辣椒籽可溶性蛋白和游离氨基酸组成分析

以圆株1号、羊角椒、湘辣595、辣丰63、辣丰红、陈特辣、湘艳、皱皮椒等8个品种的辣椒籽为原料,分析其可溶性蛋白和游离氨基酸的组成、含量及相关性,探讨其呈味氨基酸的含量及味道强度值。结果表明:8个品种辣椒籽中均以清蛋白含量(94.19~134.19 mg/g)最高,醇溶蛋白含量(0.46~5.91 mg/g)最低;辣椒籽中均检出24种游离氨基酸,总含量为12.22~27.51 mg/g,包括9种必需氨基酸(3.94~6.32 mg/g)、2种半必需氨基酸(1.13~2.71 mg/g)和13种非必需氨基酸(7.15~19.52 mg/g);天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酰胺、苏氨酸等的含量均维持在较高水平;对呈味氨基酸味道强度值进行分析,发现圆株1号、湘辣595、辣丰63、辣丰红、陈特辣和皱皮椒等辣椒籽的主要呈味氨基酸均为甜味氨基酸,而羊角椒和湘艳的呈味氨基酸则以鲜味氨基酸为主;游离氨基酸聚类分析表明,皱皮椒与陈特辣、湘艳聚为1类,辣丰红与湘艳595、辣丰63聚为1类,羊角椒与圆珠1号聚为1类;相关性分析表明,精氨酸与蛋氨酸,瓜氨酸分别与羟脯氨酸和缬氨酸,苏氨酸、丝氨酸和谷氨酰胺两两间,异亮氨酸、酪氨酸和亮氨酸两两间等9组氨基酸含量间均呈极显著正相关,有23组氨基酸含量间呈显著正相关,有3组氨基酸含量间呈显著负相关,大多数氨基酸含量间的相关系数绝对值大于0.3,表明各氨基酸间的相关性较强。

响应面法优化酶解花椒籽蛋白制备降血压肽工艺

利用响应面法优化酶解花椒籽蛋白制备降血压肽的工艺条件。采用不同蛋白酶水解花椒籽蛋白,以酶解物对血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制率为指标,筛选出制备花椒籽蛋白降血压肽的最佳蛋白酶。在单因素试验基础上,根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,考察酶解时间、加酶量、酶解温度和p H值对血管紧张素转换酶抑制率的影响。结果表明:回归模型能较好地反映各因素水平与响应值之间的关系,并获得酶解花椒籽蛋白制备降血压肽的最佳工艺条件为:底物质量浓度3 g/100 m L、酶解时间4.9 h、加酶量10 200 U/g、酶解温度37.4℃、p H 6.9,在此条件下,所得酶解产物的ACE抑制率为68.00%。

辣椒F1杂种遗传纯度的种子蛋白、同工酶与RAPD鉴定

采用SDS -PAGE电泳技术对辣椒F1杂种 0 2 - 16及其亲本种子蛋白进行分析 ,杂种纯度为 96 0 % ;苗期真叶POD同工酶电泳也可明显区分假杂种 ,纯度检测结果为 96 7%。研究了Mg2 + 、dNTPs浓度对扩增结果的影响 ,建立起适合辣椒的RAPD PCR体系 ;从 91个引物中筛选出父母本有差异的引物 3个 ,利用引物N5对F1纯度进行初步鉴定 ,检测结果为 95 5 %。 3种方法检测与田间小区鉴定结果 96 2 %基本一致 ,表明这 3种方法可作为辣椒F1杂种 0 2 - 16纯度快速鉴定的有效手段。RAPD分析还揭示了辣椒栽培种内遗传多样性较低。

花椒籽蛋白降血压肽的分离纯化

为了获得高活性、高纯度的花椒籽蛋白降血压肽,本试验采用SephadexG-25凝胶层析对酶解液进行分离纯化,并用Tricine-SDS-PAGE测定其分子量。结果表明,最佳分离条件为:以超纯水为洗脱溶液,洗脱流速为0.6mL·min-1,上样量为2.0mL,样品浓度为30mg·mL-1。在此条件下可收集得到4个组分,其中洗脱峰Ⅱ有较高的ACE抑制效果,IC50为0.021mg·mL-1,该组分的分子量在3000Da以下。本研究为新型降血压药物或者保健食品的研发提供了一定的科学依据。

花椒籽蛋白降血压肽的加工适应性研究

在利用花椒籽蛋白制备得到降血压肽基础上,进一步研究花椒籽蛋白降血压肽的加工特性。将花椒籽蛋白酶解液经过截留相对分子质量为5 k Da的超滤膜进行纯化,测定不同相对分子质量的氨基酸组成,研究截留液组分的理化性质以及经胃肠道消化后对其ACE抑制率的影响。结果表明：花椒籽蛋白酶解液经超滤之后透过液的ACE抑制活性提高,达到78.76%;各组分氨基酸组成较齐全,其中谷氨酸含量最高;截留液在较宽的p H（2.0~10.0）范围内溶解性良好;有较高的吸油性;在p H 2.0~10.0范围内,起泡性呈先降低后升高的趋势,但泡沫稳定性正相反;乳化性随着p H的升高而增大,但乳化稳定性先降低后升高;热处理（60~95℃）、光照、p H和糖类对其ACE抑制率影响较小。此外,花椒籽蛋白降血压肽经胃肠道蛋白酶消化后,ACE抑制活性基本不变,具有抗消化性。

色素辣椒种子可溶性糖及可溶性蛋白含量的测定分析

以常规方法对9个辣椒品种(品系)种子中的可溶性糖和可溶性蛋白含量进行测定和比较分析,结果表明,辣椒种子中可溶性糖含量较高,不同品种间差异较大;可溶性蛋白含量亦较高,不同类别材料间差异较大,同类别品种差异不大。

台湾甜椒种子中辣椒轻斑驳病毒检测及其致病型鉴定

利用双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和基因序列分析法对一批台湾进境的辣椒种子进行病毒检测及致病型鉴定,同时使用特征序列扩增区域(SCAR)标记引物利用PCR方法对该辣椒品种进行L抗性基因检测。DAS-ELISA及RT-PCR结果表明,从该批种子中检测到辣椒轻斑驳病毒(Peppe rmild mottle virus,PM MoV)。PCR产物测序分析表明,该序列为PM MoV的外壳蛋白(CP)基因,与已报道的PM MoV序列同源性为92.4%～99.8%。CP蛋白氨基酸序列分析表明,该分离物(命名为TW分离物)属于PM MoV的P1,2,3致病型。抗性基因检测表明,该辣椒品种携带有L3抗性基因。TW分离物能够系统侵染该辣椒品种,意味着该分离物已经克服L3基因介导的抗性。本研究报道的PM MoV的P1,2,3致病型在中国大陆尚属首次,这对于抗病辣椒品种的选育具有重要的指导意义。

电泳分析在辣椒杂种纯度检验中的应用

通过对辣椒种子贮存蛋白进行电泳分析,发现不同类型的辣椒在其种子贮存蛋白质水平上存在差异,并且这种差异在其交配种中可以表达出来。运用辣椒的这种特性可以在室内对辣椒交配种进行纯度检验,其结果与大田表现相吻合。

8个品种辣椒籽成分分析与比较

对8个不同品种(定州新一代辣椒、朝天椒、益都椒、四平头辣椒、红安6号线椒、红龙13号金塔椒、新疆甜椒、印度TEJA辣椒)辣椒籽的主要成分、营养成分和抗氧化物质进行分析,为辣椒籽高值化的综合利用提供基础数据。结果表明,辣椒籽主要含有膳食纤维、蛋白质和脂肪,质量分数分别为40.10%~51.27%、17.30%~19.83%和11.53%~16.70%;辣椒籽中还含有16种氨基酸(15.16%~18.64%)、9种矿物质元素,其中钾含量达到7 790~11 566.67 mg/kg;不饱和脂肪酸占辣椒籽脂肪酸80%以上,其中亚油酸质量分数为7.04%~9.72%,占总脂肪酸72.20%~74.26%;VE、VC、酚类、黄酮等抗氧化物质含量分别为1.27~8.01、0.24~2.36 mg/100 g、11.43~20.22 mg GAE/g、2.36~12.58 mg RE/g,辣椒碱类物质含量为0.07~5.21 mg/100 g。其中,新疆甜椒籽膳食纤维和VE含量最高,益都辣椒籽蛋白质、油脂和黄酮含量最高,印度TEJA辣椒籽具有较高的总酚和辣椒碱类物质。

等电聚焦种子蛋白电泳方法检测蔬菜杂种纯度

利用等电聚焦聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，分析了大白菜、甘兰、绿菜花、甜椒中８个常用杂交种及其亲本（共２４份材料）的种子水溶蛋白电泳图谱。结果表明，等电聚焦电泳技术分辨率高，电泳条带多而且细，各材料蛋白谱带都在２０条左右，信息量大，利于进行深入细致的分析。８个杂交品种（Ｆ１）与其亲本间蛋白电泳图谱都有明显区别，并以此做为检验纯度的依据，进一步建立了这８个杂交种的纯度检验技术，同时在田间进行了验证性测定，二者鉴定结果相符，证明了本方法的可靠性。