差异,AM真菌的施用降低了滇重楼根际土壤中可培养真菌的数量,而对可培养细菌、放线菌数量呈现出增加的趋势,并提高了根际土壤微生物多样性指数、微生物生物量碳含量以及蛋白酶、脲酶、磷酸酶、过氧化氢酶和蔗糖酶活性。结论:滇重楼人工栽培中施用AM真菌能促使滇重楼根际微生物区系从低肥力的"真菌型"向高肥力的"细菌型"转化的趋势,提高根际土壤微生物多样性和酶活性,有助于维持滇重楼根际微生态系统的稳定性与和谐性,证明了田间人工栽培滇重楼施加AM菌剂的有效性及可能性。

土壤营养与人工栽培滇重楼品质相关性评价

目的:通过研究云南省滇重楼人工栽培区重楼皂苷含量、种类及其栽培土壤营养状况,探索其栽培区土壤营养与重楼品质的相关性。同时为合理施肥和进一步研究重楼栽培区土壤营养状况提供参考及为人工高产、优质种植滇重楼提供科学依据,最终实现濒危药用植物资源的保护和可持续利用,为市场提供高品质的药材产品。方法:土壤常规5项测定分析了云南省9个地州29个人工栽培滇重楼区域0～30 cm土层的营养状况,分析了相应栽培区滇重楼根茎的主要品质,利用多元线性逐步回归分析方法分析土壤主要养分对重楼药用成分质量的影响。结果:在一定范围内,滇重楼根茎的偏诺类皂苷Ⅶ含量与土壤有机质含量和pH呈线性正相关;偏诺类皂苷H含量与有机质、速效磷含量和pH呈线性正相关;薯蓣类皂苷Ⅰ含量与土壤速效磷含量呈线性负相关,与土壤速效钾含量呈线性正相关;薯蓣类皂苷Ⅱ含量与土壤有机质和速效钾含量呈线性正相关。结论:土壤主要养分对重楼药用成分质量存在影响。

滇重楼不同部位氨基酸测定及营养评价

【目的】研究了滇重楼茎、叶、花和根茎的氨基酸组成、含量以及营养价值,为滇重楼资源的综合利用提供理论依据。【方法】滇重楼茎、叶、花和根茎的氨基酸测定采用日立L-8800氨基酸自动分析仪,营养评价采用氨基酸比值系数法。【结果】滇重楼茎、叶、花和根茎中均检测出17种常见氨基酸(色氨酸被水解破坏未检出),其氨基酸总量叶(13.96%)>花(10.92%)>茎(4.54%)>根茎(4.02%);滇重楼茎、叶、花和根茎中富含药效氨基酸,且均检出γ-氨基丁酸;滇重楼的茎、叶、花和根茎中均含有8种呈味氨基酸,其含量分别为2.86%、8.21%、6.18%、2.34%;滇重楼的茎、叶、花和根茎中必需氨基酸与总氨基酸的比值(E/T)分别为0.35、0.39、0.39、0.38,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值(E/N)分别为0.53、0.65、0.65、0.61,氨基酸配比较为合理;滇重楼植株的必需氨基酸含量接近FAO/WHO推荐的标准模式谱,有较高的营养价值;滇重楼茎、叶、花和根茎中蛋氨酸+胱氨酸均为第一限制氨基酸,营养价值从高到低依次为根茎>叶>茎>花。【结论】滇重楼地上部分具有较高的营养价值和保健作用,可作为动物饲料对其进行开发利用。

云南重楼种苗分级栽培生长情况分析

目的:研究云南重楼种苗分级栽培对云南重楼生长的影响。方法:对云南重楼不同分级种苗种植3年后的根状茎大小、存活率、根状茎增重、小区产量等指标进行比较研究。结果:优选出最佳的种苗分级。结论:最适宜的云南重楼种苗根状茎为10g左右,种植3年增重倍数可达3倍以上。

滇重楼新品种选育研究进展

对滇重楼新品种选育研究现状,滇重楼新品种选育目标和方法进行了总结,分析了滇重楼育种中存在的问题,提出单株混合选择和集团混合选择是目前简单有效快速的滇重楼育种方法,加速滇重楼遗传变异规律的研究可提高育种效率,加速性状相关性及组织培养技术的研究。

三种植物EST-SSR引物在滇重楼上的通用性分析

为了筛选适合用于滇重楼种质资源整理、评价和遗传研究的SSR标记,首次利用百合(35对)、延龄草(10对)、薯蓣(5对)的EST-SSR标记对5份滇重楼材料进行PCR扩增,分析3种植物引物在滇重楼中的通用性。结果显示,40对引物在滇重楼中能有效扩增,占引物总数的80.0%,其中32对引物具有多态性,占引物总数的64.0%,引物通用率较高;利用15对具有多态性的引物对35份滇重楼材料进行多态性检测,等位基因数(A)、有效等位基因数(Ae)、Nei’s基因多样性(H)、Shannon指数(I)及多态位点百分比(PPB%)分别为1.9955、1.2634、0.1811、0.3075和99.5%,滇重楼显示出较为丰富的遗传多样性。3种植物的ESTSSR引物在滇重楼中具有较高的通用性,通过对3种植物EST-SSRs引物的开发,有助于重楼属在遗传多样性、基因定位、连锁图谱的构建及比较基因组学等方面的研究。