大鼠盆神经节内投射至膀胱VIP、SP及NOS阳性神经元的研究

用辣根过氧化物酶 (HRP)逆行追踪法与免疫组织化学、NADPH- d酶组织化学结合法 ,对大鼠盆神经节中支配膀胱的神经元进行了研究。结果显示 :在盆神经节中支配膀胱的神经细胞中存在 HRP- VIP,HRP- SP及 HRP- NOS双标细胞。提示膀胱功能的调节是多因素的 ,神经肽 (VIP,SP)和

大鼠盆神经节NOS和VIP阳性神经元对阴茎海绵体的支配

目的:研究大鼠盆神经节(MPG)中一氧化氮合酶(NOS)、血管活性肠肽(VIP)阳性神经元对阴茎海绵体的支配。方法:应用辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪技术结合免疫组织化学和酶组织化学双标技术,观察大鼠MPG中还原型辅酶Ⅱ(NADPH,NOS标志物)阳性和VIP阳性神经元对阴茎海绵体的支配。结果:HRP阳性标记神经元主要分布于MPG内靠近阴茎神经的区域。HRP阳性标记神经元中72%(210/292)为VIP免疫阳性,83%(268/323)为NADPH组化反应阳性。结论:大鼠盆神经节中NOS、VIP阳性神经元对阴茎海绵体有直接支配,NO和VIP作为神经递质或调质参与了阴茎勃起。

裸鼠肾被膜下阴茎海绵体组织和盆神经节移植的可行性

目的:基于组织异体移植技术,研究将正常SD(Sprague-Dawley)大鼠阴茎海绵体组织和盆神经节移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下的可行性。方法:无菌条件下获取SD大鼠阴茎组织和盆神经节,在手术显微镜下将上述组织移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下,分别于移植后1周和4周检测移植物的组织病理学变化及移植物内部细胞增殖情况。结果:移植1周后,移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下的阴茎海绵体组织与正常阴茎海绵体组织形态一致,在阴茎海绵体窦内充满血液;移植4周后,靠近肾的阴茎海绵体组织接近正常组织形态,而远离肾的阴茎海绵体组织表现为纤维化,仍可在阴茎海绵体窦观察到血液。盆神经节移植后1周,移植物内部组织结构与正常盆神经节相近,可见多个"细胞团"样结构存在,在靠近肾的部位有新生血管样结构形成;移植后4周,在远离肾的盆神经节组织内观察到血管存在,"细胞团"样结构仍较明显。此外,移植后4周,移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下的海绵体组织和盆神经节中可见ki67阳性的细胞存在,提示移植物内部分细胞仍存在增殖活性。结论:将正常SD大鼠阴茎海绵体组织和盆神经节移植到裸鼠肾被膜下后,至少可以存活4周,移植物内部组织结构与正常SD大鼠阴茎海绵体和盆神经节组织结构基本一致,可能与肾被膜下提供了移植物所需的局部微环境及移植物内部逐渐形成血液循环有关。

大鼠盆神经节支配膀胱的ChAT与NOS阳性神经元的分布

目的 研究观察大鼠盆神经节内支配膀胱的神经元的化学性质。方法 用辣根过氧化物酶逆行追踪与免疫组织化学、NADPH d酶组织化学方法结合法。结果 在大鼠神经节内支配膀胱的神经元中存在ChAT免疫阳性神经元、NOS阳性神经元以及ChAT与NOS双标记细胞。结论 结果表明膀胱功能的调节是复杂的、多因素的 。

成年大鼠盆神经节神经元的体外培养与鉴定

目的:探索成年大鼠盆神经节(MPG)神经元的体外培养、鉴定的实用方法。方法:分别利用植块培养法、分离细胞培养法对成年大鼠MPG神经元进行体外培养,应用免疫组化以神经微丝单克隆抗体(NF-200)对MPG神经元进行鉴定。结果:通过上述两种方法均能成功培养出生长状态良好的MPG神经元,细胞呈NF-200反应阳性。结论:本实验成功建立了成年大鼠MPG神经元的体外培养方法,可作为神经科学研究的重要手段。

盆神经节在前列腺炎导致排尿功能障碍中的作用及其机制

目的探讨盆神经节在前列腺炎导致排尿功能障碍中的作用及其机制。方法将22只雄性SD大鼠随机数字法分为两组:前列腺炎模型组(n=10)、对照组(n=12)。通过前列腺内注射1%无菌角叉菜胶溶液建立大鼠的前列腺炎模型,检测前列腺炎模型组和对照组的尿动力学指标的变化。利多卡因阻滞盆神经节后检测前列腺炎模型大鼠的尿动力学参数。采用膀胱壁内注射荧光金(FG)前列腺内注射快蓝(FB)行逆行神经追踪双标技术检测盆神经节内是否存在同时支配膀胱和前列腺的神经元。组间比较采用单因素方差分析。结果盆神经节切片内科观察到FG-FB双标神经元,证实盆神经节内存在同时支配膀胱和前列腺的神经元。大鼠的尿动力学结果显示,前列腺炎组阻滞前膀胱容量(1.01±0.03)ml大于正常组膀胱容量(1.00±0.02)ml及前列腺炎组阻滞后膀胱容量(1.00±0.02)ml,差异无统计学意义(F=0.318,P>0.05),前列腺炎组阻滞后大鼠排尿频率(12.6±0.13)次/小时低于前列腺炎组阻滞前大鼠排尿频率(24.55±2.14)次/小时,差异有统计学意义(F=502.622,P<0.05)。前列腺炎组阻滞后大鼠不稳定收缩次数(1.5±0.5)次/小时少于前列腺炎组阻滞前大鼠不稳定收缩次数(22.3±2.6)次/小时,差异有统计学意义(F=160.175,P<0.05)。结论前列腺内注射无菌角叉菜胶溶液可成功建立前列腺炎大鼠模型。盆神经节内存在同时支配膀胱和前列腺的神经元,盆神经节在前列腺炎导致的排尿功能障碍中起重要的调节作用。

过氧化氢诱导的大鼠盆腔神经节体外损伤模型的构建

目的探索成年大鼠盆腔神经节(MPG)体外损伤模型的构建方法,为盆腔神经损伤相关疾病的基础研究提供有效模型。方法选取8周成年SD大鼠,处死后获取MPG离体组织,以RPMI-1640培养基进行体外培养,1周后分别加入0、100、200、300、400、500μmol/L不同浓度过氧化氢(H_(2)O_(2)),诱导MPG氧化应激损伤。免疫组织化学法检测神经标志物表达、ELISA法检测神经营养因子水平,并进行外周神经丝生长长度的比较,确定合适的损伤诱导浓度。结果大鼠MPG离体培养3 d后,可见组织贴合,有神经丝样组织生长;神经丝蛋白标志物NF-H染色阳性,证实为神经组织。加入H_(2)O_(2)后,随着浓度增加,MPG组织形态出现不同程度破碎裂解,神经标志物S100β表达下调,神经丝生长长度受到抑制;同时,培养基脑源性神经营养因子及神经生长因子表达量逐渐下降。结论使用RPMI-1640培养基培养,并以200μmol/L H_(2)O_(2)诱导后,可以构建稳定的成年SD大鼠MPG体外损伤模型。