Pellet法和Micromass法诱导软骨终板干细胞成软骨的比较

[目的]比较Pellet法和Micromass法诱导软骨终板干细胞成软骨的能力。[方法]临床获取腰椎退变椎间盘软骨终板,采用琼脂糖筛选软骨终板干细胞后进行传代扩增,扩增后的软骨终板干细胞分别行Pellet和Micromass法进行成软骨诱导1～3周。分别于1～3周对诱导的软骨组织进行湿重和阿利新蓝密度比较,同时对诱导3周的软骨组织进行特殊染色,Ⅰ、AGG、Ⅱ型胶原免疫化学染色以及定量PCR检测软骨相关基因的比较。[结果]使用Mi-cromass法诱导软骨终板干细胞所形成的软骨组织在相应时间比Pellet法重量大(P<0.05)。阿利新蓝密度比较亦提示相应时间点Micromass法所诱导的软骨组织比Pellet法高(P<0.05)。特殊染色结果分析表明采用Micromass法所形成的软骨基质较多且均质;免疫组织化学法表明Micromass法所表达的Ⅱ型胶原、AGG较Pellet法多,而Ⅰ胶原则相反。实时定量PCR结果亦提示采用Micromass法诱导所形成的软骨组织中Ⅱ型胶原、AGG基因表达高(P<0.05),而Sox 9无明显区别(P>0.05)。[结论]采用Micromass法诱导软骨终板干细胞所形成的软骨基质更加丰富和均质,因此,Micromass法更适合对软骨终板干细胞进行成软骨相关机制及信号传导的研究。