红花钓钟柳中新型糖基转移酶的筛选与鉴定

苯乙醇苷类化合物因具有抗氧化、抗肿瘤等生理活性在食品、医药等领域备受关注。糖基转移酶作为生物催化剂可用于各种糖苷产物的制备。为丰富苯乙醇苷类化合物的糖苷多样性,在红花钓钟柳转录组中筛选糖基转移酶候选基因并进行功能鉴定。该研究基于不同植物组织中基因差异表达分析筛选到7条候选基因,将其克隆到pET-MBP表达载体上,并导入大肠杆菌Escherichia.coli Transetta(DE3)异源表达后利用体外酶促反应进行其生物催化活性研究。获得一个新型糖基转移酶UGT712A2,可以催化桂叶苷B C4-OH的葡萄糖基化反应生成新的苯乙醇苷类化合物桂叶苷B-4-葡萄糖苷。同时,UGT712A2也可以催化毛蕊花糖苷、芦丁、胡黄连苷Ⅱ、7-去甲基软木花椒素等化合物的糖基化,具有一定的底物宽泛性。因此,UGT712A2可能是一种潜在的酶工具,用于苯乙醇苷类化合物和其他多种新型糖苷产物的制备,从而发现新的糖苷化合物应用于食品、医药领域。

红花钓钟柳的组织培养及离体快速繁殖

以红花钓钟柳无菌苗茎尖（1~2cm）为外植体,通过丛芽诱导、增殖和生根建立离体繁殖体系.结果表明：茎尖在MS＋1.0mg/L 6-BA＋0.05mg/L NAA培养基中培养30d,不定芽诱导率达100%,繁殖系数达9.8;不定芽继代培养30d,1~4代平均繁殖系数达6.0,丛芽长势良好;不定芽在1/2MS＋0.2mg/L IBA＋0.2mg/L NAA培养基中培养20d,生根率达100%,根系发达,试管苗生长健壮;105株试管苗移栽到土壤营养钵中,15d成活96株,存活率达91.42%.