切胶免疫制备腮腺液高丰度蛋白多克隆抗体

目的通过切胶免疫制备人腮腺液高丰度蛋白多克隆抗体,为下一步腮腺液高丰度蛋白单克隆抗体制备提供抗原解决方案。方法将腮腺液经超滤法浓缩蛋白后,进行SDS-PAGE分析,切取分子量约为50-65kDa的高丰度蛋白条带,研磨后注射新西兰大耳白兔诱导产生免疫应答并制备兔抗人腮腺液高丰度蛋白多克隆抗体,并应用蛋白免疫印记(Westernblot)等方法进行抗体鉴定。结果成功制备和鉴定了人腮腺液高丰度蛋白多克隆抗体。结论成功制备和鉴定了人腮腺液高丰度蛋白多克隆抗体,为下一步腮腺液高丰度蛋白单克隆抗体制备及唾液蛋白质组学研究奠定基础。

大鼠腮腺及颌下腺唾液的收集

目的:探讨大鼠腮腺及颌下腺唾液的收集方法。方法:采用微型Lashley吸盘法收集大鼠腮腺唾液,经口内颌下腺导管口直接插管法收集颌下腺唾液。毛果芸香碱刺激唾液分泌,假设唾液的比重为1.0 g/cm3,以唾液重量代表其体积,记录唾液流率。结果:大鼠腮腺唾液流率(9.9±1.4)μL/m in,颌下腺导管插管唾液流率(19.9±10.8)μL/m in。结论:可以采用微型吸盘法收集大鼠腮腺唾液,经口内颌下腺导管口直接插管法收集大鼠颌下腺唾液。

小型猪腮腺放射损伤唾液流率和血常规及生化动态观察

目的 :动态观察小型猪腮腺放射损伤前后腮腺流率、血常规及血生化变化 ,为建立小型猪腮腺放射损伤动物模型 ,及基因治疗涎腺放射损伤奠定基础。方法 :试验组 8只小型猪 ,1 5Gy单侧腮腺放射损伤 ,对侧腮腺做对照 ,2只 0Gy放射做空白对照。放疗前、放疗后 4周、8周和 1 6周 ,用吸盘法收集唾液 ,前腔静脉取血 ,观察唾液流率、血常规和血生化改变。结果 :放疗后 8周唾液流率下降 ,1 6周唾液流率下降明显并与放疗前有显著性差别。随着放射后的时间延长 ,白细胞计数下降越来越明显 ,第 8周和 1 6周与放疗前有显著性差别。红细胞在放疗后第 8周及第 1 6周稍有增加但没有显著性差别 ,血小板在 4周下降 ,第 8周及第 1 6周增高超出放射前水平。乳酸脱氢酶血清含量放疗后呈持续下降趋势 ,与放疗前有显著性差别(P <0 0 5 )。血清淀粉酶在放疗后 1周增高 ,第 4周显著下降 ,与放疗前相比差别有显著性 ,随后缓慢回升。结论 :1 5Gy放疗1 6周时放疗侧腮腺唾液流率明显下降 ,血液常规白细胞计数和血清乳酸脱氢酶。

负压引流在腮腺手术中的应用

目的探讨负压引流在腮腺手术中的应用价值,分析与腮腺术后涎瘘等相关的临床因素。方法需手术治疗的腮腺疾病患者396例,随机分为负压引流组(200例)与正压引流组(196例),记录术后创口积液、涎瘘、血肿以及皮瓣坏死等并发症发生的情况,同时分析不同的引流方式与术后处理的关系。结果负压引流组的积液、涎瘘、血肿以及皮瓣坏死等并发症发生率(4.0%)低于正压引流组(15.3%),两组之间的差异有统计意义(P<0.01),负压引流组术后不必加压包扎而不影响I期愈合。结论腮腺切除术后应用负压引流优于传统的正压引流,具有临床应用价值,值得推广。

儿童复发性腮腺炎患者与正常儿童腮腺液微生物群落多样性的差异

目的通过检测儿童复发性腮腺炎患者与正常儿童腮腺液的微生物群落分布的变化情况,分析二者之间微生物群落多样性的差异。方法通过使用Illumina Hiseq 2500 PE250高通量测序平台对34例儿童复发性腮腺炎患者和16例正常儿童腮腺液标本中微生物群落的16SrRNA进行多样性分析,并对两组样本数据进行统计比较。结果与正常儿童腮腺液对比,儿童复发性腮腺炎患者腮腺液Alpha多样性指标中样品文库的覆盖率(goods_coverage)增高(P<0.05),Chao1、菌群丰富度指数(abundance coverage estimator,ACE)、Shannon指数降低(P<0.05),Simpson指数差异无统计学意义。结论儿童复发性腮腺炎患者腮腺液微生态环境中微生物群落的多样性与正常儿童腮腺液差异有统计学意义。

腮腺肿瘤患者唾液CEA及CA125的ROC分析

目的通过ROC分析方法,观察并对比唾液样本及血液样本的CA125及CEA水平变化对腮腺肿瘤的临床诊断效能。方法检测正常对照组(30例)和腮腺肿瘤患者(101例)的腮腺液、混合唾液及血液的CA125及CEA水平,通过ROC分析,观察两种标志物单独及联合应用时,诊断腮腺肿瘤的敏感度(SE)、特异度(SP)、AUC值及界值(cutoff)。结果 ROC分析结果显示,混合唾液CA125及CEA对腮腺肿瘤的诊断效能最高(AUC分别为80.4%,78.4%),二者独立应用的诊断效能与联合应用无显著差异。腮腺液及血液样本CA125及CEA的诊断效能处于较低水平(AUC<65%)。结论混合唾液样本CA125与CEA水平的变化可以较好地反映腮腺肿瘤的存在,其临床效能优于腮腺液及血液样本。

唾液及血清中糖类抗原CA-50测定对腮腺肿瘤的诊断价值

目的研究腮腺肿瘤患者腮腺液、全唾液及血清中糖类抗原ＣＡ－５０含量及其临床意义。方法对３０名正常人（对照组）；腮腺非肿瘤组１５例；腮腺良性肿瘤组２２例；腮腺恶性肿瘤组２７例，进行腮腺液、全唾液及血清中ＣＡ５０含量的测定。结果正常人血清、全唾液和腮腺液ＣＡ５０值分别为：８０２±４８ｕ／ｍ１、５７±６１ｕ／ｍ１、７８１±４２ｕ／ｍ１。全唾液ＣＡ５０值，恶性肿瘤组及患侧腮腺液ＣＡ５０明显高于其他各组（Ｐ＜００１），恶性组全唾液ＣＡ５０阳性率达９６５％（２６／２７），患侧腮腺液阳性率为９２６％（２５／２７）。结论全唾液或腮腺液ＣＡ５０含量测定对腮腺良、恶性肿瘤的鉴别具有较高参考价值，方法简例、无损伤，值得推广应用。

腮腺肿瘤患者唾液和血液中CEA、CA125含量的检测及其在肿瘤组织中的表达

目的检测腮腺肿瘤患者唾液和血液中CA125、CEA的含量及其在腮腺肿瘤组织中的表达。方法选择腮腺良性肿瘤患者83例,腮腺恶性肿瘤患者18例,对照组为30名健康志愿者。采用化学发光法(CLIA)检测唾液及血液样本中CEA和CA125含量。采用免疫组化法检测腮腺肿瘤组织中CEA和CA125的表达。结果腮腺肿瘤患者混合唾液中CEA和CA125水平明显高于对照组。腮腺肿瘤患者与对照组血液中CEA和CA125水平无显著差异。良、恶性肿瘤患者唾液中CEA和CA125含量无显著差异。CEA及CA125的分布特点为,混合唾液中含量最高,血液中含量最低。相关性分析显示,混合唾液中CEA与CA125呈现明显正相关性(r=0.652-0.913)。在大部分腮腺肿瘤组织中,CEA和CA125均为阳性表达,而且部分病例的肿瘤组织周围正常腺体也可见CEA及CA125的阳性表达。结论唾液中CEA和CA125水平的变化可以反映腮腺肿瘤的存在,但无法区分腮腺肿瘤的良恶性。血液中CEA和CA125不能反映腮腺肿瘤的存在。腮腺肿瘤患者的混合唾液样本中CEA与CA125呈现同步变化的趋势。唾液中CEA与CA125可能主要来源于涎腺腺体及肿瘤组织,而不是来自血液。

腮腺肿瘤患者血清、全唾液和腮腺液中癌胚抗原的放免法测定及其临床意义研究

本研究采用放射免疫分析法(RIA)对30例健康人,9例腮腺非肿瘤患者,13例腮腺良性肿瘤患者和16例腮腺恶性肿瘤患者血清、全唾液和腮腺液中癌胚抗原(CEA)进行了联检,并结合临床表现及病理诊断等进行综合分析。结果为:健康人血清CEA含量<9.45ng/ml.全唾液CEA含量<43.23ng/ml,腮腺液CEA含量<5.91ng/ml;腮腺良性肿瘤或非肿瘤患者血清、全唾液和患侧腮腺液中CEA含量升高,而健侧腮腺液中CEA含量不升高;如果全唾液、健侧腮腺液和患侧腮腺液中CEA含量升高,而血清中CEA含量不升高,则腮腺恶性肿瘤的可能性大;在考虑为恶性肿瘤的情况下,如5.91ng/ml<健侧腮腺液CEA含量<33.83ng/ml,5.91ng/ml<患侧腮腺液CEA含量<56.94ng/ml提示该肿瘤的分化程度较低。本方法简单,标本用量少,可重复采集,无痛、无损伤、病人易接受,值得推广应用。

腮腺肿瘤患者唾液SIgA检测的初步研究

本文收集32例腮腺肿瘤患者术前的腮腺唾液及27名健康成人的腮腺唾液,测定其内SIgA的浓度,全部患者都作了术后病检,结果发现:腮腺肿瘤患者SIgA浓度高于健康人,恶性肿瘤高于良性肿瘤,恶性肿瘤患侧高于健侧,对腮腺肿瘤的早期诊断及监测有一定意义。

舍格伦综合征的口腔科检查诊断意义的评价

目的 :通过对舍格伦综合征 (Sjogren’sSyndrome,SS)各项口腔科检查指标的分析 ,探讨其诊断意义及相互联系。方法 :44例明确诊断的SS患者和 37例非SS患者进行唾液分析〔包括唾液流率、非刺激性混合唾液IgA和 β2微球蛋白 (β2m)测定〕、腮腺造影和唇腺活检检查。比较中各项检查的敏感性及特异性 ,计算 44例SS患者各项检查结果间的相关系数并行显著性T检验。结果 :各项检查的敏感性和特异性分别如下 :唾液流率为5 6 8%和 5 5 3% ,IgA测定为 1 8 2 %和 84 2 % ,β2m测定为 45 5 %和 5 5 3% ,腮腺造影为 72 7%和 6 3 2 % ,唇腺活检为 81 8%和 94 7%。β2m与IgA、唇腺内淋巴细胞浸润灶计数有显著的相关性 ,唾液流率与其它各项检查均无相关性。结论 :唇腺活检为诊断SS的必要检查 ,而混合唾液IgA测定方法有待改进。

酸刺激对腮腺和下颌下腺唾液流率及成分的影响

目的:探讨酸刺激对腮腺和下颌下腺唾液流率及成分的影响,为全面评估健康和疾病状态时的唾液腺功能提供依据。方法:采用自然留取法收集210名健康志愿者在静息状态下的全唾液,负压吸引法收集腮腺、下颌下腺分泌液;2%柠檬酸每间隔1 min滴于舌尖进行酸刺激,共5次,收集酸刺激状态下全唾液、腮腺及下颌下腺分泌液,称量计算各项唾液流率。生化分析仪检测唾液样本的K^(+)、Na^(+)、Cl^(-)、Ca^(2+)、总蛋白、总磷浓度及α-淀粉酶水平,对比分析不同类别唾液流率及成分的变化特点。结果:与静息状态检测结果相比较,酸刺激后腮腺唾液流率增加的倍数(10.7倍)大于下颌下腺(2.9倍);腮腺唾液中的Na^(+)、Cl^(-)、Ca^(2+)、总蛋白和α-淀粉酶浓度明显升高(P<0.05),总磷、K^(+)差异无统计学意义(P=0.89,P=0.34);下颌下腺唾液中的Na^(+)和Ca^(2+)浓度显著升高(P<0.05),总磷浓度显著降低(P<0.05),Cl^(-)浓度升高,但差异无统计学意义(P=0.068),总蛋白、K^(+)和α-淀粉酶差异无统计学意义(P=0.85,P=0.07,P=0.95)。下颌下腺唾液中总磷的复合分泌速率不变(P=0.066),K^(+)、Na^(+)、Cl^(-)、Ca^(2+)、总蛋白、α-淀粉酶分泌速率升高(P<0.01)。腮腺唾液中K^(+)、Na^(+)、Cl^(-)、Ca^(2+)、总蛋白、总磷及α-淀粉酶的复合分泌速率均升高(P<0.01)。腮腺唾液中Na^(+)、Cl^(-)、K^(+)、总磷、总蛋白、α-淀粉酶浓度高于下颌下腺(P<0.01),下颌下腺唾液中Ca^(2+)浓度显著高于腮腺(P<0.001)。结论:腮腺对酸刺激的反应更为强烈,下颌下腺分泌较为稳定;酸刺激明显影响唾液中电解质的浓度,复合分泌速率是同时反映唾液流率和成分浓度的评价指标;腮腺在唾液总蛋白、总磷和α-淀粉酶的分泌过程中起重要作用,而下颌下腺是唾液中Ca^(2+)的主要来源。

腮腺保留式调强放疗对唾液组成、流量及口干的影响

目的:探讨头颈部鳞状细胞癌患者经腮腺保留式调强放疗后唾液组成、流量及口干的变化。方法:收集2016年5月—2018年11月庆阳市人民医院进行放疗的头颈部鳞癌患者101例,按照治疗方法分为调强放疗组(54例)与常规放疗组(47例),比较2组患者临床病理特征参数,治疗前、后腮腺摄取指数,治疗后唾液成分、口干、口咽反应症状与分度。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:2组患者肿瘤部位、TNM临床分期与分化程度无显著差异(P>0.05);治疗后调强放疗组患者唾液中总蛋白,分泌型IgA,钙、磷浓度显著大于常规放疗组(P<0.05);治疗后2组患者腮腺摄取指数、分泌指数与唾液流速较治疗前显著下降(P<0.05);且调强放疗组患者腮腺摄取指数、分泌指数与唾液流速显著大于常规放疗组(P<0.05);调强放疗组治疗后口干情况显著优于常规放疗组(P<0.05);治疗后调强放射组出现咽痛与咽下困难患者比例显著低于常规放疗组(P<0.05);调强放疗组患者治疗后口咽分度情况显著优于常规放疗组(P<0.05)。结论:腮腺保留式调强放疗对唾液组成、流量及口干情况影响较小,对腮腺分泌功能有显著保护作用。

疏水色谱分离人腮腺液蛋白影响因素初探

初步建立了一种分离纯化人腮腺液蛋白的方法。探讨了样品的预处理、不同固定相、流动相以及不同检测波长等因素对正常人腮腺液蛋白疏水色谱分离的影响。结果在４０ｍｉｎ梯度内，以２ｍｏｌ／Ｌ硫酸铵为Ａ流动相，以０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾为Ｂ流动相（１００％Ａ∶０％５～０％Ａ∶１００％Ｂ），腮腺液蛋白被分离出６个峰。经生化方法证实，用疏水色谱分离人唾液蛋白的方法，分离度好，保持了蛋白样品的生物活性，且样品处理简单，可成为研究人唾液蛋白成分的一种较理想的方法。

唾液蛋白质组学唾液样本制备的方法学初探

目的:通过对唾液淀粉酶单克隆抗体的制备和鉴定,寻找蛋白质组学研究中样本制备关键环节的可行性方案,为日后唾液蛋白质组学研究奠定基础。方法:将腮腺液经超滤法浓缩蛋白后,进行SDS-PAGE分析,切取分子量为50～65kDa的高丰度蛋白条带,研磨后注射BALB/c小鼠,诱导产生免疫应答并制备人唾液淀粉酶单克隆抗体,应用酶联免疫吸附试验和蛋白免疫印记等方法鉴定。结果:成功制备和鉴定了人唾液淀粉酶单克隆抗体。结论:成功制备和鉴定了唾液淀粉酶单克隆抗体,为唾液蛋白质组学研究中样本制备提供解决方案。