角膜上皮细胞Pax-6基因表达分析(英文)

目的 检测体外培养角膜上皮细胞Ｐａｘ－６基因的达，探讨维持角膜缘干细胞特性的基因因素。 方法 地高辛标记ｃＤＮＡ探针进行ＤＮＡ印迹杂交和蛋白质免疫印迹，检测培养的角膜上皮细胞中Ｐａｘ－６基因表达状况。 结果 ＥｃｏＲ Ⅰ酶切角膜缘上皮细胞中９．１ｋｂｐ的ＤＮＡ片断与探针序列相同，其中原位和原代培养细胞、传第１代明显测出，角膜中央上皮细胞的原位和原代细胞中也能测出。Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ发现抗血清１１认识相对分子质量为８１×１０３和５５×１０３两种角膜上皮细胞蛋白，抗血清１３认识６０×１０３的角膜上皮细胞蛋白，原位和原代、传第１代角膜缘干细胞和角膜中央上皮细胞均能够测出，角膜缘传第３代细胞和角膜基质细胞不表达。 结论 角膜缘干细胞和角膜中央上皮细胞均具有Ｐａｘ－６基因，该基因的正常表达是维持角膜上皮细胞特性的必要条件。

Pax-6基因在发育中的表达与动物眼的进化

近年在脊椎动物和无脊椎动物中分离出Pax 6基因及其同源基因 ,这些基因都与动物的眼与神经系统的发育和形态发生有关。本文着重比较了无脊椎动物果蝇、文昌鱼、哺乳动物小鼠和人的Pax 6基因编码蛋白 ,Pax 6基因在发育过程中的表达 ,Pax 6与眼进化的关系等几个方面 ,并介绍Pax 6基因为靶基因的转基因果蝇的上游制作技术和原理。探讨了Pax 6基因作为眼发育的主导基因的作用和时空表达模式的保守性。

Pax-6基因在眼球发育和疾病发生中的作用

本文介绍Ｐａｘ－６基因及其表达产物的结构、功能和在动物眼球的进化、发育过程中的作用，总结了该基因在成熟动物和人等眼组织不同部位的表达分布，分析了Ｐａｘ－６基因缺陷导致动物和人的眼部畸形。

同源盒基因Pax-6在晶状体发育过程中的表达分析

目的 建立晶状体连续发育模型,检测Pax-6基因在小鼠晶状体发育的不同阶段的表达情况,探讨该基因在小鼠晶状体发育中的作用。 方法 利用RT-PCR法和Western blot法,检测Pax-6在小鼠晶状体发育不同阶段中的表达状况。 结果 在鼠胚9.5 d(E 9.5)即可检测到Pax-6的表达,在其连续发育阶段的E12.5,E17.5及新生10、20、60 d均可检测到Pax-6的表达。Western blot法同样发现在体外培养的原代细胞,传第1、第2及第3代的晶状体上皮细胞(LECs)中均能检测到Pax-6蛋白水平的表达。 结论 小鼠晶状体发育的各个阶段均具有Pax-6基因,该基因的正常表达是晶状体发育的必要条件。

光学离焦性近视眼视网膜pax-6基因表达的研究

目的 研究幼猴光学离焦性近视眼发生、发展过程中视网膜 pax- 6基因的表达情况 ,探讨pax- 6基因是否参与近视眼的发生、发展和正视化过程。 方法 选用猴龄为 1～ 3个月的恒河猴 9只 ,采用配戴眼镜或施行角膜屈光手术的方法 ,造成幼猴视网膜光学离焦。用反转录聚合酶链反应及定量分析方法检测不同时间视网膜 pax- 6基因的表达 ,并与非光学离焦眼进行比较。 结果 远视性光学离焦导致幼猴玻璃体腔增长速度加快 ,形成近视眼 ,其视网膜 pax- 6基因表达量明显比正常对照眼高 (t=3.4 80 ,P=0 .0 0 4 )。 结论 远视性光学离焦幼猴的视网膜 pax- 6基因表达明显增加 ,表明 pax- 6基因可能参与视觉依赖的眼球生长和正视化过程。

同源盒基因Pax-6在鼠晶状体上皮细胞中的表达分析

【目的】检测体外培养的鼠晶状体上皮细胞 LECs,内 Pax-6基因的表达,探讨维持晶状体上皮细胞特性的基因因素。【方法】利用免疫组织化学法和免疫印迹法,检测培养的 LgCs 中 Pax-6基因的表达状况。【结果】在原代培养细胞、传第1代及传第2代的 LgCs 中明显检测到 Pax-6的阳性表达。免疫印迹同样发现在原代培养细胞、传第1代及传第2代的 LECs 中均能检测到 Pax-6蛋白水平的表达,传第3代细胞表达微弱。阴性对照在各阶段点未见 Pax-6的表达。【结论】晶状体囊膜上的 LECs 具有 Pax-6基因,该基因的正常表达是维持 LECs 特性的必要条件。

晶状体上皮细胞增生与Pax-6表达的相关分析

目的检测Pax-6基因在体外培养的不同阶段小鼠晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)中的表达,分析其与LECs增生特性的关系。方法 利用囊膜组织块贴壁法及胰酶消化法体外培养不同阶段LECs;免疫组织化学法检测LECs中Pax-6蛋白表达情况;并利用RT-PCR法检测其mRNA水平的表达情况。结果 在原代培养细胞、传第1代及传第2代的LECs中明显检测到Pax-6mRNA水平的阳性表达,LECs相应各泳道有一与227 bp相一致的扩增片段;RT-PCR法同样发现在原代培养细胞、传第1代及传第2代、传第3代的LECs中均能检测到Pax-6蛋白水平的表达,Pax-6标记指数分别为11.75%、20.00%、26.75%、5.25%,Pax-6阳性物质染色呈弥漫性、均一性分布于LECs细胞核内。阴性对照组在各阶段均未见Pax-6的表达。结论 LECs中有Pax-6基因存在,该基因的正常表达与LECs增生特性相关。