欧蓍草花粉主要过敏原Parj1的重组表达及鉴定

目的:克隆、表达和纯化欧蓍草花粉主要过敏原Par j1。方法:根据Parj1.0102在GenBank中的序列号获得其核苷酸和氨基酸序列,确定开放阅读框,采用DNAstar软件优化密码子,合成全基因,并克隆到表达载体pET-44a中,转化表达宿主大肠杆菌Rosetta,优化蛋白表达条件并进行亲和层析纯化和Western blot鉴定。结果:PCR扩增及重组质粒测序结果表明成功地构建了pET-44a+/Par j1.0102原核表达质粒。对表达菌表达条件进行优化,最终确定在30℃,IPTG浓度为1.0 mmol/L,诱导4小时时蛋白表达量最高,重组蛋白经亲和层析纯化,SDS-PAGE分析纯化产物在23 kD处有明显的条带。Western blot表明重组蛋白具有与StrepII标签抗体结合活性。结论:国内首次获得融合StrepII标签的Par j1.0102重组蛋白,为欧蓍草花粉过敏诊断及特异性免疫治疗奠定基础。

交通·景观·人——比较上海世纪大道与巴黎香榭丽舍大街

景观大道对于城市形态、城市景现有重要影响,而上海世纪大道是国内城市景观大道的典型代表。该文通过比较上海世纪大道与巴黎香榭丽舍大街的异同和差距,分析和探讨了国内城市景观大道存在的问题以及改进的方向,认为城市交通以及景观设置皆为人的活动服务,因此,国内景观大道的建设需要进一步强调人性化建设;加强城市、街道与普通市民生活之间的互动,从而提升街道和城市的活力,改善城市生活的品质。