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Linc01419调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖与侵袭
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作者 向威 吕磊 +2 位作者 郑福鑫 袁敬东 吴维 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第16期2921-2929,共9页
目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(rea... 目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Linc01419在不同膀胱癌细胞系、22例经病理证实为膀胱癌的手术患者的肿瘤组织及癌旁正常膀胱组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)实验和Transwell小室侵袭实验检测敲低Linc01419表达对膀胱癌细胞增殖与侵袭的影响;采用双荧光素酶报告基因检测法分析Linc01419与miR-34a-5p及miR-34a-5p与E2F3之间的靶向调控关系。结果:UALCAN数据库分析显示相较正常膀胱组织,Linc01419在膀胱癌组织中显著高表达(P<0.001);RT-qPCR分析结果显示相较癌旁正常膀胱组织,Linc01419在22例膀胱癌组织中表达明显上调(P<0.001),与UALCAN数据库分析结果一致;Linc01419在4株膀胱癌细胞中的表达明显高于正常膀胱上皮细胞(P<0.01);敲低Linc01419表达,可显著抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭及N-cadherin、PCNA蛋白的表达,而显著促进E-cadherin的蛋白表达(P<0.05);miR-34a-5p过表达对膀胱癌细胞具有类似的抑制作用;双荧光素酶报告基因实验、RIP及Pull-down实验证实Linc01419可靶向结合miR-34a-5p,而后者进一步介导了对E2F3的靶向调控;抑制miR-34a-5p表达,可显著削弱Linc01419沉默对膀胱癌细胞生物学行为及E-cadherin、N-cadherin、PCNA、E2F3表达的影响。结论:Linc01419在膀胱癌中异常高表达,其通过调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖和侵袭,很可能是膀胱癌发生、发展过程中的一个重要环节。 展开更多
关键词 膀胱癌 Linc01419 miR-34a-5p E2F3
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长链非编码RNA DLEU2通过miR-30a-5p/CD61对人结肠癌SW1116细胞生长和增殖的影响
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作者 吕俊 黄可 +1 位作者 张恩霖 吴淼 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第6期836-845,共10页
目的探讨长链非编码核糖核酸淋巴细胞白血病缺失基因2(LncRNA DLEU2)通过靶向微小核糖核酸(miR)-30a-5p/整合素β3(CD61)对人结肠癌SW1116细胞生长和增殖的影响。方法取人结肠癌细胞株SW1116培养并随机分为si-NC组、si-LncRNA DLEU2组... 目的探讨长链非编码核糖核酸淋巴细胞白血病缺失基因2(LncRNA DLEU2)通过靶向微小核糖核酸(miR)-30a-5p/整合素β3(CD61)对人结肠癌SW1116细胞生长和增殖的影响。方法取人结肠癌细胞株SW1116培养并随机分为si-NC组、si-LncRNA DLEU2组、模拟物阴性对照(miR-NC)组、miR-30a-5p mimics组、miR-30a-5p抑制剂阴性对照(NC inhibitor)+si-LncRNA DLEU2组及miR-30a-5p inhibitor+si-LncRNA DLEU2组,同时设置未转染细胞为空白组;转染48 h后,采用荧光显微镜检测细胞转染效率,四甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)分别检测细胞LncRNA DLEU2和miR-30a-5p表达、CD61、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、c-Myc mRNA和蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR检测LncRNA DLEU2与miR-30a-5p的靶向关系、miR-30a-5p与CD61的靶向关系;制作雄性胸腺BALB/c裸鼠异种移植瘤模型评估LncRNA DLEU2对肿瘤生长的影响。结果si-NC组、si-LncRNA DLEU2组、miR-NC组、miR-30a-5p mimics组、NC inhibitor+si-LncRNA DLEU2组、miR-30a-5p inhibitor+si-LncRNA DLEU2组转染效率均>85%;与空白组及si-NC组比较,si-LncRNA DLEU2组、NC inhibitor+si-LncRNA DLEU2组增殖抑制率上升(P<0.05),DLEU2表达下降(P<0.05),miR-30a-5p表达增加(P<0.05),CD61、CyclinD1、c-Myc mRNA和蛋白表达减少(P<0.05);与NC inhibitor+si-LncRNA DLEU2组比较,miR-30a-5p inhibitor+si-LncRNA DLEU2组细胞增殖抑制率下降(P<0.05),miR-30a-5p表达下降,CD61、CyclinD1、c-Myc mRNA和蛋白表达上升(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-30a-5p mimics组miR-30a-5p表达、增殖抑制率增加(P<0.05),CD61、CyclinD1、c-Myc mRNA和蛋白表达下降(P<0.05);LncRNA DLEU2可直接靶向调控miR-30a-5p、miR-30a-5p可直接靶向调控CD61,抑制LncRNA DLEU2表达可降低BALB/c裸鼠移植瘤生长(P<0.05)。结论沉默LncRNA DLEU2可抑制人结肠癌细胞株SW1116生长和增殖,其机制可能与靶向miR-30a-5p抑制CD61表达,抑制CyclinD1、c-Myc表达相关。 展开更多
关键词 长链非编码核糖核酸DLEU2 微小核糖核酸-30a-5p 结肠肿瘤 细胞 增殖
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基于miR-148a-3p/SMAD2轴探讨当归多糖对高糖诱导RGC凋亡的影响
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作者 王江涛 王艳新 +1 位作者 贾冠美 曹朗 《中国中医眼科杂志》 2024年第7期601-609,共9页
目的探究当归多糖(APS)对高糖诱导视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的影响,及其基于微小RNA-148a-3p/Smad家族成员2(miR-148a-3p/SMAD2)轴的作用机制。方法将分别转染miR-148a-3p模拟物(mimics)、miR-148a-3p抑制剂(inhibitor)及其对照品mimic... 目的探究当归多糖(APS)对高糖诱导视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的影响,及其基于微小RNA-148a-3p/Smad家族成员2(miR-148a-3p/SMAD2)轴的作用机制。方法将分别转染miR-148a-3p模拟物(mimics)、miR-148a-3p抑制剂(inhibitor)及其对照品mimics-NC、miR-NC的RGC,分为对照组(CG)、模型组(MG)、APS低剂量(APS-L)组、APS高剂量(APS-H)组、APS-H+miR-148a-3p对照品组(APS+miR-NC)、APS-H+miR-148a-3p抑制剂组(miR-148a-3p inhibitor),分别以相应的高糖和APS处理,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-148a-3p和SMAD2 mRNA表达水平,检测细胞活力、凋亡情况和氧化应激指标水平,Western Blot法检测SMAD2蛋白表达水平,双荧光素酶实验检测miR-148a-3p和SMAD2的靶向关系。结果(1)miR-148a-3p/SMAD2表达:APS-L组、APS-H组、APS-H+miR-NC组中miR-148a-3p表达水平均高于MG组(t_(APS-L)=6.564、t_(APS-H)=10.542、t_(APS-H+miR-NC)=9.945,均P=0.000),SMAD2 mRNA表达水平低于MG组(t_(APS-L)=4.147,P=0.004;t_(APS-H)=6.464、t_(APS-H+miR-NC)=6.586,均P=0.000);APS-H+miR-148a-3p inhibitor组miR-148a-3p表达水平低于APS-H+miRNC组(t=7.558,P=0.000),SMAD2 mRNA表达高于APS-H+miR-NC组(t=4.513,P=0.001),差异均有统计学意义。(2)细胞活力和凋亡率:APS-L组、APS-H组、APS-H+miR-NC组细胞活力高于MG组(t_(APS-L)=8.105、t_(APS-H)=11.509、t_(APS-H+miR-NC)=11.996,均P=0.000),细胞凋亡率低于MG组(t_(APS-L)=8.729、t_(APS-H)=15.690、t_(APS-H+miR-NC)=14.709,均P=0.000);APS-H+miR-148a-3p inhibitor组细胞活力低于APS-H+miR-NC组(t=10.212,P=0.000),细胞凋亡率高于APS-H+miR-NC组(t=12.247,P=0.000),差异均有统计学意义。(3)氧化应激:APS-L组、APS-H组、APS-H+miR-NC组乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)均低于MG组(LDH:t_(APS-L)=11.257、t_(APS-H)=18.770、t_(APS-H+miR-NC)=18.364,均P=0.000;MDA:t_(APS-L)=11.121、t_(APS-H)=17.139、t_(APS-H+miR-NC)=17.768,均P=0.000),超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)均高于MG组(SOD:t_(APS-L)=9.408、t_(APS-H)=14.833、t_(APS-H+miR-NC)=13.240,均P=0.000;GSH:t_(APS-L)=5.616、t_(APS-H)=12.080、t_(APS-H+miR-NC)=12.642,均P=0.000);APS-H+miR-148a-3p inhibitor组LDH和MDA均高于APS-H+miR-NC组(t_(LDH)=15.121、t_(MDA)=14.613,均P=0.000),SOD和GSH均低于APS-H+miR-NC组(tSOD=12.278、tGSH=8.912,均P=0.000),差异均有统计学意义。。(4)凋亡蛋白:APS-L组、APS-H组和APS-H+miR-NC组SMAD2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱天冬酶-3(Caspase-3)表达低于MG组(SMAD2:t_(APS-L)=4.565、t_(APS-H)=8.042、t_(APS-H+miR-NC)=7.390,均P=0.000;Bax:t_(APS-L)=4.916、t_(APS-H)=8.763、t_(APS-H+miR-NC)=8.336,均P=0.000;Caspase-3:t_(APS-L)=4.214、t_(APS-H)=10.201、t_(APS-H+miR-NC)=9.536,均P=0.000),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达高于MG组(t_(APS-L)=3.713,P=0.001;t_(APS-H)=10.108、t_(APS-H+miR-NC)=10.314,均P=0.000);APS-H+miR-148a-3p inhibitor组SMAD2、Bax、Caspase-3表达均高于APS-H+miR-NC组(t_(SMAD2)=5.651、t_(Bax)=6.840、t_(Caspase-3)=8.205,均P=0.000),Bcl-2表达低于APS-H+miR-NC组(t=9.283,P=0.000),差异均有统计学意义。(5)靶向关系:miR-148a-3p与SMAD2的3'非翻译区存在结合位点。miR-148a-3p mimics和野生型SMAD2共转染组荧光素酶活性低于mimics-NC和野生型SMAD2共转染组,差异有统计学意义(t=12.781,P=0.000)。结论当归多糖可能通过上调miR-148a-3p、下调SMAD2,改善高糖诱导的RGC凋亡和氧化应激损伤。 展开更多
关键词 当归多糖 视网膜神经节细胞 微小RNa-148a-3p SMAD家族成员2
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LncRNA-CASC2竞争性结合miR-193a-5p调控GSDMD焦亡通路逆转非小细胞肺癌顺铂耐药的分子机制 被引量:1
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作者 罗世程 肖冬平 +3 位作者 黄秀玲 左炜 胡向东 邓志辉 《中国当代医药》 2024年第1期10-14,共5页
目的探讨LncRNA-CASC2竞争性结合miR-193a-5p调控GSDMD焦亡通路逆转非小细胞肺癌顺铂耐药的分子机制。方法选用非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549进行研究,建立耐药株A549/DDP,通过CCK8检测细胞对顺铂的敏感性验证耐药细胞株是否成功建立... 目的探讨LncRNA-CASC2竞争性结合miR-193a-5p调控GSDMD焦亡通路逆转非小细胞肺癌顺铂耐药的分子机制。方法选用非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549进行研究,建立耐药株A549/DDP,通过CCK8检测细胞对顺铂的敏感性验证耐药细胞株是否成功建立。利用PCR检测CASC2在A549和A549/DDP细胞中的表达情况以及对GSDMD2、miR-193a-5p表达的影响。通过生物信息学软件预测LncRNA-CASC2与miR-193a-5p、miR-193a-5p与GSDMD结合位点,利用荧光素酶报告基因分析CASC2与miR-193a-5p、miR-193a-5p与GSDMD靶向关系,Western blot检测LncRNA-CASC2竞争性结合miR-193a-5p调控GSDMD焦亡通路的蛋白表达变化。结果A549/DDP细胞的半抑制浓度值是A549细胞的10倍以上,表明已成功构建耐药细胞株A549/DDP。A549/DDP中CASC2表达较细胞A549降低(P<0.05)。CASC2 mimics可抑制细胞中miR-193a-5p表达,同时GSDMD表达上调(P<0.05)。CASC2与miR-193a-5p、miR-193a-5p与GSDMD具有明显靶向关系(P<0.05)。结论非小细胞肺癌细胞中LncRNA-CASC2、miR-193a-5p低表达与GSDMD的高表达,与非小细胞肺癌化疗耐药性密切相关,LncRNA-CASC2与miR-193a-5p相互作用调控GSDMD,促进肿瘤细胞耐药。 展开更多
关键词 LncRNa-CASC2 miR-193a-5p GSDMD 耐药
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T2DM患者血清miR-199a-3p水平与DR的相关性研究
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作者 张玮琼 王建伟 +1 位作者 王晶莹 接传红 《中国中医眼科杂志》 2024年第8期723-729,736,共8页
目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清miR-199a-3p水平与糖尿病视网膜病变(DR)的相关性。方法纳入2021年9月—2022年8月在中国中医科学院眼科医院诊断为T2DM的患者81例(162只眼),根据是否发生DR分为DR组51例(102只眼)和非DR组30例(60只眼),... 目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清miR-199a-3p水平与糖尿病视网膜病变(DR)的相关性。方法纳入2021年9月—2022年8月在中国中医科学院眼科医院诊断为T2DM的患者81例(162只眼),根据是否发生DR分为DR组51例(102只眼)和非DR组30例(60只眼),选择同期来院体检的健康者30例(60只眼)作为对照组。分别采集对照组体检时,DR组、非DR组患者入院后的静脉血5 mL。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法检测3组血清miR-199a-3p相对表达量,并检测血清生化指标。分析血清miR-199a-3p水平与DR发生的相关性,并评估对DR发生的影响价值。结果(1)生化指标:3组空腹血浆葡萄糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)水平比较,差异均有统计学意义(F_(FPG)=88.218、F_(HbA1c)=92.815、F_(ALT)=28.522、F_(AST)=19.647、F_(TG)=27.680,均P=0.000)。非DR组FPG、HbAlc、ALT水平均高于对照组,差异均有统计学意义(t_(FPG)=10.302、t_(HbA1c)=9.977,均P=0.000;tALT=2.924,P=0.015);AST、TG水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。DR组所有生化指标水平均高于对照组和非DR组,差异均有统计学意义(对照组:t_(FPG)=15.123、t_(HbAlc)=15.275、t_(ALT)=7.357、t_(AST)=6.649、t_(TG)=7.898,均P=0.000;非DR组:t_(FPG)=3.929、t_(HbAlc)=3.772,均P=0.001;t_(AST)=3.591,P=0.002;tALT=4.410、t_(TG)=4.210,均P=0.000)。(2)血清miR-199a-3p水平:3组间血清miR-199a-3p水平比较,差异有统计学意义(F=25.100,P=0.000);非DR组、DR组血清miR-199a-3p水平均高于对照组,差异均有统计学意义(t^(T2DM)=2.147,P=0.035;t_(DR)=6.517,P=0.000);DR组血清miR-199a-3p水平高于非DR组,差异有统计学意义(t=4.606,P=0.000)。(3)DR分期对指标的影响:PDR期与NPDR期患者血清miR-199a-3p水平比较,PDR期低于NPDR期,差异有统计学意义(t=7.272,P=0.000)。PDR期与NPDR期患者生化指标比较,PDR期FPG、HbAlc、ALT、AST、TG水平均高于NPDR期,差异均有统计学意义(t_(FPG)=4.444、t_(HbAlc)=4.074、t_(ALT)=3.818,均P=0.000;t_(AST)=2.172,P=0.035;t_(TG)=3.587,P=0.001)。(4)相关性分析:DR患者血清miR-199a-3p水平与T2DM病程、FPG、HbAlc、ALT、AST、TG均呈负相关(r_(T2DM)病程=-0.368,P=0.008;r_(HbA1c)=-0.456,P=0.001;r_(AST)=-0.416,P=0.002;r_(ALT)=-0.405,P=0.003;r_(FPG)=-0.472、r_(TG)=-0.488,均P=0.000)。T2DM患者血清miR-199a-3p水平预测发生DR时,ROC曲线下面积为0.783,有统计学意义(P=0.000),血清miR-199a-3p水平对诊断DR有一定的预测性能,ROC曲线最佳临界点的约登指数为0.475,灵敏度为0.867,特异度为0.608。结论T2DM患者血清miR-199a-3p的表达与DR的发生密切相关,且与DR的病程、血糖变化和脂质代谢指标相关,可能成为T2DM患者发生DR的潜在生物学标志。 展开更多
关键词 2型糖尿病 糖尿病视网膜病变 miR-199a-3p
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创伤性骨折患者血清miR-374a-5p、BMP2水平与凝血功能指标及术后深静脉血栓形成的关系
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作者 刘晖 范小波 +2 位作者 庞超见 安彪 王永彬 《检验医学与临床》 CAS 2024年第19期2854-2859,共6页
目的探讨创伤性骨折(TF)患者血清微小RNA-374a-5p(miR-374a-5p)、骨形态发生蛋白2(BMP2)水平与凝血功能指标及术后深静脉血栓(DVT)形成的关系。方法选择2023年1-12月在该院诊治的204例TF患者,根据术后是否发生DVT将患者分为非DVT组和DV... 目的探讨创伤性骨折(TF)患者血清微小RNA-374a-5p(miR-374a-5p)、骨形态发生蛋白2(BMP2)水平与凝血功能指标及术后深静脉血栓(DVT)形成的关系。方法选择2023年1-12月在该院诊治的204例TF患者,根据术后是否发生DVT将患者分为非DVT组和DVT组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清BMP2水平,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清miR-374a-5p水平,采用全自动凝血仪及配套试剂检测抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)、纤维蛋白原(Fib)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、D-二聚体(D-D)。通过多因素Logistic回归分析TF患者术后发生DVT的影响因素;在StarBase网站上分析miR-374a-5p与BMP2的关系;采用Pearson相关分析miR-374a-5p与BMP2水平的相关性及二者与凝血功能指标的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-374a-5p与BMP2水平对TF患者术后发生DVT的预测价值,比较曲线下面积(AUC)的差异。结果DVT组重度骨折的比例及miR-374a-5p、D-D、Fib水平均高于非DVT组(P<0.05),BMP2、ATⅢ水平低于非DVT组(P<0.05)。miR-374a-5p水平与ATⅢ水平呈负相关(r=-0.414,P<0.05),与D-D、Fib水平均呈正相关(r=0.424、0.427,P<0.05)。BMP2水平与ATⅢ水平呈正相关(r=0.423,P<0.05),与D-D、Fib水平均呈负相关(r=-0.416、-0.441,P<0.05)。miR-374a-5p、D-D水平升高是TF患者术后发生DVT的独立危险因素(P<0.05),BMP2、ATⅢ水平升高是TF患者术后发生DVT的独立保护因素(P<0.05)。miR-374a-5p、BMP2二者之间存在结合位点。DVT组血清miR-374a-5p水平与BMP2水平呈负相关(r=-0.449,P<0.001)。血清miR-374a-5p、BMP2单项及联合检测预测TF患者术后发生DVT的AUC分别为0.830(95%CI:0.771~0.879)、0.805(95%CI:0.744~0.857)、0.943(95%CI:0.902~0.971),2项联合检测预测的AUC大于miR-374a-5p、BMP2单项检测预测的AUC(Z=4.511、5.039,均P<0.001)。结论TF术后发生DVT的患者中血清miR-374a-5p、BMP2水平异常,2项指标之间存在结合位点,且均与凝血功能指标ATⅢ、D-D、Fib相关;miR-374a-5p、BMP2联合检测对TF患者术后发生DVT具有较高的预测价值。 展开更多
关键词 创伤性骨折 微小RNa-374a-5p 骨形态发生蛋白2 凝血功能 深静脉血栓
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皮肤鳞状细胞癌组织微RNA-103a-2-5p、钙黏附蛋白11表达及其临床意义
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作者 赵云超 宋颖 《安徽医药》 CAS 2024年第7期1372-1377,共6页
目的分析皮肤鳞状细胞癌组织中微RNA-103a-2-5p(miR-103a-2-5p)和钙黏附蛋白11(CDH11)的表达水平,探讨二者在临床研究中的意义。方法选取2017年1月至2019年6月宝鸡市人民医院诊治的98例皮肤鳞状细胞癌病人为研究对象,收集病人术中切除... 目的分析皮肤鳞状细胞癌组织中微RNA-103a-2-5p(miR-103a-2-5p)和钙黏附蛋白11(CDH11)的表达水平,探讨二者在临床研究中的意义。方法选取2017年1月至2019年6月宝鸡市人民医院诊治的98例皮肤鳞状细胞癌病人为研究对象,收集病人术中切除的癌组织及癌旁正常组织。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测组织中miR-103a-2-5p的表达水平。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测CDH11表达水平。TargetScanHuman网站预测miR-103a-2-5p与CDH11的靶向关系;Pearson相关性分析癌组织中miR-103a-2-5p和CDH11水平的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析miR-103a-2-5p、CDH11表达与皮肤鳞状细胞癌病人预后的关系;影响皮肤鳞状细胞癌病人预后的因素采用Cox回归分析;受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析miR-103a-2-5p和CDH11的表达对皮肤鳞状细胞癌的诊断价值。结果与癌旁正常组织[1.03±0.12,(5.06±1.43)µg/L]相比,皮肤鳞状细胞癌组织miR-103a-2-5p表达水平(1.46±0.38)显著升高(P<0.05),CDH11表达水平[(2.96±0.62)µg/L]明显降低(P<0.05);TargetScanHu-man网址预测miR-103a-2-5p与CDH11间存在结合位点;经Pearson相关性分析,miR-103a-2-5p与CDH11水平呈负相关(P<0.05);两者均与病人病理分级、TNM分期、淋巴结转移、侵袭程度相关(P<0.05);miR-103a-2-5p高表达组和CDH11低表达组复发率显著高于miR-103a-2-5p低表达组和CDH11高表达组(P<0.05);TNM分期、淋巴结转移、miR-103a-2-5p是影响病人预后的危险因素(P<0.05),CDH11是影响病人预后的保护因素(P<0.05);miR-103a-2-5p、CDH11二者联合诊断皮肤鳞状细胞癌的ROC曲线下面积(AUC)为0.836,显著优于其各自单独诊断(P=0.018、0.021)。结论皮肤鳞状细胞癌病人miR-103a-2-5p表达水平升高,CDH11表达水平降低,二者均与病人临床病理特征及预后有密切关系,且二者联合可较好的诊断皮肤鳞状细胞癌。 展开更多
关键词 皮肤鳞状细胞癌 微RNa-103a-2-5p 钙黏附蛋白11 癌组织 预后
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红景天苷调控miR-20a-5p/TIMP2轴对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖和迁移的影响
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作者 朱光昭 方璐 +1 位作者 严婕 李琴 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第5期803-809,共7页
目的探讨红景天苷调控miR-20a-5p/金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP2)轴对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)功能和活化的影响。方法以HFLS-RA细胞为研究对象,将HFLS-RA细胞分为肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、对照组、红景天苷组、miR-... 目的探讨红景天苷调控miR-20a-5p/金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP2)轴对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)功能和活化的影响。方法以HFLS-RA细胞为研究对象,将HFLS-RA细胞分为肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、对照组、红景天苷组、miR-20a-5p抑制物阴性对照(inhibitor NC)组、miR-20a-5p抑制物组、红景天苷+miR-20a-5p模拟物阴性对照(mimic NC)组、红景天苷+miR-20a-5p模拟物组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HFLS-RA细胞中miR-20a-5p表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HFLS-RA细胞上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;细胞计数试剂盒8(CCK-8)法、5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)染色检测HFLS-RA细胞增殖;划痕实验检测HFLS-RA细胞迁移;免疫印迹实验(Western blot)检测HFLS-RA细胞中TIMP2、细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)-9蛋白表达;双荧光素酶验证miR-20a-5p与TIMP2的关系。结果与对照组比较,TNF-α组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、吸光度(OD_(450))值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白上调,TIMP2蛋白下调(P<0.05);与TNF-α组相比,红景天苷组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白下调,TIMP2蛋白上调(P<0.05);与inhibitor NC组、TNF-α组相比比较,miR-20a-5p抑制物组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白下调,TIMP2蛋白上调(P<0.05);与红景天苷+mimic NC组、红景天苷组相比,红景天苷+miR-20a-5p模拟物组miR-20a-5p表达、IL-1β、IL-6水平、OD_(450)值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率及CyclinD1、MMP-9蛋白表达升高,TIMP2蛋白表达降低(P<0.05)。miR-20a-5p与TIMP2存在靶向调控关系。结论红景天苷可能通过调控miR-20a-5p/TIMP2抑制TNF-α诱导的HFLS-RA细胞增殖、迁移及炎症反应。 展开更多
关键词 红景天苷 miR-20a-5p 金属蛋白酶组织抑制剂-2 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 增殖 迁移
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miR-30a-5p靶向E2F7阻滞A549细胞周期并抑制其增殖
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作者 鲍祯 乔亚红 《河南医学研究》 CAS 2024年第17期3106-3113,共8页
目的探究miR-30a-5p靶向E2F7调控非小细胞肺癌细胞周期和增殖的机制。方法通过荧光定量(qRT-PCR)验证miR-30a-5p在非小细胞肺癌A549细胞与人正常肺上皮细胞BEAS-2B中的相对表达水平。在线软件预测了miR-30a-5p的靶基因及其靶向结合位点... 目的探究miR-30a-5p靶向E2F7调控非小细胞肺癌细胞周期和增殖的机制。方法通过荧光定量(qRT-PCR)验证miR-30a-5p在非小细胞肺癌A549细胞与人正常肺上皮细胞BEAS-2B中的相对表达水平。在线软件预测了miR-30a-5p的靶基因及其靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验进一步验证miR-30a-5p和E2F7 mRNA 3’UTR区域的靶向关系。其次在A549细胞中分别转染miR-30a-5p模拟物(miR-30a-5p mimics)和miR-30a-5p抑制剂(miR-30a-5p inhibitor),应用CCK-8细胞计数试剂盒检测A549细胞增殖情况,流式细胞术检测A549细胞凋亡和细胞周期。qRT-PCR和免疫印迹检测细胞周期相关基因和肺腺癌相关基因的mRNA和蛋白表达水平。结果miR-30a-5p在A549细胞中表达水平低于BEAS-2B,且miR-30a-5p靶向结合与E2F7 mRNA 3’UTR 514-520位点,抑制E2F7表达。转染miR-30a-5p mimics抑制A549细胞增殖,并促进A549凋亡。将A549细胞周期阻滞在G 1期。调控肺腺癌相关基因TFDP3、CDK1、E2F8、CCNA2和CDC6的mRNA和蛋白表达水平。结论非小细胞肺癌A549细胞中miR-30a-5p通过靶向负调控E2F7的表达,调控TFDP3、CDK1、E2F8、CCNA2和CDC6的mRNA和蛋白表达,抑制A549细胞增殖和细胞周期。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 miR-30a-5p E2F7 基因表达 细胞周期 凋亡
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miR-130a-5p靶向Runx2对牙槽骨成骨细胞增殖和分化的影响及其调控机制研究
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作者 张义林 侯旭 +2 位作者 汪莉 朗么磋 李相宜 《中国美容医学》 CAS 2024年第6期51-55,共5页
目的:探究miR-130a-5p靶向Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)对牙槽骨成骨细胞(Alveolar osteoblast,AOB)增殖、凋亡、成骨分化的影响及其机制。方法:将AOB分为NC组、miR-NC组、miR-130a-5p组、miR-130a-5p... 目的:探究miR-130a-5p靶向Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)对牙槽骨成骨细胞(Alveolar osteoblast,AOB)增殖、凋亡、成骨分化的影响及其机制。方法:将AOB分为NC组、miR-NC组、miR-130a-5p组、miR-130a-5p+Runx2组和miR-130a-5p+SHH组。双荧光素酶报告验证miR-130a-5p对Runx2、Sonic hedgehog(SHH)的调控关系;CCK-8及EdU染色检测细胞增殖能力;AnnexinV-FITC/PI法检测细胞凋亡能力;ALP染色、茜素红染色检测细胞成骨分化能力;RT-qPCR检测miR-130a-5p、Runx2、SHH、神经胶质瘤关联癌基因同源物1(Gli1)mRNA水平;Western Blot检测增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Ki67、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(Osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein 2,BMP2)、Runx2、SHH、Gil1水平。结果:miR-130a-5p靶向调控Runx2、SHH。过表达miR-130a-5p后,细胞24 h、48 h、72 h OD值及EdU阳性率降低,细胞凋亡率升高,成骨分化能力降低,miR-130a-5p、Bax蛋白水平升高,Runx2、PCNA、Ki67、Bcl-2、ALP、OCN、BMP2蛋白及SHH、Gil1 mRNA和蛋白水平均降低(P<0.05)。过表达miR-130a-5p和Runx2或过表达miR-130a-5p和SHH可减弱过表达miR-130a-5p对细胞增殖、凋亡、成骨分化的影响。结论:miR-130a-5p靶向Runx2抑制AOB增殖和成骨分化,并促进AOB凋亡,其可能通过抑制SHH信号通路发挥作用。 展开更多
关键词 miR-130a-5p Runt相关转录因子2 牙槽骨成骨细胞 Sonic hedgehog信号通路 增殖 分化 调控机制
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慢性肺源性心脏病患儿血清miR-29a-3p、THBS2水平与心肺功能的相关性研究
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作者 刘锐 罗艳丽 +3 位作者 田聪 高丽芬 李珊 韩毅 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第17期2136-2140,共5页
目的探讨慢性肺源性心脏病患儿血清微小核糖核酸-29a-3p(miR-29a-3p)、血小板反应蛋白2(THBS2)水平与心肺功能的关系。方法纳入2019年7月至2023年9月期间石家庄市中医院收治的136例慢性肺源性心脏病患儿作为研究对象,依据患儿临床体征... 目的探讨慢性肺源性心脏病患儿血清微小核糖核酸-29a-3p(miR-29a-3p)、血小板反应蛋白2(THBS2)水平与心肺功能的关系。方法纳入2019年7月至2023年9月期间石家庄市中医院收治的136例慢性肺源性心脏病患儿作为研究对象,依据患儿临床体征、心肺功能、症状等分为代偿期组(74例)和失代偿期组(62例)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测血清miR-29a-3p水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清THBS2水平,采用超声诊断仪检测心功能指标左心室射血分数(LVEF)、心排血量(CO),采用电化学发光分析法检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(cTnI),采用肺功能仪检测肺功能指标肺动脉收缩压(PASP)、平均肺动脉压(MPAP)、肺动脉舒张压(PADP)。采用Pearson相关性分析慢性肺源性心脏病患儿血清miR-29a-3p、THBS2水平与心肺功能指标的相关性,多因素Logistic回归分析筛选慢性肺源性心脏病患儿病情的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-29a-3p、THBS2水平对慢性肺源性心脏病患儿病情的评估价值。结果失代偿期组患儿THBS2、CK-MB、cTnI、PASP、MPAP、PADP高于代偿期组(P<0.05),miR-29a-3p、LVEF、CO低于代偿期组(P<0.05)。慢性肺源性心脏病患儿血清miR-29a-3p与LVEF、CO呈正相关(P<0.05),与CK-MB、cTnI、PASP、MPAP、PADP呈负相关(P<0.05);THBS2与LVEF、CO呈负相关(P<0.05),与CK-MB、cTnI、PASP、MPAP、PADP呈正相关(P<0.05)。miR-29a-3p是慢性肺源性心脏病患儿病情加重的保护因素(P<0.05),THBS2是慢性肺源性心脏病患儿病情加重的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-29a-3p、THBS2水平单独及联合评估慢性肺源性心脏病患儿病情程度的曲线下面积(AUC)分别为0.827、0.817、0.915。结论血清miR-29a-3p、THBS2水平均是慢性肺源性心脏病患儿病情的影响因素,与慢性肺源性心脏病患儿病情和心肺功能密切相关。 展开更多
关键词 慢性肺源性心脏病 心肺功能 微小核糖核酸-29a-3p 血小板反应蛋白2
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载脂蛋白B/A-1比值与2型糖尿病慢性并发症的相关研究进展
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作者 田佳敏 李社莉 《临床医学进展》 2024年第8期807-811,共5页
糖尿病的发生率逐渐升高,尤其是2型糖尿病。随着糖尿病病程的增加,各项并发症的发病率也随之升高。尤其是2型糖尿病导致的慢性并发症,对人们的健康、心理及经济等各个方面均有一定的影响。近几年的研究均表明了脂质代谢对糖尿病的发病... 糖尿病的发生率逐渐升高,尤其是2型糖尿病。随着糖尿病病程的增加,各项并发症的发病率也随之升高。尤其是2型糖尿病导致的慢性并发症,对人们的健康、心理及经济等各个方面均有一定的影响。近几年的研究均表明了脂质代谢对糖尿病的发病机制及其并发症的发生及进展有一定的影响。载脂蛋白B/A-1比值作为新的代谢紊乱标志物的指标之一,可评价糖尿病患者血管相关并发症。本文就载脂蛋白B/A-1比值在2型糖尿病血管并发症中的作用的相关研究进行综述。The prevalence of type 2 diabetes is on the rise, leading to an increase in associated complications over time. In particular, the chronic complications caused by type 2 diabetes have a certain impact on people’s health, psychology and economy. Recent studies have highlighted the impact of lipid metabolism on the development and progression of diabetes-related complications. Given that the ApoB/A-1 ratio can serve as a valuable indicator for assessing metabolic disorders and evaluating chronic complications in patients with diabetes. This review provides an overview of relevant research concerning the role of ApoB/A-1 ratio in vascular complications of type 2 diabetes. 展开更多
关键词 脂蛋白B/a-1比值 2型糖尿病 糖尿病慢性并发症
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炙甘草汤通过miR-181a-5p靶向SPHK2调控心肌纤维化改善糖尿病心肌病 被引量:1
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作者 王天宇 丁君灿 +1 位作者 程心怡 胡鹏飞 《浙江中西医结合杂志》 2024年第1期14-20,33,共8页
目的探究炙甘草汤对糖尿病心肌病(DCM)模型大鼠心肌纤维化的影响以及调控机制。方法雄性Sprague Dawley(SD)大鼠30只,10只大鼠作为对照组;20只通过高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建DCM模型大鼠,造模后按随机数字表法分成DC... 目的探究炙甘草汤对糖尿病心肌病(DCM)模型大鼠心肌纤维化的影响以及调控机制。方法雄性Sprague Dawley(SD)大鼠30只,10只大鼠作为对照组;20只通过高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建DCM模型大鼠,造模后按随机数字表法分成DCM组、炙甘草汤组。炙甘草汤组予2 mL/100 g炙甘草汤(1 g/mL)灌胃,对照组及DCM组予等量生理盐水灌胃,连续给药4周,每天1次。灌胃给药结束后,HE染色观察DCM模型大鼠心肌组织的病理改变,Masson染色观察DCM模型大鼠的心肌纤维化情况。提取大鼠乳鼠心肌成纤维细胞,分为对照组、高糖组、炙甘草汤组、miRNA-NC组、miR-181a-5p模拟物组、miR-181a-5p拮抗剂组、炙甘草汤+miRNA-NC组和炙甘草汤+miR-181a-5p拮抗剂组并进行相应处理。通过高糖(30 mmol/L)诱导心肌成纤维细胞增殖模型。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠心肌组织和心肌成纤维细胞中的α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)和鞘氨醇激酶2(SPHK2)蛋白表达。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测miR-181a-5p、CollagenⅠ和CollagenⅢ的相对表达水平。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测心肌成纤维细胞的细胞活力。TargetScan数据库预测miR-181a-5p与SPHK2的结合序列。双荧光素酶报告基因实验验证miR-181a-5p与SPHK2的靶向关系。结果与对照组比较,DCM组大鼠血糖水平显著升高[(30.40±3.48)mmol/L比(5.08±0.17)mmol/L,P<0.01],心肌细胞肥大、排列紊乱、成纤维细胞增生伴炎症细胞浸润,炙甘草汤组大鼠上述情况均得到改善。与对照组比较,DCM组大鼠心肌组织α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、SPHK2蛋白水平升高,miR-181a-5p水平显著下降[(0.45±0.20)比(1.00±0.12),P<0.01];而炙甘草汤喂养能够逆转上述表达水平变化。与对照组比较,高糖组心肌成纤维细胞的细胞活力[(194.03±25.59)%比(100.00±11.00)%,P<0.01]、CollagenⅠ[(3.73±0.81)比(1.00±0.17),P<0.01]、CollagenⅢ[(3.93±0.97)比(1.00±0.24),P<0.01]、α-SMA蛋白、SPHK2蛋白水平升高,miR-181a-5p水平显著下降[(0.41±0.18)比(1.00±0.21),P<0.01];与高糖组比较,炙甘草汤组心肌成纤维细胞的细胞活力[(147.63±25.80)%比(194.03±25.59)%,P<0.01]、CollagenⅠ[(1.91±0.58)比(3.73±0.81),P<0.01]、CollagenⅢ[(2.02±0.45)比(3.93±0.97),P<0.01]、α-SMA蛋白、SPHK2蛋白水平降低,miR-181a-5p水平显著升高[(0.69±0.17)比(0.41±0.18),P<0.01]。与miRNA-NC比较,心肌成纤维细胞转染miR-181a-5p模拟物后miR-181a-5p表达显著升高[(2.82±0.86)比(1.00±0.28),P<0.01],SPHK2表达下降;而转染miR-181a-5p拮抗剂后miR-181a-5p表达显著下降[(0.29±0.09)比(1.00±0.28),P<0.01],SPHK2表达升高。TargetScan数据库分析发现,miR-181a-5p与SPHK2的3’UTR存在结合序列。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-181a-5p和SPHK2存在靶向作用。与炙甘草汤+miRNA-NC组比较,炙甘草汤+miR-181a-5p拮抗剂组心肌成纤维细胞CollagenⅠ[(2.95±0.67)比(1.89±0.26),P<0.01]、CollagenⅢ[(2.99±0.74)比(1.85±0.63),P<0.01]、细胞活力[(78.57±10.64)%比(59.75±8.08)%,P<0.01]、α-SMA蛋白、SPHK2蛋白水平升高,miR-181a-5p水平显著降低[(0.77±0.17)比(2.89±0.57),P<0.01]。结论炙甘草汤可能通过miR-181a-5p靶向SPHK2调控心肌纤维化来实现对DCM的改善作用。 展开更多
关键词 大鼠 糖尿病心肌病 心肌成纤维细胞 炙甘草汤 miR-181a-5p SPHK2
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miR-378a-3p靶向NUAK2抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭
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作者 陈建彬 王泰人 《肿瘤防治研究》 CAS 2024年第6期432-439,共8页
目的探讨微小RNA-378a-3p(miR-378a-3p)影响乳腺癌细胞发展的机制。方法基于TCGA数据库分析miR-378a-3p在乳腺癌细胞中的表达情况;利用starBase、miRDB、miRWalk数据库对miR-378a-3p进行靶基因预测,双荧光素酶报告实验验证miR-378a-3p对... 目的探讨微小RNA-378a-3p(miR-378a-3p)影响乳腺癌细胞发展的机制。方法基于TCGA数据库分析miR-378a-3p在乳腺癌细胞中的表达情况;利用starBase、miRDB、miRWalk数据库对miR-378a-3p进行靶基因预测,双荧光素酶报告实验验证miR-378a-3p对NUAK家族激酶2(NUAK2)的靶向调控;qRT-PCR和Western blot检测miR-378a-3p和NUAK2在乳腺癌细胞中mRNA和蛋白的表达情况;细胞增殖实验检测乳腺癌细胞的增殖能力;细胞划痕实验和侵袭实验分别检测乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力。凋亡和周期实验检测乳腺癌细胞的凋亡率和细胞周期分布。结果miR-378a-3p在乳腺癌细胞中显著下调,过表达miR-378a-3p抑制了乳腺癌细胞的增殖,迁移和侵袭。miR-378a-3p靶向下调NUAK2的表达。结论miR-378a-3p通过靶向抑制NUAK2的表达,从而抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 乳腺癌 miR-378a-3p NUAK2 增殖 迁移 侵袭
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MiR-219a-5p exerts a protective function in a mouse model of myocardial infarction
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作者 ZULONG SHENG YANRU HE +3 位作者 JUNYAN CAI YUQIN JI YUYU YAO GENSHAN MA 《BIOCELL》 SCIE 2024年第9期1369-1377,共9页
Background:Myocardial infarction(MI)is known worldwide for its important disabling features,including myocarditis and cardiomyocyte apoptosis.It is believed that microRNA(miRNA)has a role in the cellular processes of ... Background:Myocardial infarction(MI)is known worldwide for its important disabling features,including myocarditis and cardiomyocyte apoptosis.It is believed that microRNA(miRNA)has a role in the cellular processes of apoptosis and myocarditis,and miR-219a-5p has been found to suppress the inflammatory response.However,unknown is the precise mechanism by which miR-219a-5p contributes to MI.Methods:We measured the expression of miR-219a-5p and evaluated its effects on target proteins,inflammatory factors,and apoptosis in a mouse model of MI.Echocardiography was utilized to examine the MI clinical index,and triphenyl tetrazolium chloride staining was employed to analyze the infarcted region.Enzyme-linked immunosorbent assay and Western blotting measured serum and molecular markers in heart tissues.To quantify the association with miR-219a-5p and ATPase sarcoplasmic/endoplasmic reticulum Ca^(2+) transporting 2(ATP2A2),the luciferase activity assay and Pearson’s correlation analysis were employed.Results:MiR-219a-5p exhibited low expression in a mouse model of MI,and its amplification prevented both apoptotic and inflammatory reactions.Specifically,miR-219a-5p targeted ATP2A2.Conclusion:In a mouse model of MI,miR-219a-5p exerted a potent protective effect via direct targeting of ATP2A2. 展开更多
关键词 MiR-219a-5p Ca^(2+) transporting 2 Myocardial infarction Inflammatory response APOPTOSIS
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SCN2A基因突变相关癫痫患儿外周血miRNA-15a-5p表达变化及其与病情的关系
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作者 陈娇 张园 +3 位作者 赵家强 王慧杰 刘莉 刘晓鸣 《山东医药》 CAS 2024年第15期56-59,共4页
目的观察SCN2A基因突变相关癲痫患儿外周血miRNA-15a-5p水平变化,分析外周血miRNA-15a-5p相对表达量与SCN2A基因突变相关癲痫患儿病情的相关性。方法纳入同期住院癫痫患儿20例,其中SCN2A基因突变的癫痫患儿10例(突变组)、非SCN2A基因突... 目的观察SCN2A基因突变相关癲痫患儿外周血miRNA-15a-5p水平变化,分析外周血miRNA-15a-5p相对表达量与SCN2A基因突变相关癲痫患儿病情的相关性。方法纳入同期住院癫痫患儿20例,其中SCN2A基因突变的癫痫患儿10例(突变组)、非SCN2A基因突变的癫痫患儿(非突变组)10例;突变组中,癫痫控制良好4例、难治性癫痫6例;SCN2A基因突变位点在钠离子通道的关键区6例、连接区4例。另择同期体检健康儿童10例作为对照组。采用qRT-PCR检测上述三组外周血miRNA-15a-5p。采用Spearman相关分析外周血miRNA-15a-5p水平与癫痫患儿病情的相关性。结果与非突变组和对照组相比,突变组患儿外周血miRNA-15a-5p相对表达量升高(P<0.001);在突变组中,与SCN2A基因突变位点在钠离子通道的连接区患儿相比,在关键区的患儿外周血miRNA-15a-5p表达升高,且表达量与突变位点是否在关键区相关(r=0.71,P<0.05)。与癫痫控制良好患儿相比,难治性癫痫患儿外周血miRNA-15a-5p相对表达量升高,且表达量与患儿病情相关(r=0.85,P<0.05)。结论SCN2A基因突变相关癫痫患儿外周血中miRNA-15a-5p相对表达量升高,其表达量高的癫痫患儿病情重。 展开更多
关键词 微小RNa-15a-5p 癫痫 难治性癫痫 SCN2a基因突变
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拮抗链霉菌R_(2)A-15发酵条件优化及其活性稳定性分析
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作者 梁嘉振 郭家勇 +5 位作者 杨铮蕴 罗婉 罗东程 杨春敏 李羽 谢雨轩 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第8期1685-1695,共11页
柑橘是我国最重要的水果之一,其采后发生的柑橘绿霉病严重威胁柑橘的质量安全,而且还会引起果品中真菌毒素的污染。本团队从广东省湛江市廉江九洲江红橙园的红橙植株根部土壤中,分离筛选出一株对柑橘绿霉病病原菌具有良好拮抗作用的链霉... 柑橘是我国最重要的水果之一,其采后发生的柑橘绿霉病严重威胁柑橘的质量安全,而且还会引起果品中真菌毒素的污染。本团队从广东省湛江市廉江九洲江红橙园的红橙植株根部土壤中,分离筛选出一株对柑橘绿霉病病原菌具有良好拮抗作用的链霉菌R_(2)A-15,对其进行发酵条件优化和抑菌活性稳定性分析,为柑橘绿霉病生防菌剂的制备与应用提供参考。本研究以指状青霉(Penicillium digitatum)为靶标菌,根据纸片扩散法的抑菌圈直径大小判断发酵液抑菌活性。采用单因素和交叉组合试验优化菌株R_(2)A-15发酵培养基,通过响应面分析法对发酵条件进行优化,提高发酵液抑菌活性,并对发酵液进行不同的酸碱、温度和紫外线条件的稳定性研究。在单因素试验和交叉组合试验中,菌株发酵培养基的最适碳源为玉米面,最适氮源为酸水解酪蛋白。根据响应面分析法,得出玉米面和发酵时间对发酵液抑菌活性有显著影响。经验证试验得出,最大的发酵液抑菌活性的最优发酵培养基为:玉米面12.09 g,酸水解酪蛋白4.00 g,碳酸钙2.00 g,硫酸镁2.00 g,磷酸氢二钾2.00 g,氯化钠1.00 g,蒸馏水1 L;最优发酵条件为:发酵初始pH7.0、发酵时间37.50 h、发酵温度34℃、接种量3%、摇瓶装液量100 mL/250 mL。菌株发酵液抑菌活性优化后比优化前提高了39%。菌株发酵液经过不同的温度和紫外线条件处理后,整体抑菌活性能维持在一个相对稳定的高活性水平上,但在强酸强碱条件下,发酵液抑菌活性有所下降。结果表明,链霉菌R_(2)A-15对柑橘绿霉病病原菌具有较好的稳定抑菌效果,有较好的实际应用前景,为后期规模化发酵以及菌剂的开发奠定基础。 展开更多
关键词 指状青霉 链霉菌R_(2)a-15 抑菌活性 发酵优化 稳定性
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神经胶质瘤组织中miR-203a-3p、PHOX2B表达水平与临床特征及预后的关系
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作者 张淇 胡嘉 +3 位作者 李辉 王锦 李忠德 胡志源 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第10期1382-1388,共7页
目的探究神经胶质瘤组织中微小RNA-203a-3p(miR-203a-3p)、配对同源异型盒蛋白2B(PHOX2B)表达水平与临床特征及预后的关系。方法选取2017年6月至2020年4月我院收治的96例神经胶质瘤患者,术中采集切除的胶质瘤组织及相应癌旁组织,采用qRT... 目的探究神经胶质瘤组织中微小RNA-203a-3p(miR-203a-3p)、配对同源异型盒蛋白2B(PHOX2B)表达水平与临床特征及预后的关系。方法选取2017年6月至2020年4月我院收治的96例神经胶质瘤患者,术中采集切除的胶质瘤组织及相应癌旁组织,采用qRT-PCR和免疫组化法检测胶质瘤组织和癌旁组miR-203a-3p、PHOX2B mRNA表达;采用Pearson法分析miR-203a-3p、PHOX2B mRNA的相关性;采用Kaplan-Meier生存曲线分析miR-203a-3p、PHOX2B mRNA与神经胶质瘤患者预后的关系;采用COX回归分析影响神经胶质瘤患者预后的危险因素。结果胶质瘤组织miR-203a-3p水平和阳性表达率显著低于癌旁组织(P<0.05),PHOX2B mRNA水平和阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05)。Pearson相关性分析,神经胶质瘤患者miR-203a-3p、PHOX2B mRNA水平呈负相关(P<0.05)。miR-203a-3p、PHOX2B与KPS评分、肿瘤组织坏死和WHO分级有关(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线分析得出,miR-203a-3p高表达组生存率显著高于低表达组(P<0.05),PHOX2B mRNA高表达组生存率显著低于低表达组(P<0.05)。COX回归分析表明,miR-203a-3p、PHOX2B mRNA、肿瘤组织坏死和WHO分级是影响神经胶质瘤患者预后的危险因素(P<0.05)。结论在神经胶质瘤中miR-203a-3p表达水平显著降低,PHOX2B mRNA表达水平显著升高,二者与临床特征及预后密切相关。 展开更多
关键词 微小RNa-203a-3p 配对同源异型盒蛋白2B 神经胶质瘤 临床特征 预后
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lncRNA MIR4435-2HG靶向miR-376a-3p调控胆管癌细胞生物学行为的机制研究
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作者 刘文东 张嘉麟 余紫丹 《局解手术学杂志》 2024年第1期30-35,共6页
目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)MIR4435-2HG(MIR4435-2HG)对胆管癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及其对微小RNA-376a-3p(miR-376a-3p)的调控作用。方法 qRT-PCR法检测人肝内胆管上皮细胞HIBEpic与人胆管癌细胞RBE中MIR4435-2HG、mi... 目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)MIR4435-2HG(MIR4435-2HG)对胆管癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及其对微小RNA-376a-3p(miR-376a-3p)的调控作用。方法 qRT-PCR法检测人肝内胆管上皮细胞HIBEpic与人胆管癌细胞RBE中MIR4435-2HG、miR-376a-3p的表达。将si-NC、si-MIR4435-2HG、miR-NC、miR-376a-3p mimics、si-MIR4435-2HG联合anti-miR-NC、si-MIR4435-2HG联合anti-miR-376a-3p分别转染至RBE细胞,作为si-NC组、si-MIR4435-2HG组、miR-NC组、miR-376a-3p组、si-MIR4435-2HG+anti-miR-NC组、si-MIR4435-2HG+anti-miR-376a-3p组;采用MTT法、Transwell小室法及流式细胞仪分别检测细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡情况;双荧光素酶报告基因实验验证MIR4435-2HG与miR-376a-3p的靶向关系。Western blot检测相关蛋白表达。结果 RBE细胞中MIR4435-2HG表达量升高(P<0.05),miR-376a-3p表达量降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-MIR4435-2HG组MIR4435-2HG表达、细胞活力及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-376a-3p组细胞活力及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),miR-376a-3p表达、细胞凋亡率升高(P<0.05)。MIR4435-2HG可靶向调控miR-376a-3p;与si-MIR4435-2HG+anti-miR-NC组比较,si-MIR4435-2HG+anti-miR-376a-3p组细胞活力及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平升高(P<0.05),迁移及侵袭细胞数增多(P<0.05),miR-376a-3p表达、细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论 敲低MIR4435-2HG可通过靶向调控miR-376a-3p进而抑制RBE细胞增殖、迁移、侵袭,并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 lncRNA MIR4435-2HG miR-376a-3p 胆管癌 细胞增殖 迁移 侵袭
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CircACAP2靶向miR-29a-3p/CCNT2轴对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响
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作者 屈苗 关欣 《中西医结合心脑血管病杂志》 2024年第17期3128-3135,共8页
目的:探讨CircACAP2靶向miR-29a-3p/细胞周期蛋白T2(CCNT2)轴对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法:将H9c2细胞分为Control组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、Model组(建立H/R模型)、si-CircACAP2组(转染si-CircACAP2)、si-... 目的:探讨CircACAP2靶向miR-29a-3p/细胞周期蛋白T2(CCNT2)轴对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法:将H9c2细胞分为Control组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、Model组(建立H/R模型)、si-CircACAP2组(转染si-CircACAP2)、si-CircACAP2+inhibitor-NC组(si-CircACAP2和inhibitor-NC共转染)、si-CircACAP2+miR-29a-3p inhibitor组(si-CircACAP2和miR-29a-3p inhibitor共转染);实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测H9c2细胞中CircACAP2、miR-29a-3p的表达水平;四唑盐(MTT)法检测H9c2细胞活力;流式细胞仪检测H9c2细胞凋亡;单丹磺酰尸胺(MDC)染色法检测H9c2细胞自噬;乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测H9c2细胞上清中LDH、MDA、SOD水平,DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞凋亡蛋白[B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]、自噬相关蛋白(Beclin-1、P62)及CCNT2的表达;双荧光素酶报告检测CircACAP2对miR-29a-3p的靶向关系和miR-29a-3p对CCNT2的靶向关系。结果:与Control组比较,Model组H9c2细胞中CircACAP2表达、凋亡率、自噬囊泡数、LDH释放率、MDA、ROS水平、Bax、Beclin-1、CCNT2蛋白表达升高,miR-29a-3p表达、OD490值、SOD活性、PCNA、Bcl-2、P62蛋白表达降低(P<0.05);与Model组比较,si-CircACAP2组H9c2细胞中CircACAP2表达、凋亡率、自噬囊泡数、LDH释放率、MDA、ROS水平、Bax、Beclin-1、CCNT2蛋白表达降低,miR-29a-3p表达、OD490值、SOD活性、PCNA、Bcl-2、P62蛋白表达升高(P<0.05);与si-CircACAP2组比较,si-CircACAP2+miR-29a-3p inhibitor组H9c2细胞中CircACAP2表达差异无统计学意义(P>0.05),凋亡率、自噬囊泡数、LDH释放率、MDA、ROS水平、Bax、Beclin-1、CCNT2蛋白表达升高,miR-29a-3p表达、OD490值、SOD活性、PCNA、Bcl-2、P62蛋白表达降低(P<0.05);CircACAP2靶向调控miR-29a-3p的表达,miR-29a-3p靶向负调控CCNT2的表达。结论:敲低CircACAP2可能通过靶向miR-29a-3p来下调CCNT2表达,进而抑制H/R诱导的H9c2细胞凋亡、自噬能力及氧化应激,促进细胞增殖,发挥保护作用。 展开更多
关键词 缺氧/复氧 CircACAP2 miR-29a-3p/细胞周期蛋白T2 心肌细胞 实验研究
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