白蜡虫碱性磷酸酶功能基团的研究

白蜡虫Ericeruspela雌成虫经匀浆 ,正丁醇抽提 ,硫酸铵分段盐析 ,SephadexG 150凝胶过滤等步骤 ,得到比活力为 136 65U mg蛋白酶制品。用苯甲基磺酰氟、N 溴代琥珀酰亚胺、三硝基苯磺酸、二巯基苏糖醇、对氯汞苯甲酸、琥珀酸酐、溴乙酸、碘乙酸等化学修饰剂在一定条件下选择修饰白蜡虫碱性磷酸酶的几种氨基酸残基 ,并测定酶活力变化。结果表明 :苯甲基磺酰氟、N 溴代琥珀酰亚胺、三硝基苯磺酸、琥珀酸酐、二巯基苏糖醇的修饰能显著抑制酶的活力 ,活力的降低与修饰剂的浓度有关。氯汞苯甲酸、溴乙酸、碘乙酸的修饰对酶的抑制作用影响较小。初步认为 :丝氨酸、赖氨酸和色氨酸残基是白蜡虫碱性磷酸酶的必需功能基团 。

长毛对虾酸性磷酸酶功能基团的研究(Ⅱ)

用化学修饰剂pCMB、NBS、K试剂修饰长毛对虾Penaeuspenicilla－tusAlcock酸性磷酸酶（ACPase，EC3．1．3．2），在修饰剂作用下，酶活力明显下降，健康虾酶对修饰剂的敏感性（NBS除外）大都稍大于病虾酶。修饰酶的紫外280um吸收光谱以及荧光340um发射光谱的变化，表明酶活力下降的同时酶构象也产生相应的变化。结果表明，酶分子的半胱氨酸残基、色氨酸残基以及门冬氨酸、谷氨酸β或γ验基与酶活力有关，是酶的催化功能基团。

僧帽牡蛎碱性磷酸酶功能基团的研究

采用化学修饰法研究僧帽牡蛎碱性磷酸酶活性功能基团性质.酶经0.4mmol·L-1PCMB修饰30min后活力仍然保持不变,提示巯基与酶的活力无关;用二巯基苏糖醇(DTT)对酶进行修饰,当DTT浓度达到2.5mmol·L-1时,酶活力丧失98%,表明硫 硫键与酶活力有密切的关系;以N 溴代琥珀酰亚胺(NBS)修饰酶的色氨酸残基,酶的修饰失活呈一级反应,当NBS浓度达到0.65mmol·L-1时,酶活力丧失100%,并辅以紫外吸收光谱的变化分析,表明色氨酸残基是酶催化活力所必需的;醋酸酐、马来酸酐、甲醛等氨基试剂对酶的修饰作用显示氨基是酶的必需基团.

背角无齿蚌碱性磷酸酶的功能基团研究

在一定条件下分别采用PMSF、DTT、PCMB、NBS、TNBS、SUAN、BrAc及IBr等化学修饰剂选择修饰背角无齿蚌碱性磷酸酶的多种氨基酸残基，并测定其酶活力变化。结果表明，PMSF、NBS、TNBS、SUAN、DTT的修饰能显著抑制酶的活力，活力的降低与修饰剂的浓度相关。BrAc、IAc、PCMB的修饰不表现对酶的抑制作用。作者初步认为，Ser、Lys和Trp残基是背角无齿蚌碱性磷酸酶的必需功能基团，部分二硫键时保护酶的催化功能也是必需的。

中华蜜蜂工蜂碱性磷酸酶功能基团的研究

在一定条件下,分别采用二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)、N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)、苯甲基磺酰氟(PMSF)、溴乙酸(BrAc)、乙酰丙酮、巯基乙醇(ME)等化学修饰剂选择修饰中华蜜蜂碱性磷酸酶多种氨基酸残基,并测定其酶活力变化。结果表明,DTNB、PMSF的修饰不表现对酶的抑制作用,而NBS、BrAc、ME能显著抑制酶的活力,乙酰丙酮也能抑制酶的活力,但是不太明显。因此认为Trp、His是中华蜜蜂工蜂碱性磷酸酶的必需功能基团,部分二硫键对保护酶的催化功能也是必需的。

长毛对虾酸性磷酸酶功能基团的研究(Ⅰ)

采用某些化学修饰剂修饰长毛对虾（Penaeuspenicillatus）酸性磷酸酶的活性功能基团。结果表明，精氨酸残基、组氨酸残基、赖氨酸残基是酶活性功能基团，当酶活力下降时，伴随着紫外吸收光谱及荧光发射光谱的变化，显示酶活力与构系密切相关健康虾酶对修饰剂的敏感性大于病虾酶。

长毛对虾碱性磷酸酶性质

从长毛对虾内脏物分离提纯碱性磷酸酶，经快速蛋白液相色谱（ＦＰＩＣ）检验为单一蛋白纯．研究该酶的性质，酶的紫外吸收特征峰在２７８ｎｍ处，荧光激发峰在２８２ｎｍ处，发射光谱特征峰在３４０ｎｍ处．酶的分子量为８２０００道尔顿．酶水解ＰＮＰＰ的最适温度为４７℃、最适ｐＨ为８．２．在３７℃、ｐＨ８．３下，酶的Ｋｍ值为８．０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ．Ｍｇ２＋对该酶有激活作用，Ｃｕ２＋、Ｈｇ２＋甲醇、乙醇，乙二醇则表现抑制作用．Ｈｇ２＋的抑制作用表现为反竞争性类型，其抑制常数为９．０×１０－５ｍｏｌ／Ｌ．

长毛对虾碱性磷酸酶功能基团的研究

用对－氯汞苯甲酸修饰该酶分子中的巯基，酶活力不受影响，说明该酶不是“巯基酶”．用Ｎ溴代琥珀酰亚胺修饰酶后，活力完全丧失，修饰后的酶在２７５ｎｍ处的紫外吸收峰完全消失，３４０ｎｍ处荧光发射峰也逐渐下降至完全淬灭，说明色氨酸残基是酶活性必需基因之一．用甲醛、醋酸酐修饰氨基，溴代乙酸修饰咪唑基也可以使酶活力完全丧失，说明赖氨酸残基及组氨酸残基也是酶活性功能基因．用乙酰丙酮修饰精氨酸残基，酶活力下降了５０％，精氨酸残基可能与维系酶分子构象有关．

综合利用清平磷矿废料的一种简单可行的办法

介绍了综合利用高Ａｌ低Ｐ含量的清平磷矿废料的一种简单可行的办法．在焙烧清平磷矿废料的硫酸浸取液中加入硫酸铵，在酸性条件下，在常压及５℃的低温下，使铝铵钒（ＮＨ４Ａｌ（ＳＯ４）２·１２Ｈ２Ｏ）大量结晶，从而导致Ｐ和Ａｌ分离．到目前为止，Ａｌ２Ｏ３的总浸取率在８０％以上，其回收率在９０％以上．最后，从残余Ｆｅ３＋、Ａｌ３＋和部分ＳＯ２－４被除去的滤液中，通过石灰水分步中和、沉淀，能得到合格的饲料磷酸氢钙和磷肥．