气道上皮中pendrin蛋白的研究进展

Pendrin蛋白也称为可溶性转运家族26A4（solute carrier familly26A4，SLC26A4），是SLC26A家族成员之一，SLC26A是一组阴离子转运蛋白，包括presin（存在于内耳的蛋白），先天性高氯性腹泻（congenitalchloridediarrhea）者缺乏此类蛋白。由于pendrin蛋白与其他硫转运因子具有同源性，故以往认为它是一硫酸盐转运子，后来的研究证实主要是一种碘／氯转运子，以一个完整的膜蛋白形式存在，

Pendrin蛋白与支气管哮喘

Pendrin蛋白是可溶性转运家族26A（SLC26A）中的一员,SLC26A是一个阴离子交换转运体家族,包含SAT-1、DTDST、DRA/CLD及prestin等多个可转运各种阴离子的成员。该蛋白在体内分布广泛,主要功能为转运氯离子、碘离子、碳酸氢根等多种单价或二价离子,从而维持组织中离子的稳态。

高碘状态下胎盘细胞中绒毛膜促性腺激素对钠碘同向转运体和pendrin的调节作用

目的:探讨在高碘状态下胎盘细胞中绒毛膜促性腺激素(chorionic gonadotropin,HCG)对钠碘转运体(sodium iodide symporter,NIS)和pendrin的调节作用。方法:将人早孕胎盘绒毛滋养细胞株(HPT-8)于DMEM培养基中培养。分别设置高碘组(5000μg/L、500μg/L)和对照组,高碘(5000μg/L、500μg/L)+HCG(0.5 U/ml、5 U/ml)组。对照组和高碘组细胞培养48 h,高碘+HCG组在高碘培养24 h后加入HCG继续培养24 h,各组分别提取RNA,使用实时荧光定量PCR检测NIS mRNA和pendrin mRNA的表达量。结果:5000μg/L高碘组和500μg/L高碘组的NIS mRNA和pendrin mRNA表达量高于对照组(P<0.01);5000μg/L高碘状态下,0.5 U/ml与5 U/ml HCG组的NIS mRNA和pendrin mRNA表达量均显著低于未加入HCG组(P<0.05);高碘和HCG对NIS mRNA和pendrin mRNA的表达不产生交互作用(R^(2)=0.836,F=0.087,P=0.776;R^(2)=0.325,F=2.970,P=0.123)。结论:高碘状态下HCG可降低胎盘细胞的摄碘能力。

气道上皮中pendrin的研究进展

Pendrin是一种电中性的离子交换转运蛋白,在气道上皮中主要表达于上皮细胞膜的顶端,负责氯离子(Cl^(-))的重吸收并交换碳酸氢根(HCO_(3)^(-))或硫氰酸根(SCN^(-))至管腔液,主要参与调节气道表面液体层(airway surface liquid,ASL)的酸碱度和厚度、黏蛋白分泌及气道防御过程,对于维持气道表面微环境的稳态具有重要意义。在支气管哮喘中,pendrin的表达明显上调,与支气管哮喘的重要病理过程如气道高反应性、中性粒细胞浸润和黏蛋白分泌增加密切相关。抑制pendrin的功能可能是支气管哮喘治疗的新靶点。

pendrin在慢性鼻-鼻窦炎黏膜中的表达及其与黏蛋白5AC表达的相关性

目的探讨pendrin在慢性鼻-鼻窦炎（CRS）中的表达及与黏蛋白5AC（MUC5AC）的相关性。方法取伴或无息肉的CRS患者上颌窦窦口黏膜各30例分别作为伴息肉CRS组和无息肉CRS组、另取10例单纯性上颌窦囊肿患者的上颌窦口前壁近钩突部位的黏膜作为对照组，采用HE染色观察各组鼻窦黏膜的组织形态学改变，糖原过碘酸雪夫染色（PAS染色）检测各组鼻窦黏膜中总黏蛋白的表达情况，免疫组织化学方法、实时荧光定量PCR法和免疫印迹法检测各组鼻窦黏膜中pendrin和MUC5AC的表达情况。结果在伴息肉CRS组和无息肉CRS组鼻窦黏膜中均可观察到黏膜增厚，杯状细胞增生，上皮纤毛部分缺失，腺体增生，炎性细胞浸润；pendrin蛋白主要表达于鼻窦黏膜上皮细胞的顶膜，其次为黏膜下腺体细胞；MUC5AC主要表达于鼻窦黏膜上皮的杯状细胞和假复层纤毛柱状细胞，少量表达于黏膜下腺体细胞。伴息肉CRS组和无息肉CRS组鼻窦黏膜中总黏蛋白、pendrin蛋白、MUC5AC阳性表达率（86．7％和80．0％比20．0％、73．3％和70．0％比10．0％、83．3％和76．7％比20．0％）、pendrin的mRNA及蛋白的相对表达水平（1．685±0．111和1．537±0．262比1．012±0．167及2．066±0．188、1．996±0．153比1．000±0．169）、MUC5AC的mRNA相对表达水平（1．861±0．718、1．562±0．428比1．004±0．094）均显著高于对照组（均P〈0．05）。pendrinmRNA的表达水平与MUC5ACmRNA表达水平呈正相关（r=0．670，P=0．006和r=0．713，P=0．003）。结论在CRS黏膜中表达上调的pendrin与MUC5AC的表达增加有一定关联，前者可能是CRS中黏液高分泌的重要因子。

不同碘水平时促甲状腺激素、人绒毛膜促性腺激素、雌二醇对胎盘绒毛滋养层细胞pendrinmRNA表达的影响

目的观察不同碘营养水平时促甲状腺激素（TSH）、人绒毛膜促性腺激素（HCG）、雌二醇（E2）对体外培养人早孕胎盘绒毛滋养细胞（HPT-8）pendrinmRNA表达，即摄碘能力的影响。方法采用细胞培养的方法，体外培养HPT-8细胞。取对数生长期细胞接种于六孔培养板，待细胞贴壁后按照加入培养液的含碘量不同（0、5、50、500、5000μg／L）分为低碘1组、低碘2组、适碘组、高碘1组、高碘2组。培养24h后，每组细胞再以原来的碘水平，在5种条件下进行培养：单纯碘、碘＋TSH（0．01mg／L）、碘＋HCG（5000U／L）、碘＋E2（O．1mg／L）和碘＋HCG（5000U／L）＋TSH（0．01mg／L）＋E2（0．1mg／L）。继续培养24h后，提取细胞总RNA，反转录合成cDNA，通过实时荧光定量PCR方法检测HPT-8细胞pendfinmRNA表达水平。结果在不同碘营养水平，单纯加碘、碘＋鸭H、碘＋E2、碘＋HCG＋TSH＋E2时HPT一8细胞pendrinmRNA表达组间比较差异有统计学意义（F值分别为8．43、9．91、30．37、7．34，P均〈0．01）。其中单纯加碘时，低碘1组（1．00±0．11）pendrinmRNA表达显著低于适碘组（1．37±0．19，P〈0．01），低碘2组（1．67±0．25）高于适碘组（P〈0．05）；碘＋E2时，高碘2组（13．37±6．48）pendrinmRNA表达显著高于适碘组（1．95±0．61，P〈0．01）；碘＋HCG＋TSH＋E2时，低碘2组（2．26±1．32）pendfinmRNA表达显著高于适碘组（1．06±0．33，P〈0．01）。在相同碘营养水平时，低碘1组、适碘组、高碘1组、高碘2组pendfinmRNA表达组内比较差异有统计学意义（F值分别为10．98、11．59、6．70、33．06，P均〈0．01）。其中在高碘1组，碘＋HCG＋TSH＋E2（1．10±0．26）pendfinmRNA表达低于单纯加碘（1．494-0．41，P〈0．05）；在高碘2组，碘＋E2（13．37±6．48）pendfinmRNA表达显著高于单纯加碘（1．33±0．28，P〈0．01）。结论轻度碘缺乏条件下，H胛-8细胞处于代偿状态，pendfinmRNA表达增加，摄碘能力增强，重度碘缺乏条件下，H胛-8细胞处于失代偿状态，pendfinmRNA表达下降，摄碘能力下降。HCG和偈H对HPT-8细胞摄碘能力调控的意义不大，E2在重度高碘时，HPr-8细胞pendfinmRNA表达明显增加，摄碘能力增强最为明显。三种激素共同作用时，在轻度碘缺乏时上调HPT一8细胞摄碘能力，轻度碘过量时下调HPT-8细胞摄碘能力。

不同碘水平时胰岛素样生长因子Ⅰ和转化生长因子β1对胎盘绒毛滋养层细胞钠碘转运体及pendrin mRNA表达的影响

目的观察不同碘营养水平时胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）和转化生长因子β1（TGF-β1）对胎盘绒毛滋养层细胞（HPT-8）钠碘转运体（NIS）及pendfinmRNA表达的影响。方法体外培养HPT-8细胞，取对数生长期细胞接种于细胞培养瓶，待细胞贴壁后根据加入培养液的不同碘含量（0、5、50、500、5000μg／L）分为低碘1组、低碘2组、对照组、高碘1组和高碘2组。培养24h后，每组细胞再以原来的碘水平，分别加入IGF-Ⅰ（0．050mg／L）、TGF-β1（0．001mg／L），即碘＋IGF-Ⅰ和碘＋TGF-β1。继续培养24h后，提取细胞总RNA，反转录合成cDNA，采用实时荧光定量PCR方法检测HPT-8细胞NIS及pendrinmRNA的表达。结果HPT-8细胞NISmRNA的表达：在不同碘水平，单纯加碘时NISmRNA表达组间比较差异有统计学意义（F=3．612，P〈0．01）。其中低碘1组（0．44±0．21）NISmRNA表达显著低于对照组（1．25±0．77，P〈0．01）。在相同碘水平时，低碘1组、高碘1组NISmRNA表达组内比较差异有统计学意义（F值分别为13．632、6．900，P均〈0．01）。其中在低碘1组，碘＋IGF-Ⅰ（1．13±0．38）和碘＋TGF-β1（0．81±0．34）NISmRNA表达高于单纯加碘（0．44±0．21，P〈0．01或〈0．05）；在高碘1组，碘＋TGF-β1（0．62±0．30）NISmRNA表达显著低于单纯加碘（1．23±0．91，P〈0．01）。HPT-8细胞pendrinmRNA的表达：在不同碘水平，单纯加碘时pendrinmRNA表达组间比较差异有统计学意义（F=12．717，P〈0．01）。其中低碘1组（0．59±0．15）pendrinmRNA表达显著低于对照组（1．03±0．14，P〈0．01），高碘1组（1．29±0．31）高于对照组（P〈0．05）。在相同碘水平时，低碘1组、低碘2组、对照组、高碘1组pendrinmRNA表达组内比较差异有统计学意义（F值分别为12．588、4．588、8．679、8．445，P均〈0．01）。其中在低碘1组、低碘2组和对照组，碘＋IGF-Ⅰ（1．68±0．82、1．51±0．79、1．50±0：51）pendrinmRNA表达均高于单纯加碘（0．59±0．15、0．89±0．22、1．03±0．14，P均〈0．01）；在高碘1组，碘＋TGF-β1（0．78±0．20）pendrinmRNA表达显著低于单纯加碘（1．29±0．31，P〈0．01）。结论在碘缺乏情况下，HPT-8细胞NIS、pendrinmRNA表达下降，摄碘能力下降；在轻度碘过量时，HPT-8细胞pendrinmRNA表达增加，摄碘能力增强。细胞因子IGF-Ⅰ及TGF-β1对于HW-8细胞的碘转运能力均有一定的调节作用，即碘缺乏时增加碘的摄人，在碘过量时减少碘的摄入。

结节性甲状腺肿组织中Pendrin基因及蛋白表达的研究

目的研究结节性甲状腺肿中Pendrin基因（SLC26A4）及蛋白的表达，探讨其与结节性甲状腺肿的关系。方法选取手术切除的结节性甲状腺肿40例（结节组），对应的正常甲状腺组织40例（对照组）．采用实时荧光定量聚合酶链反应法（realtime polymerase chain reaction，RT—PCR）检测2组SLC26A4基因表达．蛋白免疫印迹技术（western blot）及免疫组织化学方法检测2组Pendrin蛋白的表达及分布情况。结果结节组SLC26A4基因mRNA的水平较对照组mRNA的水平表达增高，差异具有统计学意义（t=2．663，P=0．011）；Pendrin蛋白在结节组水平高于对照组（t=2．286，P=0．026）。结节组Pendrin蛋白阳性表达24例（60％），对照组阳性表达14例（35％），差异有统计学意义（X2=5．013，P=O．025）。结节组中Pendrin蛋白主要在细胞质中．对照组则主要在细胞膜上。结论结节组中SLC26A4 mRNA及其编码Pendrin蛋白表达增强，且大部分蛋白表达分布在细胞质内，提示发生结节性甲状腺肿时，甲状腺碘转运的功能存在一定程度的损害。

microRNA-33a靶向pendrin调控支气管哮喘气道黏液高分泌

目的:探讨microRNA-33a(miR-33a)在哮喘患儿及哮喘小鼠中的表达及其对气道黏液高分泌的作用。方法:RT-PCR检测哮喘患儿和健康儿童诱导痰,以及卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的哮喘小鼠和正常小鼠肺组织中miR-33a的表达;分别鼻滴miR-33a模拟物(miR-33a mimics)及其对照(mimics NC)至哮喘小鼠,ELISA检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)上清中IL-13、TNF-α及黏蛋白MUC5AC的表达,RTPCR和western blot检测小鼠肺组织MUC5AC和pendrin(SLC26A4)的表达;双荧光素酶报告法验证miRNA-33a的靶基因。结果:哮喘患儿诱导痰及哮喘小鼠BALF中miR-33a表达显著降低(P<0.05);哮喘小鼠BALF中嗜酸性粒细胞(Eosnophils,EOS)数目显著增加,IL-13、TNF-α和MUC5AC表达显著升高(P<0.05);miR-33a mimics滴入导致EOS数目减少,IL-13、TNF-α和MUC5AC表达显著降低(P<0.05),同时小鼠肺组织MUC5AC和pendrin显著下调(P<0.05);miR-33a mimics明显抑制pendrin(SLC26A4)野生型报告基因的荧光素酶活性(P<0.05);pendrin(SLC26A4)过表达显著上调miR-33a mimics转染细胞中MUC5AC的表达(P<0.05)。结论:miR-33a通过靶向pendrin抑制黏蛋白MUC5AC的表达,抑制支气管哮喘气道黏液高分泌。

碘转运体与甲状腺疾病

目的探讨3种碘转运体的表达与甲状腺疾病的关系。方法采用文献回顾的方法对钠碘同向转运体(Na+/I-symporter,NIS)、pendrin和人类顶膜碘转运体(human apical iodide transporter,hAIT)在各种甲状腺疾病的表达及临床相关性加以综述。结果在正常甲状腺组织中,NIS表达于滤泡细胞基底质膜及侧质膜,pendrin及hAIT表达于滤泡细胞顶膜上。对于NIS的研究表明,在甲状腺癌组织中,NIS表达降低或是定位于胞浆;NIS基因突变是导致先天性甲状腺功能减退症的原因之一。pendrin的表达水平与滤泡功能相关:在Graves病和高功能腺瘤中,pendrin高表达,在甲状腺癌中其表达显著降低;在体外实验中其表达与甲状腺癌细胞系分化程度的相关性各文献报道不一。hAIT蛋白表达在高功能甲状腺组织中与正常组织差异不大,而在低功能甲状腺腺瘤中,其表达仅轻度降低或正常;在甲状腺癌中,其表达显著降低。结论3种碘转运体表达异常与甲状腺疾病密切相关,但是其致病机理尚不完全清楚,引起3种碘转运体表达异常的原因也有待进一步研究。

幽门螺杆菌感染对十二指肠黏膜上皮细胞碳酸氢盐转运蛋白表达的影响

目的探究幽门螺杆菌(HP)感染对小鼠十二指肠上皮细胞碳酸氢盐转运蛋白表达的影响。方法 C57小鼠随机分为四组,三组分别给予HP菌株SS1、NCTC11637、NCTC11639感染,一组仅给予同等量的磷酸盐缓冲液(PBS)灌胃(对照组),2 w后收集组织。体外培养十二指肠上皮细胞,与HP菌株共培养,其中对照组给予等量PBS干预,收集细胞。应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹检测组织及细胞中碳酸氢盐转运蛋白表达的影响。结果 HP感染小鼠后,由吉姆萨染色镜检见,感染后可见大量紫蓝色小体,呈逗点状、短棒状;细胞实验:HP菌株NCTC11637与十二指肠上皮细胞共培养后应用RT-PCR扩增HP16srRNA,小鼠及细胞实验均目的基因为单一扩增,扩增良好。小鼠及细胞实验均3种HP菌种囊性纤维跨膜传导调节因子(CFTR)、离子交换体(SLC)26A3及SLC26A6感染2 w后,碳酸氢盐转运蛋白mRNA及蛋白表达显著低于对照组(P<0.05)。结论从体内到体外,HP可通过调控碳酸氢盐转运蛋白含量来干预疾病的进展。

先天性耳聋-甲状腺肿综合征一例报告及文献复习

先天性耳聋-甲状腺肿综合征又称Pendred综合征(PDS),是一种罕见疾病,是以甲状腺肿大、感音神经性耳聋为主要特征的常染色体隐性遗传病。致病基因位于染色体7q,基因变异导致pendrin(潘特林)蛋白功能障碍,进而引起相应症状。本文结合相关文献指出了PDS的病因、临床表现及诊断要点,说明了当前研究进展及治疗方法,使临床医师对该病的认识进一步加强。

Pendred综合征的临床表型与遗传学机制

耳聋-甲状腺肿综合征（Pendred综合征）是一种以感觉神经性耳聋、甲状腺肿及部分碘有机化障碍为特征的常染色体隐性遗传疾病,缘于编码pendrin的SLC26A4基因突变.Pendrin主要在甲状腺、内耳及肾脏内表达.在甲状腺内,pendrin分布于调节碘外排的甲状腺滤泡细胞游离缘膜.SLC26A4基因突变导致部分碘有机化障碍或许与滤泡腔内的碘离子减少有关.在肾脏内,pendrin则作为氯/碳酸氢盐泵以维持体内酸碱平衡.在内耳,pendrin参与阴离子转运及维持蜗内电位稳定.随着对pendrin研究的不断深入,其在甲状腺激素合成、肾脏内氯离子重吸收及内淋巴组成等方面的作用逐渐被人们所知晓.