基于网络药理学与细胞实验探索藏药十一味草果丸治疗结直肠癌机制

目的通过生物信息学挖掘结直肠癌相关基因,基于网络药理学对十一味草果丸治疗结直肠癌的机制进行探索研究,利用HCT116结直肠癌细胞进行实验对网络药理学预测结果进行验证。方法结直肠癌疾病相关基因,通过GEO数据库、孟德尔人类遗传基因库、GeneCard数据库获取;基于知网、TCMSP数据库对藏药十一味草果丸主要成分进行检索,探索其相关靶点蛋白通过Uniport数据库与DrugeBank数据库获取蛋白质对应基因;使用GeneCards数据库对结直肠癌疾病相关的所有基因与筛选得到的十一味草果丸作用的靶基因进行比对选取相关性高的基因用以探索二者间的相关关系;使用DAVID数据库对得到的相关基因进行富集分析,得到相关的生物过程与信号通路;使用分子对接技术对活性成分进行研究。最后利用HCT116结直肠癌细胞对网络药理学预测的十一味草果丸作用于结直肠癌的效果进行检验。结果GEO数据库筛选后获得差异基因与GeneCard对比后与疾病相关度大于30分的相关基因288个。数据库检索得到药物有效化学成分169个,对化学成分进行预测靶点蛋白进行检索,去重后得到508个靶基因。508个药物基因与288个疾病相关基因取交集后64个共同基因。KEGG富集结果主要有癌症通路、PI3K-Akt信号通路、P53信号通路等。通过使用水和乙酸乙酯提取十一味草果丸中的药物成分,利用水和二甲基亚砜(DMSO)进行溶解并控制其浓度后,对结直肠癌HCT116细胞进行干预,其中5氟尿嘧啶(5-FU)作阳性对照而提取药物设置不同浓度剂量组干预结果显示,乙酸乙酯提取的药物作用效果优于水提取药物和5-FU。结论藏药十一味草果丸可以通过多个靶点和多条通路对结直肠癌细胞起到抑制和促进凋亡作用。

Differences in Effects of Zuojin Pills(左金丸)and Its Similar Formulas on Wei Cold Model in Rats

Objective:To explore the effects of Zuojin Pills(左金丸)and its similar formulas on the stomach cold syndrome in a Wei cold model in rats.Methods:The rat Wei cold model was established by intragastric administration of glacial NaOH,and the gastric mucosa injury indices,together with the levels of motilin and gastrin in the stomach,were determined.The preventive and curative effects of Zuojin Pills and its similar formulas on gastric mucosa injury were investigated.Results:Zuojin Pills and its similar formulas ...

UPLC-QAMS法同时测定珍珠胃安丸中甘草苷等10个成分的含量

目的:建立超高压液相色谱结合一测多评(UPLC-QAMS)法同时测定珍珠胃安丸中甘草苷、芸香柚皮苷、橙皮苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、丹皮酚、异甘草素、甘草酸铵、川陈皮素的含量。方法:采用超高压液相色谱法,使用Athena UHPLC C_(18) Column,120A(2.1 mm×150 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(-1),柱温35℃,检测波长为237 nm。以丹皮酚为参照物,确定其与其他9个成分的相对校正因子,QAMS法与外标法分别测定珍珠胃安丸中10个成分的含量。结果:在0.28~333.54μg·mL-1线性范围内,10个成分呈良好的线性关系(r^(2)> 0.999 9),平均加样回收率为98.55%~101.77%(n=6),RSD 1.33%~2.97%(n=6)。丹皮酚与甘草苷、芸香柚皮苷、橙皮苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草酸铵、川陈皮素的相对校正因子分别为0.276、0.699、0.439、0.583、0.423、0.172、0.320、1.013、0.541,外标法与QAMS法所测得10个成分的含量无明显差异。结论:本研究建立的QAMS法准确性高,可为珍珠胃安丸质量控制标准的提高提供依据。

蒙成药扎冲十三味丸对大鼠脑缺血组织细胞凋亡的影响

目的探讨扎冲十三味丸对缺血性脑组织损伤的保护机制。方法利用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型,采用Elisa法和流式细胞技术Annexin V fitc/pi细胞双染法,检测凋亡细胞相关蛋白和神经细胞凋亡百分率,观察扎冲十三味丸对脑缺血组织bcl-2和bax蛋白表达水平以及缺血组织细胞凋亡程度的影响。结果扎冲十三味丸能减低缺血脑组织Bax蛋白含量和上调Bcl-2蛋白含量以及降低缺血脑组织细胞凋亡百分率。结论扎冲十三味丸通过降低缺血脑组织细胞凋亡百分率,对脑组织缺血损伤有保护作用。

雪胆胃肠丸对胃溃疡的作用实验研究

目的考察雪胆胃肠丸对实验性胃溃疡的作用。方法采用小鼠无水乙醇致胃溃疡和大鼠乙酸致胃溃疡模型,考察雪胆胃肠丸对抗实验性胃溃疡的作用。采用小鼠醋酸扭体实验和小鼠耳廓肿胀实验考察其镇痛和抗炎作用。结果雪胆胃肠丸均能使小鼠无水乙醇所致胃溃疡的溃疡面积明显减小,能降低大鼠溃疡指数,可降低醋酸致小鼠扭体反应的次数,抑制巴豆油致小鼠耳廓肿胀。结论雪胆胃肠丸对实验性胃溃疡有明显的保护作用。

藏药七十味珍珠丸的激光诱导击穿光谱检测

采用激光诱导击穿光谱(LIBS)技术对藏药七十味珍珠丸进行了定性研究.利用高能量Nd:YAG脉冲激光器1 064 nm光束聚焦待测样品表面产生等离子体,并用光谱仪和ICCD来探测其光谱信号.通过采集的光谱图分析得到该藏药中含有Mg、Ca、Na、Fe、Al、Si、K、Li、Hg、Pb、Au等10种元素,其中Hg、Pb、Au为重金属元素.另外,还对不同价态的Pb元素进行了LIBS的时间演化研究,结果表明:应用LIBS技术可以探测藏药所含元素的价态.

蒙成药扎冲十三味丸对兔凝血机制的影响

目的探讨蒙成药扎冲十三味丸对兔凝血机制的影响。方法选择20只新西兰大白兔为研究对象,给兔灌胃扎冲十三味丸28 d,检测给药前及给药后1 h、3 h、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d、28 d各时间点兔血中凝血四项指标,并于给药后28 d检测血小板聚集率和黏附率,计算血小板聚集率和黏附率抑制率。结果与给药前比较,给药后凝血酶原时间、凝血酶时间、活化部分凝血活酶时间延长、纤维蛋白原减少,血小板聚集率和黏附率减少。结论扎冲十三味丸通过抗凝、抗血小板聚集和黏附,有抑制凝血作用。

3种藏药经典方联用对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用

目的:研究二十五味珊瑚丸、如意珍宝丸、二十味沉香丸联合用药对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用。方法:80只SD大鼠随机分为4组。假手术组和模型组每日灌胃给予生理盐水(1 mL/100 g);阳性对照组每日灌胃给予尼莫地平(1.89 mg/100 g);联合给药组每日早中晚分别灌胃给予二十五珊瑚丸(7 mg/100 g)、如意珍宝丸(31.5 mg/100 g)、二十味沉香丸(49 mg/100 g)。7天后采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,并于缺血24 h后,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死面积;干湿重法计算脑含水量;并检测缺血脑组织NO含量(硝酸还原酶法)、血清SOD活性(黄嘌呤氧化酶法);血清MDA含量(TBA法);血清LDH活性(丙酮酸法)。结果:与模型组相比,联合给药能够显著降低脑缺血大鼠脑梗塞面积、脑含水量及缺血脑组织中NO含量,提高血清SOD活性、减少脂质过氧化产物MDA含量并使LDH活性降低。结论:实验结果表明,二十五味珊瑚丸、如意珍宝丸、二十味沉香丸联合用药可通过减少梗死灶、减轻脑水肿、抑制氧化应激反应等,对缺血脑组织产生一定保护作用。

六味地黄丸入血成分莫诺苷对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响

目的:测定大鼠口服六味地黄丸后血清中莫诺苷浓度,并探讨莫诺苷对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响。方法:反相高效液相色谱法检测大鼠口服六味地黄丸后血清中莫诺苷浓度;原代培养大鼠前脂肪细胞;以四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测莫诺苷对大鼠前脂肪细胞增殖的影响;以油红O染色方法检测其对大鼠前脂肪细胞分化过程中的细胞内脂肪积聚的影响。结果:莫诺苷与血清中其它成分较好分离。在250～2000ng范围内线性关系良好(r=0.9991),平均回收率为95.27%,莫诺苷在大鼠血中的平均血药浓度为(16.92±3.63)μg/mL;8.5～68.0μg/mL的莫诺苷促进大鼠前脂肪细胞的增殖,抑制其分化过程中的脂肪积聚。结论:莫诺苷可能为六味地黄丸的体内直接作用物质之一;有效成分分离测定与药效学研究相结合的方法将有助于阐明六味地黄丸的有效成分及作用机理。

藏药二十八味槟榔丸的鉴别及没食子酸的含量测定

目的 建立更为规范的藏药二十八味槟榔丸的质量标准。方法 采用TLC和HPLC。结果 TLC鉴别了二十八味槟榔丸中的槟榔、荜茇、诃子、姜黄、圆柏、小檗皮等 6味药材 ,并通过HPLC测定了 3批制剂中诃子的有效成份没食子酸的含量 ,分别为 0 .2 1 1 %、0 .2 0 9%、0 .2 1 6 % ,在 9.3～ 32 .5μg·ml- 1 的浓度范围内 ,线性关系良好 (r=0 9997)。平均回收率为 98.4% ,RSD =1 .2 7%。结论 鉴别的专属性明显提高 ,含量测定方法简便、准确。

藏药二十味沉香丸对大鼠低氧性肺动脉压力升高的干预作用

目的:观察藏药二十味沉香丸对大鼠低氧性肺动脉压力升高干预作用,从而证实ET-1参与低氧性肺动脉高压的形成。方法:将165只Wistar大鼠随机分为高原对照组、二十味沉香丸藏药组和平原对照组,于给药后第1、3、7、15、30天用生理信号采集系统记录肺动脉压并计算左右心室质量比,用ELISA方法测定血清HIF-1α和ET-1蛋白水平,用Western Blot方法测定肺组织ETA受体水平。结果:与高原对照组比较,藏药二十味沉香丸组动物肺动脉压自给药后第7天显著降低(P<0.01),自第3天左右心室比及血清HIF-1α含量显著降低(P<0.05或P<0.01),第3、7天血清ET-1含量显著降低(P<0.05或P<0.01),各时间点肺组织ETA受体表达均显著降低(P<0.01或P<0.001)。结论:ET-1是引起大鼠肺动脉压升高和右心室壁增厚的重要因素之一,其只在低氧早期发挥作用,并不参与低氧后期的肺动脉压升高。藏药二十味沉香丸能够防止大鼠肺动脉压过度升高和右心室壁增厚,其机制可能与直接抑制ET-1和ETA受体水平或抑制HIF-1α后间接引起ET-1水平下调有关。

高效液相色谱法测定珍珠滴丸中甘草酸含量

目的建立珍珠滴丸中甘草酸含量的测定方法。方法采用Hypersil C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-1%乙酸(33∶67),检测波长为250nm,流速为1.0mL/min,柱温40℃。结果甘草酸的进样量线性范围为0.41～1.2μg,r=0.9999(n=5),平均回收率为99.92%,RSD为1.71%(n=6)。结论该方法灵敏度高、准确、快捷,结果可靠,可作为珍珠滴丸的质量控制方法。

魏绍斌教授药食并用治疗卵巢早衰经验介绍

文章系统的收集和整理了四川省名中医魏绍斌教授对卵巢早衰的中医临床诊治经验和体会。肝肾阴虚、精亏血少为该病的主要病机,据此提出滋肾益肝、养血填精的治法,临证选用归肾丸为主方,妙在结合自制食疗方,药食相配,突出中医特色,在临床疗效上较西医有显著优势,值得借鉴。

蒙药珍珠丸对外周血淋巴细胞微核率的抑制作用研究

目的通过蒙药珍珠丸对电离辐射诱发体外培养外周血淋巴细胞微核率的抑制作用,进一步研究蒙药珍珠丸的药效机理。方法按常规微量血培养方法体外培养外周血淋巴细胞以及微核细胞。实验分为对照组、照射组以及加药组三大部分。结果经电离辐射和没有电离辐射组相比,微核率有显著差异(P<0.001),同一放射剂量下,培养液中加入蒙药珍珠丸和不加蒙药珍珠丸相比,微核率显著降低(P<0.001)。结论电离辐射明显导致微核率升高,蒙药珍珠丸降低微核率。

蒙成药扎冲十三味丸对预处理急性脑梗死大鼠的影响

目的探讨蒙成药扎冲十三味丸预处理对局灶性脑缺血大鼠神经功能、梗死脑组织病理学改变、脑梗死区重量及脑梗死区重量/全脑重量变化的影响。方法将Wistar大鼠36只,随机分为正常组、模型组、扎冲十三味丸组,线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),神经功能行为评分,按时间点取脑,脑组织TTC染色,称量脑梗死重量及其与全脑重量之比。光镜下观察脑组织的结构变化。结果与模型组比较,扎冲十三味丸组神经功能缺损好转,脑梗死区重量及脑梗死区重量/全脑重量均明显小于模型组,光镜下梗死区水肿减轻。结论扎冲十三味丸对局灶性脑缺血大鼠具有神经保护作用。

藏药七十味珍珠丸上市后再评价研究思路探讨

目的:开展藏医经典方七十味珍珠丸上市后再评价,提高其科学性、安全性、规范性,促进产业发展。方法:采用文献挖掘法对七十味珍珠丸处方和现代临床药学研究等信息进行整理,借鉴Padma-28成功实例,分析七十味珍珠丸适应症等存在的不足。结果:梳理了七十味珍珠丸的临床联合用药和药理毒理的研究现状。结论:构建七十味珍珠丸上市后再评价新模式,为藏成药临床合理使用及有效性等提供再评价科学依据。

阻断交感神经及加味逍遥丸对心理应激小鼠免疫功能的影响

目的探讨交感-肾上腺髓质轴阻断对心理应激小鼠免疫器官结构和细胞免疫功能的影响及加味逍遥丸调节心理应激损伤的作用机理。方法利用电刺激心理应激箱诱发心理应激模型、六羟多巴胺阻断外周交感神经、加味逍遥丸为平行对照研究中药;检测脏器指数、胸腺细胞凋亡率、NK细胞活性、淋巴细胞转化率、胸腺病理等免疫学指标。结果单纯应激组较单纯对照组小鼠胸腺指数下降、脾指数下降[(0.41±0.13)vs(0.53±0.15);P<0.05]、胸腺细胞凋亡率升高[(33.21±5.54)%vs(17.79±5.18)%;P<0.01]、NK细胞活性下降[(22.1±14.1)%vs(35.5±10.3)%;P<0.01]、淋巴细胞转化率下降(P<0.01);六羟多巴胺阻断后应激组较单纯应激组NK细胞活性增大[(31.9±14.7)vs(22.1±14.1);P<0.05]、淋巴细胞转化率升高[(6985±580)cpm vs(4810±598)cpm,ConA(0.5ug/ml);P<0.01];灌胃加味逍遥丸后应激组较单纯应激组脏器指数升高、胸腺细胞凋亡率下降[(20.37±4.56)%vs(33.21±5.54)%;P<0.01];二者均能显著降低血糖皮质激素水平(P<0.05)。结论阻断外周交感神经明显保护心理应激小鼠的细胞免疫功能;加味逍遥丸通过减少胸腺细胞凋亡、防止胸腺和脾脏萎缩、降低血糖皮质激素等方面发挥抗应激损伤作用,其发挥作用的途径可能不是通过阻断外周交感神经实现的。

蒙药扎冲十三味丸对大鼠缺血性脑损伤后海马组织细胞凋亡影响的初步研究

目的:探讨扎冲十三味丸对缺血性脑损伤后海马组织细胞凋亡的影响。方法:建立SAH模型,采用流式细胞术和Elisa法,检测神经细胞凋亡百分率和Bax/Bcl-2蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比较,模型组细胞凋亡率及Bax蛋白表达量增多,而Bcl-2蛋白表达减少(P<0.05);扎冲十三味丸给药组与模型组相比,细胞凋亡率及Bax蛋白表达量均显著降低,Bcl-2蛋白表达增高(P<0.05)。结论:扎冲十三味丸通过降低缺血性脑损伤后海马组织神经细胞的凋亡率,起到对脑缺血损伤的保护作用,调控凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的表达是其抗凋亡的机制之一。

七十味珍珠丸中有毒重金属在比格犬体内的分布和排泄

目的研究长期服用藏成药七十味珍珠丸后主要有毒重金属在动物体内的分布和排泄。方法以七十味珍珠丸高剂量喂服比格犬,给药12周后和停药4周后检测动物血液和排泄物中有毒重金属元素的含量,并与正常对照组比较。结果比格犬给予七十味珍珠丸后主要重金属元素在血中的浓度均有所升高,停药后降低;重金属元素在排泄物中的浓度显著升高;主要重金属元素在心脏、肝、肾有一定的蓄积,但停药后可以排出体外。结论长期高剂量服用七十味珍珠丸应注意有毒重金属中毒的风险。

六味地黄丸4种入血成分组合对大鼠前脂肪细胞增殖、分化影响的最佳浓度配伍研究

目的:探讨六味地黄丸中马钱苷、芍药苷、莫诺苷、丹皮酚4种入血成分组合对大鼠前脂肪细胞增殖、分化的影响,并优选其最佳浓度配伍。方法:原代培养大鼠的前脂肪细胞,将马钱苷等4种入血成分按四因素三水平的正交试验表L9(34)安排实验,同时设立空白对照组,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖的速度,以油红O染色方法检测其对大鼠前脂肪细胞分化过程中的细胞内脂肪积聚的影响,以光密度为指标比较各因素、水平之间的差异。结果:六味地黄丸4种入血成分组合对大鼠前脂肪细胞增殖、分化的影响以组合A3B1C3D2的作用最为显著(P<0.01);与各单体组分作用比较,具有高度显著性差异(P<0.01)。结论:六味地黄丸4种入血成分以马钱苷、莫诺苷高浓度,丹皮酚中浓度,芍药苷低浓度配伍组合对大鼠前脂肪细胞增殖、分化影响较单体组分作用显著,表现为中药组方的整体性和协同增效调节作用。