Artificial induction of androgenetic diploid in Yellow catfish(Pelteobagrus fulvidraco)

Androgenesis was the especial zoogamy that the germ plasma of offspring was from the agnate. In this study the eggs of Yellow catfish （Pelteobagrus fulvidraco） were irradiated by UV suspending in the synthetic ovarian fluid （OF）, and the total dosage of UV irradiation was 220 mJ·cm^-2. Diploid could be induced by heat shock （40℃, 2 min, 3 min） with different time period after fertilization （15-37 min）. The result showed that heat shock with 2 min was better than 3 min; there were two apices of induction in 17-21 min and 27-31 min after fertilization. The highest hatching rate was 3.30% at 29 min after fertilization, and the difference between two apices of induction was unobvious.

冷、热休克法诱导黄颡鱼三倍体的比较研究

分别采用冷、热休克抑制第二极体释放的方法诱导黄颡鱼三倍体。结果表明,在卵受精后2min,5℃处理20min,胚胎时期的三倍体率达70%左右,孵化率50%左右,幼鱼时期三倍体(含嵌合体)的检出率为25%,此条件为冷休克处理的优化参数;在卵受精后2min,40℃处理2min,胚胎时期的三倍体诱导率达58%,孵化率为39%,幼鱼时期三倍体(含嵌合体)的检出率为40%,此条件为热休克处理的优化参数。正交分析得出,冷休克条件下起始休克时间是原肠期三倍化率和孵化率的重要影响因子,温度对畸形个体的产生有重要影响;热休克条件下,参考三倍体率、畸形率、孵化期相对存活率三者而言,休克温度均是重要因素。比较观察到冷休克处理组的胚胎受损情况严重,后期的成活率较热休克处理组要低,总体诱导效果逊于热休克处理组。

热休克诱导黄颡鱼三倍体的研究

以正交试验设计,采用热休克法研究了诱导三倍体黄颡鱼的适宜条件。试验结果表明,在卵受精后2 min,40℃持续处理2 min,三倍化率可达57.5%,原肠期相对存活率43.0%,孵化期相对存活率38.5%。分析了热休克处理的参数与三倍体出现率和胚胎相对存活率的关系,诱导参数中处理温度和诱导时机为重要因素,其次为持续时间。

人工诱导大鳞副泥鳅雄核发育二倍体克隆鱼的产生

首次获得人工诱导雄核发育二倍体大鳞副泥鳅克隆鱼。方法是:用紫外线210mJ/cm^2辐射浸泡在人工合成卵巢液中的泥鳅卵,使其染色体遗传失活,再与大鳞副泥鳅精子“受精”。在室温26℃条件下“受精”后15min开始,每隔2min一组,将“受精卵”置于39℃温水中热休克处理2min,以阻止第一次有丝分裂的发生,结果表明:二倍诱导率距“受精”后15～19min和27～29min出现两个高峰,最高二倍诱导率为61.1％,经染色体和形态特征鉴定表明,鱼苗为大鳞副泥鳅雄核发育二倍体克隆鱼,其染色体数(2n=48)和外部形态均与父本相同。