针刺及内源性c-Fos、c-Jun对体外培养备用背根节的影响

目的探讨部分背根切除和针刺及内源性c-Fos和c-Jun对体外培养备用背根节(DRG)的作用。方法制备备用根猫模型;采用针刺备用根猫模型、细胞培养以及在部分培养液中加入抗c-Fos/c-Jun抗体的方法,将实验分为针刺组、抗c-Fos抗体组、抗c-Jun抗体组及备用DRG组;并用抗神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗体行免疫细胞化学ABC法染色进行神经元鉴定。结果免疫组化染色可见95%以上的细胞为N SE阳性反应的细胞,且为典型的体外培养的DRG神经元。体外培养备用根组、抗c-Fos抗体组、抗c-Jun抗体组神经元突起的平均长度均比针刺组短(P<0.05);抗c-Fos/c-Jun抗体组均比备用根组长(P<0.05)。结论针刺可促进体外培养DRG神经元的突起生长作用;内源性c-Fos、c-Jun可能对体外培养DRG神经元突起生长有促进作用。

内源性GDNF、NT-4对针刺猫脊髓备用根背根节神经元的作用

为了解部分背根切除和针刺及内源性GDNF和NT-4对体外培养备用背根节（DRG）的作用，本研究对5只成年猫进行双侧备用根手术（切除双侧L1～L3和L7～S2 DRG，其中L6DRG作为备用背根）。术后当日开始针刺一侧L6脊神经后肢分布区的两组穴位，即足三里和悬钟、伏兔和三阴交，每天一次，每次30min，连续针刺7d后无菌条件下取出双侧L6 DRG进行体外培养，24h后全量换液，并将针刺侧的一部分培养孔的培养液分别用含有200ng／ml抗GDNF和NT4抗体培养液替换，分别作为抗GDNF和NT4抗体封闭组。7d后终止培养，于显微镜下用显微测微尺测量神经突起的长度；并用抗NSE抗体行免疫细胞化学ABC法染色进行神经元鉴定。结果显示：（1）免疫细胞化学染色可见体外培养的细胞95％以上为NSE阳性细胞，且为典型的体外培养的DRG神经元；（2）体外培养备用根组和抗GDNF抗体组神经突起的平均长度比针刺组的短（P〈0．05）；（3）而针刺组神经突起的平均长度与抗NT-4抗体组间无差异（P〉0．05）；两抗体组平均突起长度比备用根组的突起长（P（0．05）。本研究结果提示，针刺可促进体外培养DRG神经元突起的生长，进而可能与脊髓可塑性密切相关；内源性GDNF有促进DRG神经元突起生长的作用；而内源性NT4在DRG神经元突起生长中发挥的作用却不明显。