中国对虾肝胰腺细小病毒的纯化与鉴定

于1991年9月－1993年底，利用在青岛市沙子口对虾养殖场采集的中国对虾病虾肝胰腺样品，采用一种改进的酒石酸钾－甘油密度梯度离心法，对原先称之为肝胰腺细小样病毒的一种对虾病毒进行纯化，通过电子显微镜观察、提取病毒核酸用不同核酸酶处理并结合电泳等方法，对病毒的基本生物物理和生物化学特性作鉴定。结果表明，用酒石酸钾－甘油密度梯度离心法，可获得良好的病毒纯化效果：纯化后的病毒颗粒显示正二十面体立体对称的特征，颗粒直径为233－29.8nm，平均26．3nm，在CsCl中的平均浮力密度为1．360g/cm3；空的衣壳直径为22－24nm，平均23.2nm；病毒基因组为分子长度相当于4．3kbp的单链DNA，病毒具有4种结构多肽，分子量分别为86．1kdal，58．2kdal，40．gkdal和39.8kdal。从而证明，该病毒的确是一种细小病毒。

养殖中国对虾肝胰脏细小病毒病的免疫金银染色法诊断研究

80年代以来 ,肝胰脏细小病毒病在养殖中国对虾中广泛流行并造成了一定的损失。作者采用免疫金银染色 (immunogold silver staining,IGSS)技术 ,对患病对虾肝胰脏中的细小病毒(Hepatopancreatic parvovirus,HPV)进行了免疫组织化学的研究。结果表明 ,经 IGSS染色的病虾肝胰脏上皮细胞核内出现了黑色的、圆形或椭圆形、大小为 3～ 15μm的结构。由于该结构与 H- E染色切片上出现的肝胰脏细小病毒包涵体在发生部位、形态和大小上皆一致 ,故而认为该结构为HPV包涵体。证明 ,免疫金银染色法是一种可应用于中国对虾肝胰脏细小病毒病诊断的有效方法。