28种植物提取物对松材线虫的毒杀作用

测定了采自广东、湖南、云南和新疆的骆驼蓬等15科28种植物提取物对松材线虫的生物活性。骆驼蓬、黄文江鱼藤、紫花山毛豆、厚果鸡血藤、雷公藤、了哥王、博落回等7种植物甲醇索氏提取物杀线虫活性强烈,以1 000μg/mL处理后72 h,校正死亡率均在88%以上。乙醇是骆驼蓬杀线虫活性成分较合适的提取溶剂。浸渍法测定结果表明,骆驼蓬种子乙醇提取物的石油醚萃取物、氯仿萃取物、正丁醇萃取物和水萃取物对松材线虫毒杀活性顺序强弱依次为:正丁醇>氯仿>水>石油醚萃取物,其中正丁醇萃取物处理后24 h和48 h,LC50分别为33.98μg/mL和10.18μg/mL。松枝水培试验结果表明,骆驼蓬种子正丁醇萃取物能明显延缓松材线虫引致的松树萎蔫病的发展,以250μg/mL处理后12 d病情指数仅0.17,显著低于“清水+虫”处理的病情指数0.75。

骆驼蓬总生物碱提取物的质量标准研究

以骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱为指标,采用薄层色谱和高效液相色谱等方法对骆驼蓬总生物碱提取物进行定性和定量质量控制。薄层色谱中供试品在与对照品相同位置上显相同颜色斑点,其它各项检测结果(如水分、灰分、浸出物、重金属检查)均符合中国药典要求。骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱分别在2～200和0.8～320μg/ml浓度范围内线性关系良好,平均回收率为99.7%(RSD=1.89%)和100.7%(RSD=1.78%),日内及日间RSD小于2%。

骆驼蓬种子中总生物碱超声提取的初步研究

首次在骆鸵蓬植物中应用了超声技术。通过正交试验研究了骆驼蓬种子中生物碱的提取工艺参数并 以每50g种子中总生物碱量为指标,考察了乙醇浓度(A)、液料比(B)和超声时间(C)3个因素对骆驼蓬提取 工艺的影响。结果表明,最佳的提取工艺为A2B3C3,即用8倍量的80％的乙醇超声提取60 min。

骆驼蓬多糖提取工艺优化及抗氧化活性的测定

目的:确定骆驼蓬多糖的最佳提取条件及其抗氧化活性。方法:采用正交试验优化多糖提取工艺参数,苯酚-硫酸法测定多糖含量,邻苯三酚自氧化法测定骆驼蓬多糖的抗氧化活性。结果:骆驼蓬多糖提取的最佳工艺条件为:提取时间2h,提取温度95℃,料液比1∶25,提取次数2次。抗氧化活性测定表明,骆驼蓬多糖具有较好的抗氧化活性。结论:本实验可为骆驼蓬多糖的提取工艺及应用制定依据。

骆驼蓬中游离氨基酸的HPLC含量测定方法及超声提取工艺研究

目的 研究新疆骆驼蓬药材中游离氨基酸的高效液相含量测定方法,建立新疆骆驼蓬游离氨基酸的超声提取工艺。方法 采用日本岛津VP-ODS色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）,以0.10 mol/L乙酸铵溶液（pH6.5）-乙腈为流动相梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长254nm,柱温40℃,测定新疆骆驼蓬药材地上部分游离氨基酸的含量,并进行方法学考察。以骆驼蓬游离氨基酸含量之和为考察指标,采用L9（3^4）正交试验设计优选新疆骆驼蓬游离氨基酸超声提取工艺。结果 测定的12种氨基酸分别在其线性范围内且线性关系良好,精密度、重复性、稳定性、衍生化重复性均良好,RSD均〈2.0%,12种氨基酸的平均回收率为98%-102%。结合单因素和正交试验结果,超声提取法优选的工艺条件为：80%乙醇60倍量,超声功率400 Hz条件下下超声40 min。结论建立的HPLC测定游离氨基酸含量的方法准确可靠,优选的最佳提取工艺合理、可行、稳定。

β咔啉类生物碱通过FAK/PI3K/AKT/mTOR通路对人胃癌SGC-7901荷瘤小鼠的影响

目的:探讨新疆地道药材骆驼蓬提取物β咔啉类生物碱对人胃癌SGC-7901荷瘤小鼠移植瘤组织中FAK、PI3K、AKT、mTOR、BCL-2和Bax表达的影响。方法:构建小鼠移植瘤模型,50只昆明小鼠随机分为5组,分别为空白对照组、氟尿嘧啶组、β-咔啉类生物碱低、中、高剂量组,每组10只,计算抑瘤率,HE染色检测瘤组织病理学变化,采用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡,RT-PCR法检测FAK、PI3K、AKT、mTOR、BCL-2和Bax的mRNA表达,Westernblot和免疫组化法检测FAK、PI3K、AKT、mTOR、BCL-2和Bax蛋白表达。结果:β咔啉类生物碱中剂量和高剂量能抑制胃癌SGC-7901小鼠瘤体的生长,降低瘤重(P<0.01),其效果优于β咔啉类生物碱低剂量(P<0.05)。HE染色和TUNEL结果显示,β咔啉类生物碱处理后能破坏胃瘤细胞组织,诱导胃瘤细胞的凋亡。RT-PCR、Western blot和免疫组化法结果表明β咔啉类生物碱中剂量和高剂量能显著降低FAK、PI3K、AKT、mTOR和BCL-2蛋白表达(P<0.01),提高Bax蛋白的表达(P<0.01),其效果优于β咔啉类生物碱低剂量(P<0.05),差异具有统计学意义。结论:β咔啉类生物碱对胃癌的抑制作用与降低BCL-2、FAK、PI3K、AKT、mTOR蛋白表达,升高Bax蛋白表达相关,表明β咔啉类生物碱可能是一种潜在的胃癌的治疗药物。

骆驼蓬总RNA的4种提取方法比较

以骆驼蓬(Peganum harmala L.)为材料,采用植物总RNA提取试剂盒法(TIANGEN)、TRIZOL试剂盒法(TIANGEN)、SDS-异丙醇法、CTAB-LiCl法提取总RNA,比较4种方法提取总RNA的得率和纯度。结果表明:CTAB-LiCl法效果最好,电泳条带清晰,RNA完整性好,28S条带亮度约是18S的2倍,所提RNA的OD260/OD280的值在1.80～2.0之间。经RT-PCR获得了600bp大小的特异条带,说明利用改良的CTAB-LiCl法从骆驼蓬中提取到的RNA质量高、完整性好,完全适合于进一步的分子生物学研究。

牛心朴等荒漠植物对棉铃虫的生物活性

选择了牛心朴等 6种荒漠植物 ,利用其提取物对棉铃虫作了毒力和对生长和变态的影响等生物活性试验 ,结果表明 5%牛心朴和大骆驼蓬的提取物对棉铃虫有较强的毒力 ,棉铃虫幼虫死亡率分别为 1 0 0 %和 55% ;同时 ,这两种提取物对棉铃虫的变态也有显著影响 ,用 1 %的牛心朴和 5%的大骆驼蓬饲料饲喂棉铃虫 ,幼虫死亡率分别为 85%和 55% ,而羽化率为 0。用牛心朴的不同提取物饲料饲喂棉铃虫 ,结果发现 0 .5%牛心朴的酸性提取物和碱性提取物对棉铃虫的生长有显著影响。

中药骆驼蓬生物碱提取及抗包虫化学成份研究

骆驼蓬具有镇咳，抗风湿等作用，近年报道又有抗肿瘤、治疗包虫病的作用，为进一步阐明药物作用机理。提高药物的疗效，降低毒副作用，我们对该植物的种子用化学方法进行了生物碱提取、分离、并经ＭＰ测定、薄层层析、ＵＶ、ＩＲ、ＭＳ、ＮＭＲ光谱分析、分离、鉴别出了其中含量较高的两个单体：分别确定为骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱，并据测得的一些化学和光谱数据，初步推测出了此类抗包虫有效成份的化学结构。此为首次从该植物中分离、鉴别获得。此外，本文还附了我们用骆驼蓬治疗９例肝泡球蚴病（ＡｉｖｅｏｌａｒＥｃｈｉｎｏｃｏｃｃｏｓｉｓＡＥ）临床患者的随访结果。

骆驼蓬总生物碱中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱及其代谢产物大鼠体内药代动力学研究

目的研究骆驼蓬总生物碱中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱及其活性代谢产物骆驼蓬醇和骆驼蓬酚在大鼠体内的药代动力学特征。方法口服骆驼蓬总生物碱(140 mg/kg)及静脉注射骆驼蓬碱与去氢骆驼蓬碱的混合溶液(均为3.3 mg/kg),采集不同时间点的血浆,采用UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬醇、骆驼蓬酚的血药浓度,并计算药代动力学参数。结果灌胃和静脉给药后,在血浆中检测到骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬醇和骆驼蓬酚,但骆驼蓬酚的血药浓度在24 h时未下降而未能计算药动参数。静注给药后,骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬醇的t1/2e分别为2.554、3.116、1.899 h,MRT分别为1.700、1.311、1.880 h,AUC0-t为373.1、2033.0、8.914 ng·h/mL。口服总生物碱后骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬醇的Cmax分别为347.6、184.5、32.7 ng/mL,Tmax分别为3.200、1.150、0.300 h,t1/2e分别为6.994、5.625、21.912 h,MRT分别为8.588、9.791、27.780 h,AUC0-t为2 755.5、1 202.8、129.8 ng·h/mL。口服总生物碱后骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的绝对生物利用度分别为63.22%和4.96%。结论口服总生物碱后骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱均可迅速吸收并迅速代谢,骆驼蓬碱与去氢骆驼蓬碱相比较,具有更高的生物利用度,代谢产物骆驼蓬醇和骆驼蓬酚与原型骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱相比较,消除速率相对较慢。此外,静注给药后,体内去氢骆驼蓬碱的初始血药浓度明显高于骆驼蓬碱。

骆驼蓬种子中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的提取工艺研究

目的 :探讨骆驼蓬种子中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的提取工艺。方法 :采用第一煎先用一定 p H值的酸水 ,继以一定 p H值的碱水提取 ,以两种生物碱的提取率为指标 ,按正交试验设计 ,分别以荧光分光光度法和差示分光光度法定量 ,考察了 p H、浸泡时间和加热时间对提取率的影响。结果 :第一煎用 p H2或 p H4的酸水溶液浸泡40 min,煎 6 0 min,第二煎用 p H10的碱水溶液浸泡 2 0 min,煎 6 0 min。结论 :此法提取简便、经济 。

骆驼蓬籽脂肪油提取工艺的优选

目的优选出骆驼蓬籽脂肪油的提取工艺。方法采用均匀设计法,以出油率为指标,分别优化索氏提取法和超声-微波协同萃取法提取骆驼蓬籽脂肪油的工艺参数,并对2种方法的优选工艺进行横向比较,确定合适的提取方法与工艺参数。结果索氏提取工艺优选出的参数:以石油醚为提取溶剂,溶剂倍数为20倍,于80℃的水浴11 h,出油率为(30.10±0.36)%;超声-微波协同萃取法优选出的参数:萃取溶剂为正己烷,溶剂倍数为18倍,萃取温度为65℃,萃取时间为20 min,出油率为(12.80±0.26)%。横向比较结果表明索氏提取法比较适合骆驼蓬籽脂肪油的提取。结论优选出的索氏提取工艺稳定、合理、可行,可用于试验室提取骆驼蓬籽脂肪油。

骆驼蓬总生物碱提取物溶解性能表征方法的探讨

目的:考察骆驼蓬总生物碱提取物在不同溶剂中的溶解性能,并对中药提取物溶解性的评价方法进行探讨。方法:分别采用沉淀法、指标成分测定法及粒径测定法测定骆驼蓬总生物碱提取物的溶解性及其在不同溶剂中的粒径分布情况。结果:骆驼蓬总生物碱提取物及其指标性成分骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱在80%乙醇,95%乙醇及无水乙醇中均具有较好的溶解性,在60%乙醇中溶解性较差,在水中溶解性最差。骆驼蓬总生物碱提取物在不同溶剂中形成混悬液的粒径大小顺序为水>95%乙醇>无水乙醇>80%乙醇>60%乙醇。结论:骆驼蓬总生物碱提取物在80%以上的乙醇溶液中具有较好的溶解性。沉淀法和指标成分法测定结果具有一定的相关性;粒径测定法可提供提取物分散情况的信息;3种方法结合能较全面地反映中药提取物溶解性情况。