Bcl-2蛋白、基因在Parkinson病鼠黑质内的表达及中药对其表达的影响

采用MPTP腹腔注射建立Parkinson病动物模型。选用健康C57BL/6J小鼠随机分成3组:正常组、模型组和中药治疗组。动物存活期分别为14d和28d。采用ABC免疫组化和原位杂交方法对各组脑切片分别进行Bcl-2蛋白和mRNA检测。结果表明:模型组Parkinson病鼠中脑黑质内Bcl-2及其mRNA的表达在两个时段均明显低于正常组。其光密度28d比14d降低更为明显,而中药可部分上调Bcl-2及其mRNA的表达。提示:Bcl-2可能参与了Parkinson病中黑质多巴胺神经元的凋亡过程,中药可通过调节凋亡相关蛋白和基因的表达,阻止多巴胺神经元的凋亡,从而达到防治Parkinson病的目的。

链脲佐菌素诱导糖尿病脑病大鼠模型的构建及评价

背景:目前研究较成熟的糖尿病脑病模型主要有链脲佐菌素诱导模型、高糖高脂饮食诱导模型和自发性动物模型。建立简便易行、周期短、安全有效的糖尿病脑病模型对其发病机制的深入探讨和治疗药物的筛选有重要的作用。目的:进一步验证链脲佐菌素诱导糖尿病脑病大鼠模型的方法并对其进行评价。方法:将20只SD大鼠随机分为对照组(n=10)和模型组(n=10),模型组大鼠左下腹腔一次性注射45 mg/kg链脲佐菌素建立糖尿病实验动物模型,对照组大鼠用等量的柠檬酸缓冲液代替注射。实验期间监测大鼠体质量、饮食量、饮水量和血糖,8周后检测葡萄糖耐量和氧化应激水平,并比较脑组织病理变化及凋亡蛋白的表达情况。结果与结论:①与对照组相比,模型组大鼠饮食量、饮水量、脑指数、血糖和血糖曲线下面积显著升高、体质量明显下降(P<0.01);②脑组织病理学显示,模型组大鼠存活神经细胞数量明显减少(P<0.01),神经细胞病理损伤明显高于对照组;③模型组大鼠较对照组血清超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽活力均明显降低(P<0.01),氧化活性丙二醛的浓度明显升高(P<0.05);④脑组织中凋亡相关蛋白Bax和Caspase-3表达水平增加,Bcl-2表达水平降低(P<0.01);⑤结果说明,注射45 mg/kg链脲佐菌素8周后可以使糖尿病大鼠脑组织有明显的病理损伤,成功构建糖尿病脑病大鼠模型。

基于PI3K/AKT/mTOR信号通路探讨大黄煎剂对轻微型肝性脑病大鼠脑组织炎症损伤的保护机制

目的 探讨大黄煎剂保留灌肠对轻微型肝性脑病(MHE)大鼠模型脑组织炎症损伤的改善作用及可能机制。方法 60只SD雄性大鼠按完全随机方法分为空白组(CON组,n=6)和慢性肝硬化造模组(n=54)。12周后慢性肝硬化造模成功并经Morris水迷宫测试确认符合MHE模型大鼠40只,采用完全随机方法分为模型组(MOD组,n=8)、乳果糖组(LT组,n=8)、大黄煎剂低剂量组(RD1组,n=8)、大黄煎剂中剂量组(RD2组,n=8)和大黄煎剂高剂量组(RD3组,n=8)。其中CON组和MOD组大鼠用生理盐水保留灌肠,2 mL/只,1次/d;LT组大鼠用乳果糖按22.5%剂量保留灌肠,2 mL/只,1次/d;RD1组、RD2组、RD3组大鼠分别用大黄煎剂按2.5、5.0、7.5 g/kg三种剂量保留灌肠,2 mL/只,1次/d。所有大鼠治疗10 d后,进行Morris水迷宫测试,分析大鼠的空间学习记忆能力。分析大鼠行为学状态;检测大鼠血清ALT、AST、IL-1β、IL-6、TNF-α和血氨水平;观察大鼠肝组织和脑组织病理学变化;检测大鼠脑组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的mRNA和蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 与MOD组比较,RD1组、RD2组和RD3组大鼠逃避潜伏期时间显著缩短(P值均<0.01),ALT、AST、IL-1β、IL-6、TNF-α和血氨水平明显降低(P值均<0.05),肝细胞、脑细胞变性、坏死和炎症程度减轻,脑组织PI3K、AKT、mTOR的mRNA和蛋白表达水平均降低(P值均<0.05),且RD3组治疗效果优于RD1组和RD2组。结论 大黄煎剂保留灌肠能够改善MHE大鼠认知功能及脑组织炎症损伤,其作用机制可能与调控PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

解毒活血汤对慢性肾脏病大鼠肾脏FGF23、Klotho表达的影响

目的:观察解毒活血汤对慢性肾脏病(CKD)大鼠肾脏FGF23、Klotho的影响。方法:将60只SPF级健康雄性SD大鼠,随机分空白组、模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,每组12只。采用腺嘌呤加高磷饮食制作CKD大鼠伴血管钙化模型。采用生化试剂盒测定血清中肌酐、尿素氮、钙、磷水平;Western blot法检测肾脏组织中FGF23、Klotho的表达。结果:与空白组相比,其余各组血清中肌酐、尿素氮、钙、磷均有明显变化(P<0.05或P<0.01);和模型组相比,中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组CKD大鼠血清中肌酐、尿素氮、磷水平明显改善(P<0.05),FGF23、Klotho蛋白表达量增高(P<0.05),血清钙水平升高(P<0.05)。结论:解毒活血汤可以改善CKD大鼠肾脏功能,可以通过提高CKD大鼠肾脏组织中FGF23、Klotho蛋白的表达影响失衡的FGF23-Klotho轴,进而调节CKD大鼠血中钙、磷浓度。

瓜蒌提取物对缺血性心肌病大鼠心肌纤维化改善作用的实验研究

目的:观察瓜蒌提取物对缺血性心肌病(ICM)大鼠心肌纤维化的改善作用,并探讨其作用机制。方法:SD大鼠36只,随机分成正常对照组、模型组、瓜蒌提取物组,每组12只。腹腔注射20%氨基甲酸乙酯(5 mg/kg)制备大鼠ICM模型,瓜蒌提取物组灌胃瓜蒌提取物溶液4 g/kg,正常对照组和模型组灌胃相同剂量生理盐水,给药4周,ELISA法检测血清心肌纤维化指标[转化生长因子(TGF)-1β、结缔组织生长因子(CTGF)、半乳糖凝集素(Gal)-3],化学发光法检测氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)],ELISA法检测炎性因子[白细胞介素(IL)-6,肿瘤、坏死因子(TNF)-α,C反应蛋白(CRP)]。光镜观察各组大鼠心肌组织病理变化。结果:模型组血清TGF-1β、CTGF、Gal-3水平均高于正常组,瓜蒌提取物组TGF-1β、CTGF、Gal-3水平均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组血清SOD活性低于正常组,MDA含量高于正常组;瓜蒌提取物组SOD活性高于模型组,MDA含量低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组血清TNF-α、IL-6、CRP水平高于正常组,瓜蒌提取物组TNF-α、IL-6、CRP水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。Masson染色显示,正常组大鼠心肌组织血管周围见少量均匀分布的胶原纤维。模型组大鼠心肌组织可见大量胶原纤维,且深入组织间隙,分布不均匀,形态杂乱。瓜蒌提取物组心肌组织形态基本正常。结论:瓜蒌提取物能够减轻ICM大鼠心肌纤维化程度,其作用与抗氧化、抗炎作用有关。

参苓白术散对克罗恩病大鼠肠道炎症及PI3K/Akt信号通路的影响

目的:探究参苓白术散缓解克罗恩病(CD)大鼠结肠炎症反应的作用机制及其对磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的影响。方法:将54只SD大鼠随机分为空白组、模型组、美沙拉嗪组(0.21 g/kg)、参苓白术散低剂量组(5.88 g/kg)、参苓白术散中剂量组(11.76 g/kg)、参苓白术散高剂量组(23.59 g/kg),每组9只。采用5%2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠进行CD造模,造模成功后药物干预组给予相应的药物灌胃,空白组、模型组给予等剂量生理盐水灌胃。14 d后观察各组大鼠结肠表面的病理变化并进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠结肠组织病理学改变;蛋白质印迹法(Western blotting)检测肠黏膜组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平。结果:模型组大鼠CMDI评分高于空白组(P<0.01);美沙拉嗪组及参苓白术散中、高剂量组大鼠CMDI评分均低于模型组(P<0.01)。空白组大鼠黏膜组织损伤情况不明显,结构组织完整,未见明显充血水肿现象;与空白组比较,模型组大鼠黏膜上皮细胞大量坏死脱落,杯状细胞明显减少,单管状的腺体被破坏且排序紊乱,各层出现大量炎症细胞与淋巴细胞浸润现象,同时出现淋巴组织增生及淋巴滤泡;美沙拉嗪组与参苓白术散低、中、高剂量组黏膜损伤恢复在不同程度上优于模型组,结肠组织黏膜上皮细胞脱落坏死现象不显著,炎症细胞浸润状况较少,腺体破坏情况较轻微,正常结构尚未完全丧失;参苓白术散低剂量组可见少量血管扩张出血,有少许炎症反应。模型组大鼠结肠组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt高于空白组(P<0.01);美沙拉嗪组及参苓白术散低、中、高剂量组大鼠结肠组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论:参苓白术散能缓解CD大鼠肠道炎症,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关。

miR-200a通过上调Nrf2对老年糖尿病心肌病大鼠心肌的保护作用

目的:探讨微小RNA-200a(miR-200a)对老年糖尿病大鼠心肌的保护作用及机制。方法:采用高脂饮食+链脲菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病心肌病模型,分为对照组和STZ组。通过注射携带miR-200a腺相关病毒9(AAV9)在心肌内过表达miR-200a,分为对照+AAV9-control组、对照+AAV9-miR-200a组、STZ+AAV9-control组、STZ+AAV9-miR-200a组,每组8只。体外培养大鼠心肌细胞H9c2,分为对照组(5.5 mmol/L葡萄糖培养24 h)、高糖+AAV9-control+si RNA组(转染AAV9-control和si RNA 48 h后用33 mmol/L葡萄糖培养24 h)、高糖+AAV9-control+si核因子E2相关因子2(Nrf2)组(转染AAV9-control和si Nrf248 h后使用33 mmol/L葡萄糖培养24 h)、高糖+AAV9-miR-200a+siRNA组(转染AAV9-miR-200a和si RNA 48 h后用33 mmol/L葡萄糖培养24 h)、高糖+AAV9-miR-200a+si Nrf 2组(转染AAV9-miR-200a和si Nrf248 h后用33 mmol/L葡萄糖培养24 h)。使用酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测miR-200a表达水平,蛋白免疫印迹法检测相关蛋白表达水平;2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色检测细胞活性氧(ROS)水平;免疫荧光检测Nrf2表达。结果:与对照组比较,STZ组心肌组织miR-200a表达下调(P<0.05)。与对照+AAV9-control组比较,STZ+AAV9-control组心肌组织LDH、CK-MB、MDA水平升高,SOD水平、血红素氧化酶1(HO-1)、细胞核Nrf2蛋白、细胞质Nrf2蛋白表达及Nrf2荧光密度降低(P<0.05)。与STZ+AAV9-control组比较,STZ+AAV9-miR-200a组心肌组织LDH、CK-MB、MDA水平及TUNEL阳性细胞率降低,SOD水平、HO-1、细胞核Nrf2蛋白、细胞质Nrf2蛋白表达及Nrf2荧光密度升高(P<0.05)。高糖处理可降低H9c2细胞存活率,提高ROS、MDA、LDH水平(P<0.05);在此基础上转染miR-200a后上述指标被抑制;同时转染miR-200a和si Nrf2后,ROS、MDA、LDH升高,细胞存活率降低(P<0.05)。结论:miR-200a提高Nrf2表达从而减轻高糖诱导的心肌细胞氧化应激和凋亡,这一效应与Nrf2核易位的促进及下游抗氧化应激信号有关。

通心络胶囊对糖尿病大鼠心功能和心肌重塑的影响

目的研究通心络胶囊对糖尿病大鼠心功能及心肌重塑的影响。方法选取Spargue Dawley(SD)雄性大鼠83只,用2%链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg造模后,将其随机分为通心络高、中、低剂量组、缬沙坦组、糖尿病组。各组灌胃10周;监测其体重及血糖;大鼠麻醉后测定其心功能,测定心脏质量指数,ELISA法测定大鼠心肌匀浆TGF-β1、Caspase-3、bcl-2蛋白含量。结果通心络胶囊的高、中、低剂量组及缬沙坦组较糖尿病组精神状态更活跃,毛色有光泽,多食、多饮、多尿症状减轻,大便较干燥,体重增加。造模后,通心络高、中、低剂量组、缬沙坦组及糖尿病组较空白对照组明显下降,灌胃4~10周,各组较空白对照组差异均有统计学意义(P<0.05)。血糖比较:灌胃1~10周,通心络高、中、低剂量组、缬沙坦组及糖尿病组较空白对照组指标显著升高(P<0.05),糖尿病组和其余实验组比较差异无统计学意义(P>0.05)。心室间隔厚度、室后壁厚度、室舒张末期内径、左室收缩末期内径、左室舒张末期容积、左室收缩末期容积指标比较,缬沙坦组和通心络高剂量组较糖尿病组各指标均明显降低(P<0.05)。射血分数和短轴缩短率指标比较,各组指标较糖尿病组均明显升高(P<0.05);通心络高剂量组较缬沙坦组射血分数明显增高(P<0.05)。缬沙坦组和通心络高剂量组的心脏质量指数及左心室质量指数较糖尿病组明显减低(P<0.05)。TGF-β1和Caspase-3指标中,缬沙坦组和通心络高、中剂量组较糖尿病组均明显降低(P<0.05),缬沙坦组和通心络高剂量组间差异无统计学意义(P>0.05)。bcl-2指标中,缬沙坦和通心络高、中剂量组较糖尿病组明显增加(P<0.05),通心络高剂量组明显高于缬沙坦组(P<0.05)。结论通心络胶囊可以明显改善糖尿病大鼠的心功能、抑制心肌重塑,疗效可观。

基于NF-κB信号通路探讨miR-155调控的靶基因CEBPβ对颈椎病大鼠椎间盘软骨细胞凋亡和炎症反应的影响

目的探讨微小RNA(miR)-155的靶向CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)对颈椎病大鼠椎间盘软骨细胞凋亡和炎症反应的作用和潜在机制。方法将40只成年雄性SD大鼠随机分为4组,分别为假手术组、颈椎病组、颈椎病+过表达C/EBPβ组、颈椎病+空载体组,每组10只。将大鼠软骨细胞系atdc5细胞分为6组,分别为对照组、TNF-α组、空载体+TNF-α组、C/EBPβ过表达+TNF-α组、mimic-NC+C/EBPβ过表达+TNF-α组、mimic miR-155+C/EBPβ过表达+TNF-α组。通过qRT-PCR和蛋白质印迹实验检测各组大鼠软骨组织和atdc5细胞中miR-155、凋亡相关蛋白(cleaved-caspase3、Bax、Bcl-2、PPARγ)、NF-κB信号通路蛋白(p-NF-κB P65、NF-κB P65、IκB)、促炎因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)以及C/EBPβ的表达。用双荧光素酶报告基因实验检测miR-155对C/EBPβ表达的靶向调控作用。结果与假手术组比,颈椎病组软骨中miR-155、cleaved-caspase3、Bax、PPARγ、p-NF-κB P65、TNF-α、IL-6、IL-1β的表达均上调,而Bcl-2、IκB、C/EBPβ均下调(P<0.05)。与颈椎病+空载体组比,颈椎病+过表达C/EBPβ组软骨中cleaved-caspase3、Bax、PPARγ、p-NF-κB P65、TNF-α、IL-6、IL-1β的表达均下调,而Bcl-2、IκB、C/EBPβ均上调(P<0.05),但miR-155变化不显著(P>0.05)。颈椎病大鼠软骨中miR-155与C/EBPβ的表达水平显著负相关(r=-0.721,P<0.05)。与对照组比,TNF-α组中miR-155、cleaved-caspase3、Bax、PPARγ、p-NF-κB P65、IL-6、IL-1β的表达均上调(P<0.05),而Bcl-2、IκB、C/EBPβ均下调(P<0.05)。与空载体+TNF-α组比,C/EBPβ过表达+TNF-α组中cleaved-caspase3、Bax、PPARγ、p-NF-κB P65、IL-6、IL-1β的表达均下调,而Bcl-2、IκB、C/EBPβ均上调(P<0.05),但miR-155变化不显著(P>0.05)。与mimic-NC+C/EBPβ过表达+TNF-α组相比,mimic+C/EBPβ过表达+TNF-α组中miR-155、cleaved-caspase3、Bax、PPARγ、p-NF-κB P65、IL-6、IL-1β的表达均上调(P<0.05),而Bcl-2、IκB、C/EBPβ均下调(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示软骨细胞中miR-155的靶基因是CEBPβ。结论miR-155通过靶向抑制C/EBPβ促进颈椎病大鼠椎间盘软骨组织和软骨细胞中NF-κB信号通路的激活,并加快细胞的凋亡和炎症反应。

肝性脑病大鼠经粪便细菌移植后的肠道菌群宏基因组分析

目的建立肝性脑病大鼠模型及粪便细菌移植(FMT)模型,探索细菌移植后肝性脑病大鼠肠道菌群的改变。方法选择30只SD大鼠,采用四氯化碳联合乙醇的方法建立肝性脑病大鼠模型。将大鼠随机分成3组,A组为正常对照组,B组为肝性脑病模型组,C组为FMT组,每组10只。B组进行同等剂量生理盐水灌胃,C组进行FMT(按200μL/d灌胃,每毫升细菌溶液含细菌1.5×10^(11))。每天观察大鼠生存情况。收集大鼠肠道粪便进行宏基因组测序。结果实验过程中大鼠共死亡9只,A组无死亡。FMT前后,C组大鼠移植后体重明显增加。通过宏基因组测序,发现C组较B组可有效地改善菌种的多样性和丰度;与A组比较,B、C组中变形菌门含量显著升高,拟杆菌门丰度显著降低。结论FMT可以改变肝性脑病大鼠肠道菌群的结构。

慢性不可预知性应激与完全弗氏佐剂、福尔马林诱导的妊娠期疼痛-抑郁共病小鼠模型的构建与评价

目的通过慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)联合完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)和福尔马林诱导建立妊娠期疼痛-抑郁共病小鼠动物模型,对其相关表型进行系统评价,并初步探究其共病的病理基础。方法选择8周龄的C57BL/6J雌性小鼠,依据糖水偏好实验数据,采用随机分层方法将其分为对照组(妊娠前不干预)和CUS组(妊娠前予以CUS干预)。CUS造模完成后,将雌雄小鼠合笼配对,妊娠期小鼠分别于右后肢足底皮下注射50%CFA和5%福尔马林溶液,诱导建立妊娠期疼痛-抑郁共病小鼠模型。实验共分8组,即为对照-空白组、CUS-空白组、对照-CFA组、CUS-CFA组、对照-福尔马林组、CUS-福尔马林组、对照-CFA+福尔马林组、CUS-CFA+福尔马林组,每组10只。各组小鼠均在CUS干预前后、妊娠后和分娩后,通过糖水偏好实验、强迫游泳实验、悬尾实验和旷场实验评价行为学变化,并通过机械刺痛实验和热辐射痛实验测定各组小鼠对痛觉的敏感性变化;最后处死小鼠,用酶联免疫吸附法检测各组小鼠海马体中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),以及血清皮质醇(cortisol)和促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)的含量。结果与对照-空白组相比,CUS-空白组模型小鼠产生了明显的抑郁样行为,并伴随痛阈明显降低(P<0.001)。与对照-空白组相比,对照-CFA+福尔马林组在CFA注射与福尔马林注射后均出现痛阈下降(P<0.01)。与对照-空白组和对照-福尔马林组相比,CUS-福尔马林组的痛阈明显降低(P<0.01),且三者依次下降。与对照-空白组和对照-CFA组相比,CUS-CFA组的痛阈明显降低(P<0.001),且三者依次下降。与对照-空白组、对照-CFA+福尔马林组相比,CUS-CFA+福尔马林组小鼠的机械痛阈显著降低(P<0.001)且三者依次下降,热辐射耐受时间缩短(P<0.01)且三者依次缩短。与对照-CFA+福尔马林组和CUS-空白组小鼠相比,CUS-CFA+福尔马林组小鼠的糖水偏好百分比显著降低(P<0.001),强迫游泳时不动时间显著延长(P<0.001),悬尾时不动时间也显著延长(P<0.001),在旷场中央探索的时间显著缩短(P<0.001),旷场探索总路程显著缩短(P<0.001),中央探索路程占比减少(P<0.001)。与对照-CFA+福尔马林组和CUS-空白组相比,CUS-CFA+福尔马林组小鼠血清皮质醇和ACTH水平显著升高(P<0.01),海马体中IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05)。结论CUS联合CFA和福尔马林注射可作为建立妊娠期疼痛-抑郁共病C57BL/6J小鼠模型的理想方法。该模型小鼠的行为学改变可能是通过调节海马区的炎症反应水平和下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic–pituitary–adrenal,HPA)轴的激素水平导致的。

九味益脑颗粒联合鼠神经生长因子治疗一氧化碳中毒后迟发性脑病临床观察

目的:观察九味益脑颗粒联合鼠神经生长因子治疗一氧化碳中毒后迟发性脑病(DEACMP)的效果。方法:80例用随机数字表法分为两组各40例。两组均给予鼠神经生长因子治疗,实验组加用九味益脑颗粒治疗。结果:治疗后实验组总有效率、BDNF水平、MoCA评分高于对照组而神志障碍、痴呆少语、肢体震颤、呕吐痰涎积分、miR-124及5-HT水平、CCS评分低于对照组(P<0.05)。两组神志障碍、痴呆少语、肢体震颤、呕吐痰涎积分、mir-124及5-HT水平CCS评分均有下降且实验组低于对照组(P<0.05)。结论:九味益脑颗粒联合鼠神经生长因子治疗一氧化碳中毒后迟发性脑病效果较好。

鼠神经生长因子在新生儿缺氧缺血性脑病中的应用

目的探究鼠神经生长因子在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中的应用价值。方法回顾性分析选取2019-01-01—2023-12-01中国人民解放军联勤保障部队第九八九医院收治的132例HIE病患儿临床资料。对照组76例,采用单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液干预,试验组56例,采用鼠神经生长因子干预。比较2组患儿临床治疗效果与康复指标[肌张力恢复、意识恢复、意识反射恢复、吸吮恢复时间、住院时间]及治疗前、后血气指标[动脉血氧分压(PaO_(2))、pH值、动脉二氧化碳分压(PaCO_(2))]、超氧化物歧化酶(SOD)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)以及干预前和干预2、3、4周新生儿行为神经测定量表(NBNA)。结果132例患儿总有效率为86.36%(114例),试验组、对照组治疗总有效率(87.50%比85.53%)差异无统计学意义(P>0.05)。试验组、对照组4项指标恢复时间及住院时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。干预前后,试验组、对照组3项血气指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。干预后2组SOD、NSE均有改善,且试验组改善更明显(P<0.05)。NBNA评分时点比较,差异有统计学意义(F_(时点)=719.128,P<0.01),NBNA评分有随时间变化趋势,但组间无统计学差异(P>0.05)。结论鼠神经生长因子对HIE治疗效果较好,与单唾液酸四己糖神经节苷脂钠相比,更能改善神经因子水平。

益肾养髓方对脊髓型颈椎病大鼠脊髓神经元轴突再生的影响

目的观察益肾养髓方对脊髓型颈椎病(CSM)大鼠脊髓神经元轴突再生的影响,探讨其潜在机制。方法54只雌性SD大鼠随机分为空白对照组8只、假手术组8只、造模组38只,采用吸水膨胀材料压迫脊髓法制备CSM大鼠模型,将成模大鼠分为模型组和益肾养髓方低、中、高剂量组,给药组分别予相应剂量药液灌胃,1次/d,连续4周。采用Basso Beattie Bresnahan(BBB)评分法评价大鼠运动功能,透射电镜观察脊髓神经元轴突变化,RT-qPCR及Western blot检测脊髓组织生长相关蛋白-43(GAP-43)mRNA及蛋白表达。结果与空白对照组及假手术组比较,模型组大鼠BBB评分明显降低(P<0.05),脊髓神经元髓鞘可见“洋葱皮”样松解,轴突退化萎缩,脊髓组织GAP-43 mRNA及蛋白表达有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,益肾养髓方各剂量组大鼠BBB评分明显增加(P<0.05),髓鞘脱失、轴突退化有不同程度改善,益肾养髓方低、中剂量组大鼠脊髓组织GAP-43 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论益肾养髓方可有效改善CSM大鼠运动功能,其机制可能与上调脊髓组织GAP-43表达,促进脊髓神经元轴突再生有关。

龟板抗Parkinson病大鼠多巴胺能神经元凋亡的作用

为探讨补肾中药龟板抗Parkinson病大鼠模型黑质神经元凋亡的作用,本研究用6-羟基多巴胺(6-OHDA,0.2%)于大鼠左侧黑质致密带注射2μl造成Parkinson病(PD)模型,同时设立龟板组(灌胃补肾中药龟板2g/次,2次/d,连续12周)、模型组和正常对照组,观察其行为改变,再用HE、TH染色或DIG-dUTP染色观察黑质神经元的变化,免疫组化染色检测Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果显示:龟板组PD大鼠的旋转行为改善明显,黑质致密部的TH染色阳性神经元增多,DIG-dUTP染色阳性率降低,Bcl-2蛋白表达增加和Bax蛋白表达减少。本文结果提示,长期龟板治疗对PD模型大鼠多巴胺能神经元凋亡具有明显的保护作用,且该作用可能与龟板升高Bcl-2和降低Bax的表达有关。

成都市4种鼠传病原体的带毒率调查

目的 了解四川省成都市鼠类携带4种常见病原体的情况,为鼠传疾病的防控提供科学依据。方法 2021年9月至2022年8月采用夹夜法在成都市居民区、重点行业和农贸市场等生境捕获鼠类。采用实时荧光定量PCR法检测汉坦病毒、新型布尼亚病毒、钩端螺旋体和恙虫病东方体4种病原体。结果 全市7个区县共捕获鼠类207只,总捕获率为1%。其中褐家鼠150只,占72.46%;黄胸鼠57只,占27.54%。4种病原体检出率分别为汉坦病毒3.86%,钩端螺旋体1.45%,新型布尼亚病毒0.48%,恙虫病东方体尚未检测出。结论 需对重点行业开展灭鼠工作,防止鼠传疾病的发生与流行。

中药龟板对Parkinson病大鼠模型BMP4表达的影响

为研究益肾中药龟板对Parkinson病(PD)模型大鼠骨形成蛋白4(BMP4)表达的影响,本研究将6-羟基多巴胺注入大鼠黑质建立PD大鼠模型,对模型大鼠行高、低剂量龟板水煎液口服治疗45d后,采用ELISA和RT-PCR方法进行血清中BMP4酶联免疫试验和脑黑质、纹状体中BMP4mRNA的检测。结果显示:PD模型组的BMP4表达明显降低,用龟板治疗后可以显著阻碍此趋势,而且高剂量组比低剂量组效果更为明显(P<0.05)。本研究结果提示,龟板有明显的促进BMP4及BMP4mRNA表达的作用。

嗅鞘细胞联合神经干细胞脑内移植改善Parkinson病大鼠行为的观察

为了观察嗅鞘细胞(OECs)联合神经干细胞(NSCs)脑内移植对Parkinson病(PD)的治疗作用,首先将6-OHDA注射至左侧黑质致密部和腹侧被盖区制备PD大鼠。将成功制备的PD大鼠随机分为5组,即0.9%生理盐水对照组、单纯移植NSCs或OECs组、OECs+NSCs共移植组和PD模型对照组。将培养并传至第3代的NSCs、OECs和OECs+NSCs分别移植到PD大鼠的纹状体内,于移植后7、14、30、60d检测PD大鼠旋转行为变化后处死,取脑做冰冻切片,行BrdU、酪氨酸羟化酶(TH)、p75免疫荧光和TH免疫组织化学检测。移植后21d以内,各组大鼠的旋转行为无明显变化;30d和60d时,单纯移植NSCs或OECs组和OECs+NSCs共移植组与生理盐水和模型对照组相比,旋转行为有较明显的改善(P<0.05),其中OECs+NSCs共移植组的旋转行为改善更为显著。在移植后30d和60d,单纯移植NSCs或OECs组在移植区可见少数TH阳性神经元,而OECs+NSCs共移植组的TH阳性神经元明显多于单纯移植NSCs或OECs组(P<0.05)。上述结果表明:OECs能促进胚鼠中脑来源的NSCs向TH阳性神经元分化;单纯移植NSCs或OECs和OECs+NSCs共移植,均能不同程度地改善PD大鼠的旋转行为,但联合移植优于单纯移植。

神经干细胞联合胶质细胞源性神经营养因子脑内移植对Parkinson病大鼠纹状体内多巴胺含量的影响

将原代培养的胚鼠(E14.5)腹侧中脑神经干细胞(NSCs)单独或联合胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)移植入Parkinson病(PD)大鼠纹状体内,术后各组动物存活一段时间,观察旋转行为后处死,取纹状体组织做高效液相色谱检测多巴胺(DA)含量。探讨NSCs单独或联合GDNF脑内移植对PD大鼠纹状体内DA含量的影响。结果显示:与PD模型相比,NSCs单独或联合GDNF脑内移植均能提高PD大鼠纹状体内的DA含量(P<0.05);在术后30d和60d,DA含量在GDNF+NSCs组的增加幅度比NSCs组更加明显,动物旋转行为亦得到明显改善(P<0.05)。上述结果表明,NSCs单独或联合GDNF移植均对PD大鼠有一定的治疗作用,而NSCs联合GDNF移植的治疗效果更好。

龟板促进Parkinson病大鼠黑质骨形态发生蛋白信号分子的表达

为了进一步探讨骨形态发生蛋白(BMP)/分化抑制因子(Id)通路在龟板抗PD大鼠多巴胺能神经元凋亡中的作用,本实验用6-羟基多巴胺(6-OHDA,0.2%)于大鼠左侧黑质致密带注射2μl造成PD模型,设立正常对照组、模型组和龟板组,用免疫组织化学染色方法观察PD大鼠中脑黑质骨形态发生蛋白IB受体(BMPR-IB),Smad8和Id1阳性细胞数目;用Western-blotting检测BMPR-IA、BMPR-IB、BMPR-Ⅱ、Smad1、Smad5、Smad8和Id1蛋白表达水平的变化。免疫组化染色显示龟板组PD大鼠中脑黑质BMPR-IB,Smad8和Id1的阳性细胞数明显多于模型组(P<0.05)。Western-blotting结果显示龟板组PD大鼠中脑黑质BM-PR-IB,Smad8和Id1的蛋白表达水平高于模型组,而BMPR-IA,BMPR-Ⅱ,Smad1和Smad5没有被检测出。以上结果表明龟板能上调6-OHDA诱导的PD大鼠中脑黑质BMPR-IB,Smad8和Id1的表达,这可能是其抗PD大鼠多巴胺能神经元凋亡的分子机制。