康莱特对Patu-8988细胞周期及其调节基因表达的影响

目的 研究康莱特注射液对人胰腺癌细胞周期及其调节基因表达的影响 ,探讨康莱特的药理机制。方法 通过流式细胞仪 DNA含量分析法检测康莱特对人胰腺癌细胞系 Patu- 8988细胞周期的影响 ,应用基因芯片技术分析加药前后细胞周期调节基因的表达差异 ,并以 Western blot对部分基因蛋白产物的表达进行验证。结果 2 0 μl/ ml康莱特作用 Patu- 8988细胞 2 4 h后 ,G2 / M期细胞比率从(17.79± 0 .16 ) %上升至 (2 3.96 ± 2 .33) % ,而 S期细胞比率则由 (36 .6 1± 2 .97) %降至 (2 4 .76 ±4 .92 ) %。基因芯片结果显示 ,在 96条有关细胞周期的目的基因中共有 2 7条基因表达发生大于 3倍的显著变化 ,其中表达上调的基因 17条 ,下调的 10条。Western blot表明 cyclin A、cyclin B1、cyclin E、p2 1等蛋白表达改变与基因芯片结果一致。结论 康莱特的药理作用之一是使细胞周期相关基因的表达发生改变 ,从而影响细胞增殖。

薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响

背景:薏苡仁提取液目前已广泛应用于临床抗肿瘤治疗,但至今尚未见其单独应用于胰腺癌的报道。目的:观察薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响,以探索胰腺癌治疗的新途径。方法:以不同浓度薏苡仁提取液处理人胰腺癌细胞系PaTu-8988后,分别通过光镜观察、Hoechst33258荧光染色、末端脱氧核苷酸转移酶原位标记(TUNEL法)和流式细胞术检测细胞凋亡,应用透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果:经10μl/ml和20μl/ml薏苡仁提取液作用72h后,PaTu-8988细胞的增殖能力明显下降,其作用呈剂量依赖性;光镜观察显示凋亡细胞变圆、体积缩小,Hoechst33258荧光强染,TUNEL标记阳性。20μl/ml薏苡仁提取液作用24、48和72h后,流式细胞仪DNA直方图上出现亚二倍体凋亡峰,细胞凋亡率呈时间依赖性,分别为7.1%±0.6%、11.3%±0.3%和15.1%±2.9%,显著高于对照组的2.4%±1.1%(P<0.01)。透射电镜观察显示,凋亡早期主要是线粒体结构的改变,后期则出现典型的凋亡征象,如核固缩、染色质凝集靠近核膜和凋亡小体形成。结论:薏苡仁提取液可诱导人胰腺癌细胞凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性,线粒体可能在早期细胞凋亡中起重要作用。