青霉素G阴离子态的稳定性影响因素研究

采用化学动力学的方法 ,研究了温度、缓冲液 pH对青霉素G阴离子态的稳定性的影响 ,线性回归得到青霉素G阴离子态时降解速率常数 ,验证了青霉素在水溶液中的降解反应服从一级动力学模型lnC/C0 =-kt ;非线性拟合求得logk与T、pH之间的二级多项式模型 ,并利用MATLAB6.1作图 ,得到关于pH、温度 (T)、降解速率常数 (logK)的等高线图。研究表明 ,青霉素G阴离子态在 pH6～ 7时比较稳定 ,在pH7左右时稳定性受T的影响最小 ;

粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的分离纯化及酶学性质

采用DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Butyl-Sepharose CL 4B疏水层析，从重组大肠杆菌DH5α菌体中分离纯化得到粪产碱杆菌青霉素G酰化酶（AfPGA）。经纯化，AfPGA纯度较粗酶提高50．6倍、比活达到212．7U／mg，经HPLC测定纯度为92．8％，收率为78％。理化性质分析表明：AfPGA含有2个亚基（α亚基和β亚基，其Mw分别为2．90×10^4和5．92×10^4；AfPGA等电点约为7．9～8．0，最适pH约为10．0，并在pH〉7．0时表现出了稳定的催化活力。