IRIS(CID)-ICP-AES法同时测定聚合物PDXL过程产物中的硫和钠

本文报道采用 IRIS( CID)全谱等离子体光谱仪 ,同时测定高分子聚合物 PDXL研制过程产物中硫和钠的含量。样品制成 10 %硝酸溶液后用 180 .734 nm硫的谱线和 589.592 nm钠的谱线分别测定硫和钠。方法的检出限 S为 3.9μg/L,Na为 1.4 μg/L,RSD均小于 0 .3% ,与标准加入法及燃烧法对照 ,结果吻合得很好 ,方法快速。

视黄酸促进限定性内胚层细胞向胰腺前体细胞分化

研究视黄酸(RA)在限定性内胚层细胞向胰腺前体细胞诱导过程中的最佳作用方式。在无饲养层培养体系下联合多因子分阶段诱导经历10天时间获得胰腺前体细胞。获得的细胞不仅表达胰腺前体细胞的标记pdx1,但是也同时表达肝脏前体细胞的标记afp。有研究表明在胰腺特化过程中RA能起到抑制afp的作用,因此在不同的时间点添加RA并持续不同的作用时间来调节内胚层细胞向肝胰分化的命运。收集d7到d10的细胞用免疫组化和RT-PCR检测pdx1和afp的表达情况。结果显示RA从d3开始持续作用到d10可以获得更高的pdx1阳性细胞同时能有效的抑制afp的表达,并且在d9可以获得最高比率的pdx1阳性细胞,提示RA持续作用促进限定性内胚层细胞向胰腺前体细胞分化。

Pdx1基因修饰的人脐带间充质干细胞体外诱导分化为胰岛β样细胞

本研究探讨胰十二指肠同源框因子-1(Pdx1)基因修饰的人脐带间充质干细胞(MSCs)体外分化为胰岛β样细胞。采用携带Pdx1基因的重组腺病毒感染MSCs 7d,联合细胞因子分阶段诱导分化。RT-PCR及Westernblot、免疫细胞化学法检测诱导后细胞胰岛素相关基因表达变化;化学发光法检测诱导后细胞培养液上清中胰岛素和C肽的分泌水平。用流式细胞术检测胰岛素阳性细胞百分率。结果显示:诱导转入Pdx1基因的人脐带MSCs后,梭形细胞聚集形成胰岛样细胞团,双硫腙染色胞浆呈亮红色;诱导后的细胞表达Pdx1、胰岛素、C肽和葡萄糖转运体2基因;诱导细胞分泌胰岛素和C肽,并且在高糖作用后,胰岛素和C肽分泌增加;诱导后胰岛素阳性细胞百分率为(11.61±4.83)%。结果表明,Pdx1修饰人脐带MSCs在体外能够诱导分化为胰岛β样细胞。

Pdx1与糖尿病的基因／细胞治疗

胰-十二指肠同源盒1（Pdx1）基因作为胰岛素基因转录激活的关键性调控因子，已成为糖尿病基因／细胞治疗策略中最具希望的候选基因。利用Pdx1对非β细胞（包括肝细胞、小肠细胞、骨髓间充质细胞和胚胎干细胞）进行直接或间接的基因修饰和修饰细胞移植，并与其他辅助手段相协同，可有效启动胰岛素基因表达，从而改善糖尿病的高血糖症状。这一基因／细胞治疗策略为糖尿病的治疗提供了新的线索。

pdx1基因及其表观遗传修饰对胰腺发育及β细胞功能的影响

胚胎时期的发育状况与成年人2型糖尿病的发生密切相关.胰十二指肠同源盒（pancreatic and duodenal homeobox 1,PDX1）表达于β细胞发育的所有阶段和成熟的β细胞中,是对整个胰腺形成特别是胎儿期β细胞发育和功能起主要作用的转录因子,同时也是维持成熟β细胞功能所必需的;而pdx1表观遗传修饰的改变会影响其表达,进而影响胰腺发育和β细胞功能.

共表达PDX1和BTC间充质干细胞对转分化胰岛素分泌细胞的影响

该文通过Tet调控下共表达PDX1与BTC的骨髓间充质干细胞系(PDX1^+BTC^+MSCs),探讨PDX1和BTC共表达对骨髓间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞(IPCs)的效率及成熟度的影响。采用两步法对PDX1^+BTC^+MSCs细胞系诱导分化成IPCs,第一步Dox诱导7天检测到Nestin、CK19表达;第二步再诱导7天后形成DTZ染色阳性的胰岛样结构,Ngn3、Nkx6.1 mRNA水平和PDX1、Insulin、Glucagon的蛋白表达阳性。分化后的IPCs在葡萄糖刺激下能产生胰岛素和C肽,但仍不能达到正常胰岛水平。提示利用Tet-On体系调控PDX1和BTC共表达对骨髓间充质干细胞进行修饰,能有效诱导骨髓间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞,但分化成熟度仍然与天然胰岛细胞功能存在差距。