大鼠PER2基因RNAi慢病毒载体的构建及干扰效率的测定

目的构建及筛选有效干扰大鼠血管平滑肌细胞PER2基因的shRNA慢病毒载体,并测定其干扰效率。方法设计大鼠PER2的siRNA靶序列,插入慢病毒载体质粒pGLV-U6-EGFP中,构建pLentivirus-per2-rat表达重组体并转染至A7r5大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞内,利用Real-time PCR方法检测PER2基因的mRNA表达水平,筛选有效沉默钟基因PER2表达的RNAi慢病毒载体。结果经电泳、基因测序证实插入的目的序列正确,有PER2表达,成功构建了pLentivirus-per2-rat表达重组体;转染慢病毒载体pLentivirus-per2-rat至A7r5大鼠胸血管平滑肌细胞,测定转染效率达70%;Real-time PCR检测PER2基因的mRNA相对表达量,筛选出有效干扰大鼠血管平滑肌细胞钟基因Per2表达的siRNA片段,使PER2mRNA表达量下调约84%。结论成功构建了大鼠PER2的RNAi慢病毒载体,为进一步研究时钟基因的功能奠定了基础。

per2基因参与边缘系统昼夜节律的研究进展

各种生物体生理、生化和行为过程都呈现一定的昼夜节律变化,并受到生物钟的调控。per2基因是重要的生物钟基因之一,主要分布在下丘脑的视交叉上核以及中央杏仁核、终纹床核、海马等边缘系统结构,通过参与该系统昼夜节律的调节对情绪和内脏活动产生影响。中枢per2基因的节律性通过对光信号、类固醇激素及其他相关递质的整合调节下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴,作用于周围靶器官呈现昼夜节律性运动。本文对per2的形态学和生物学及其参与边缘系统对情绪、内脏活动昼夜节律调节机理做一概述。

湖南地区汉族人群Per2基因多态性与睡眠癫痫的相关性研究

目的探讨Per2C111G基因多态性与中国湖南地区汉族人群睡眠癫痫的关系。方法选取湖南地区汉族癫痫患者300例及健康对照组100例,癫痫患者按好发时间分为觉醒癫痫组、不定期癫痫组、睡眠癫痫组。采用聚合酶链反应(PCR)和基因测序方法检测Per2基因C111G位点的多态性。结果湖南地区汉族人群中,Per2基因C111G多态位点的基因型频率分别为:CC型87.0%、CG型13.0%、GG型0.0%,等位基因C和G频率分别为93.5%和6.5%。癫痫组和对照组间基因型及等位基因型频率差异无统计学意义(P>0.05)。3个癫痫亚组间基因型及等位基因型频率差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论 Per2基因C111G位点多态性可能与湖南地区汉族人群睡眠癫痫无关。

PER2基因组织表达及多态性与绵羊季节性繁殖的相关性研究

为探究PER2基因在绵羊繁殖相关组织中的表达水平及其多态性与绵羊繁殖性状的关系,本实验通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测PER2基因在季节性发情的苏尼特羊和常年发情的小尾寒羊松果体、下丘脑、垂体、卵巢、输卵管以及子宫组织中的表达情况,同时利用Sequenom MassARRAY■SNP技术检测季节性发情绵羊品种(草原型藏羊、苏尼特羊、滩羊共204只)和常年发情绵羊品种(小尾寒羊、湖羊、策勒黑羊共564只)PER2基因g.2852655T>C位点的多态性。结果表明:PER2基因在绵羊的松果体、下丘脑、垂体、卵巢、输卵管以及子宫组织中均有表达,且在季节性繁殖的苏尼特羊卵巢和子宫组织中的表达均显著高于常年发情小尾寒羊(P<0.05),而在输卵管组织中则相反(P<0.05);分型结果表明,PER2基因的g.2852655T>C位点存在3种基因型,该位点的基因型频率和等位基因频率在发情性状不同的绵羊品种之间具有显著差异。综上,PER2基因在季节性发情苏尼特羊卵巢组织中的表达量显著高于常年发情小尾寒羊,初步推测卵巢中较高水平PER2基因的表达通过抑制LHR受体的表达及孕酮的分泌,进而影响绵羊的季节性发情,且较高水平PER2基因表达可能在卵子受精和胚胎发育过程中也起到重要调控作用。

Per1与Per2基因在胆管癌中的表达

目的分析人类生物钟基因Per1与Per2在人类胆管癌中的表达,研究其表达与人类胆管癌的关系。方法获取人原发胆管癌标本58份,另取距离肿瘤边缘2 cm外组织作为正常对照。采用免疫组织化学方法检测人原发胆管癌标本与正常对照组织中Per1与Per2基因蛋白产物(Per1、Per2蛋白)的表达。结果 58份人原发胆管癌标本与正常对照组织中均见Per1与Per2蛋白表达,但胆管癌标本中Per1与Per2蛋白的表达较正常对照组织明显下降(P<0.05)。结论生物钟基因Per1与Per2蛋白可能与人类胆管癌的发生及发展有关。

生物钟基因Per2对Ang Ⅱ诱导血管平滑肌细胞表型转换的影响及机制

目的 探讨生物钟基因Per2对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)表型转换的影响及机制。方法 常规培养VSMC,并将其随机分为Control A组、siRNA组、Per2 siRNA组,分别给予常规培养、转染空载siRNA、转染Per2 siRNA(沉默Per2);将VSMC随机分为Control B组、pcDNA组、pcDNA-Per2组,分别给予常规培养、转染空载pcDNA、转染pcDNA-Per2(Per2过表达)。用Western blotting法检测各组Per2蛋白表达以确认转染效率。选择部分VSMC随机分为Control C组、Ang Ⅱ组、Ang Ⅱ+Per2 siRNA组,分别给予常规培养、1×10^(-7)mol/L Ang Ⅱ处理48 h、先转染Per2 siRNA后再加入1×10^(-7)mol/L Ang Ⅱ处理48 h;另选部分细胞随机分为Control D组、Ang Ⅱ组、Ang Ⅱ+Per2 siRNA组,分别给予常规培养、1×10^(-7)mol/L Ang Ⅱ处理48 h、先转染pcDNA-Per2后再加入1×10^(-7)mol/L Ang Ⅱ处理48 h。用Western blotting法检测VSMC内表型转换相关蛋白[α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、骨桥蛋白(OPN)]及自噬相关蛋白[p62、微管相关蛋白1轻链3(LC3)]表达。结果 Per2 siRNA组Per2蛋白相对表达量低于Control B组、siRNA组(P均<0.05),pcDNA-Per2组Per2蛋白相对表达量高于Control组、pcDNA组(P均<0.05),均转染成功。与Control C组比较,Ang Ⅱ组α-SMA、p62蛋白相对表达量低,OPN、LC3蛋白相对表达量高,比较差异有统计学意义(P均<0.05);与Ang Ⅱ组比较,Ang Ⅱ+Per2 siRNA组α-SMA、p62蛋白相对表达量高,OPN、LC3蛋白相对表达量低,比较差异有统计学意义(P均<0.05)。与Control D组比较,Ang Ⅱ组α-SMA、p62蛋白相对表达量低,OPN、LC3蛋白相对表达量高,比较差异有统计学意义(P均<0.05);与Ang Ⅱ组比较,Ang Ⅱ+Per2 siRNA组α-SMA、p62蛋白相对表达量低,OPN、LC3蛋白相对表达量高,比较差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 生物钟基因Per2可能通过激活细胞自噬参与Ang Ⅱ诱导的VSMC表型转换。

节律基因Period2对肿瘤细胞生长及放射敏感性的影响

目的探讨Period2(Per2)基因对细胞生长及放射敏感性的影响。方法体外培养C6神经胶质瘤细胞(C6g liom a ce lls),使用脂质体包裹法将Per2表达质粒(pcDNA3.1-Per2)转导入C6细胞内;以免疫组化及流式细胞术检测Per2表达;通过流式细胞术和克隆形成试验检测稳定转染Per2阳性表达的C6细胞在正常情况下和γ射线照射后的凋亡、生长。结果未经γ射线照射的Per2阳性表达的C6细胞较对照组细胞增殖减慢、凋亡率增加,但γ射线照射后的较对照组细胞增殖速度快、凋亡率减少。结论节律基因Per2过表达会增加肿瘤细胞的凋亡,但在射线照射情况下会降低肿瘤细胞对射线的敏感性。

近日节律基因Period2对紫外线损伤NIH3T3细胞的影响

目的探讨Period2(Per2)基因对紫外线损伤NIH3T3细胞的影响。方法将Per2基因插入pcDNA3.1,构建Per2基因的真核表达质粒,采用脂质体包裹法转导入NIH3T3细胞内。以紫外灯照射Per2基因过表达(pcDNA3.1-Per2)的NIH3T3细胞、pcDNA3.1空白组(pcDNA3.1-vector)细胞和空白对照组细胞;通过流式细胞术和克隆形成试验检测稳定转染Per2阳性表达的NIH3T3细胞的凋亡、生长情况;采用单细胞凝胶电泳技术检测Per2过表达对DNA损伤后修复的影响。结果紫外线照射后Per2阳性表达的NIH3T3细胞较其对照组细胞增殖速度快、凋亡率减少,单细胞凝胶电泳实验表明紫外线照射后,各组细胞均表现出明显的DNA损伤,但是pcDNA3.1-Per2转染组均较pcDNA3.1-vector及空白对照组细胞的彗星细胞出现率和拖尾细胞DNA迁移长度低。结论节律基因Per2能抑制紫外线对细胞的损伤,其机制可能与Per2促进DNA修复作用有关。

per1,per2 3′UTR双荧光素酶报告基因重组质粒的构建

构建了包含目的片段小鼠节律基因per1,per2 3′UTR全长的重组质粒,为初步分析转录后可能调控per1,per2基因的miRNAs提供了有效手段。用反转录试剂盒将从小鼠肝脏组织提取的RNA反转录得到cDNA,以获得的cDNA为模板PCR扩增per1,per2 3′UTR全长,经回收纯化、酶切后将目的片段定向克隆到PGL3-promoter质粒上,再经转化扩增挑取克隆进行菌落PCR,对获得的阳性克隆进行酶切鉴定并测序。PCR产物鉴定结果表明,目的片段per1,per2 3′UTR序列扩增成功;菌落PCR及单酶切鉴定结果表明,per1,per2 3′UTR已插入PGL3-promoter载体中;测序结果表明,per1,per2 3′UTR插入序列,插入方向正确。per1,per2 3′UTR双荧光素酶报告基因重组质粒的成功构建为进一步研究节律基因转录后的调控机制奠定了基础。

Exendin-4改善Aβ31-35所致小鼠海马HT22神经细胞Per2节律基因/蛋白异常表达

目的探讨Exendin-4对β淀粉样蛋白31-35(Aβ31-35)所致HT22细胞Per2节律基因/蛋白表达的影响及机制。方法 HT22细胞分为Aβ31-35处理组(0,2.5,5.0,10.0μmol/L),Exendin-4单独处理组,Exendin-4预处理组,Exendin-4+Exendin(9-39)预处理组,Exendin-4+Exendin(9-39)处理组,Exendin(9-39)单独处理组,以完全培养基培养的细胞为对照组。光镜下观察HT22细胞形态,MTT法检测细胞存活率,实时荧光定量PCR检测Per2基因的表达,免疫荧光染色观察GLP-1R及PER2蛋白表达。结果 5,10μmol/L Aβ31-35处理后,细胞存活率较对照组显著降低(P<0.05)。Exendin-4预处理后,5μmol/L Aβ31-35引起的细胞形态结构的改变明显改善,细胞存活率显著提高(P<0.05)。Exendin-4预处理后,Per2基因/蛋白表达在CT(circadian time)16时较Aβ31-35处理显著提高(P<0.05);Exendin-4+Exendin(9-39)处理后,GLP-1R表达在CT16时较Exendin-4处理显著降低(P<0.05)。Exendin-4+Exendin(9-39)预处理后,CT16时PER2蛋白荧光强度较Exendin-4预处理显著降低(P<0.05)。结论Exendin-4可能通过上调GLP-1R,改善Aβ31-35所致HT22细胞Per2节律基因/蛋白异常表达。

钟基因Per2和肿瘤相关钟控基因在金黄地鼠口腔颊黏膜癌变不同阶段的昼夜节律改变

目的探讨钟基因Per2和钟控基因血管内皮生长因子(VEGF)、Ki67、c-Myc和P53在颊黏膜癌变不同阶段的昼夜节律变化规律以及与癌变发生发展的关系。方法 90只叙利亚金黄地鼠置于12 h光照和12 h黑暗交替环境中饲养,用二甲基苯并蒽(DMBA)涂抹颊黏膜建立金黄地鼠颊癌模型,分别在DMBA涂抹前,涂抹6周和14周后的24 h内的6个不同时间点处死动物,获取正常颊黏膜、癌前病变和癌症3个不同阶段昼夜6个不同时间的组织。经病理学检查确认后,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各时间点Per2、VEGF、Ki67、c-Myc和P53 m RNA的相对表达量,并行余弦分析,以中值、振幅和峰值位相时为指标反映各基因表达的昼夜节律特征。结果 Per2、VEGF、P53和c-Myc m RNA在癌变3个阶段的表达均具有昼夜节律性(P<0.05),而Ki67 m RNA仅在正常黏膜和癌前病变阶段的表达具有昼夜节律性(P<0.05)。Per2和P53 m RNA表达的中值随着癌症的发展而降低(P<0.05),VEGF、c-Myc和Ki67 m RNA表达的中值随着癌症的发展而上升(P<0.05);P53 m RNA的振幅随着癌症的发展而降低(P<0.05),Per2、VEGF、Ki67和c-Myc m RNA的振幅在癌前病变和癌症阶段均高于正常组(P<0.05);在癌前病变阶段,Per2、VEGF和c-Myc m RNA的峰值位相时较正常组提前,而Ki67和P53 m RNA的峰值位相时较正常组滞后。结论随着癌症的发生和发展,钟基因Per2和肿瘤相关钟控基因VEGF、Ki67、c-Myc、P53表达的昼夜节律特征发生明显改变。

Per2基因可增强人宫颈癌对射线的敏感性

目的:评价Period2(Per2)基因转染后过表达对人宫颈癌细胞(Hela)X射线放射敏感性的影响。方法:采用脂质体介导方法将Per2基因转染至Hela细胞,以空白组及空载体质粒pcDNA3.1(+)为对照,采用Wsetern Blot检测Per2基因在Hela细胞中的表达,给予X射线单次照射后,流式细胞仪检测细胞凋亡,采用细胞集落形成实验检测细胞增殖情况。结果:X射线照射后,与转染空载体质粒组及空白组比较,转染Per2基因Hela细胞凋亡率增加,细胞克隆形成减少。结论:节律基因Per2过表达使X射线照射的人宫颈癌Hela细胞凋亡增加,细胞增殖减弱,明显增强了HeLa细胞对放射损伤的敏感性。

胰高血糖素样肽-1受体在β淀粉样蛋白31-35对HT22神经细胞节律基因per2影响中的作用

目的探讨胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)在β淀粉样蛋白(Aβ)31-35影响HT22神经细胞节律基因per2表达中的作用。方法以小鼠海马HT22神经细胞为研究对象。四甲基偶氮唑盐(MTT)细胞毒性实验检测细胞存活率的变化;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测不同CT时间per2基因的变化趋势;免疫荧光染色观察CT16时GLP-1R及PER2蛋白的原位表达情况。结果 (1)分别使用0、1、5μmol/L的Aβ31-35处理细胞,结果发现:1μmol/L Aβ31-35处理组细胞存活率与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);5μmol/L Aβ31-35处理组细胞存活率与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。(2)经1μmol/L Aβ31-35处理后,per2基因表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);经5μmol/L Aβ31-35处理后,per2基因表达在CT16时与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。(3)在CT16时,经5μmol/L Aβ31-35处理后,GLP-1R的表达与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。(4)在CT16时,经10μmol/L Exendin(9-39)处理后PER2蛋白的荧光强度与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Aβ31-35可能通过降低GLP-1R表达导致小鼠海马HT22神经细胞per2节律基因异常表达。

新生大鼠脑损伤后松果体Clock mRNA、Per2 mRNA表达和血浆褪黑素水平变化

目的比较缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型组与对照组的新生大鼠松果体中Clock mRNA和Per2 mNRA表达与血浆褪黑素(MLT)的变化。方法7日龄新生Sprague-Dawley大鼠,随机分为2组(每组36只)。HIBD模型组按改良Levine法建立。用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和放免技术分别测定并比较缺氧缺血后0、2、12、24、36、48h松果体中Clock mRNA和Per2 mRNA的相对表达量和血浆MLT水平。结果HIBD组和对照组Clock mRNA表达量差异均无统计学意义(P>0.05);Per2mRNA的表达在HIBD后24h开始下降,在36h和48h显著低于对照组(P<0.01);HIBD导致外周血MLT水平12h开始下降,24h降至谷底,48h恢复。结论钟基因Clock mRNA和下降的Per2mRNA表达以及血浆MLT可能在缺氧缺血性脑损伤的发生发展中起重要的作用。

非小细胞肺癌中Per2的表达及其与预后的关系

目的:研究生物钟基因Per2在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与预后的关系。方法:采用免疫组织化学染色法检测60例NSCLC组织和20例正常肺组织中Per2的表达,结合临床病理和随访资料进行分析。结果:在NSCLC组织和正常肺组织中Per2的阳性表达率分别为71.7%(43/60)和95.0%(19/20),差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC中Per2的表达缺失与分化程度及TMN分期相关(P<0.05),单因素分析结果表明Per2的表达状态与NSCLC的预后相关(P<0.05),多因素分析结果显示分化程度、TNM分期、淋巴结转移情况及Per2的表达状态均非影响NSCLC预后的独立危险因素(P>0.05)。结论:Per2在NSCLC中表达降低,其阴性表达在NSCLC的发生和发展中起重要作用,影响NSCLC的预后。

Per2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的研究生物钟基因Per2在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及意义。方法采用免疫组化法检测60例非小细胞肺癌组织和20例正常肺组织中Per2的表达,分析Per2的表达与非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系。结果在非小细胞肺癌和正常肺组织中,Per2蛋白的阳性表达率分别为71.7%和95.0%(P<0.05)。非小细胞肺癌中Per2的表达缺失与非小细胞肺癌分化程度及TMN分期相关(P<0.05)。结论在非小细胞肺癌中Per2蛋白表达降低,对非小细胞肺癌的发生、发展起到重要作用。

Per2和cyclin D1在非小细胞肺癌中的表达

目的研究生物钟基因Per2和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在非小细胞肺癌中的表达,探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学染色法检测60例非小细胞肺癌组织和20例正常肺组织中Per2和cyclin D1的表达并分析其表达与临床病理特征的关系。结果在非小细胞肺癌和正常肺组织中Per2的阳性表达率分别为71.7%和95.0%(P<0.05),而cyclin D1的阳性表达率分别为63.3%和15.0%(P<0.01)。非小细胞肺癌中Per2的表达缺失与分化程度及TMN分期相关(P<0.05),而cy-clin D1的阳性表达和TNM分期及淋巴结转移相关(P<0.05)。结论 Per2在非小细胞肺癌中表达降低,而cyclin D1则呈高表达,两者可以作为判断非小细胞肺癌发生、发展和预后的指标。

下调微小RNA-3917对肺腺癌A549细胞增殖及PER2表达的影响

目的探讨微小RNA-3917(miR-3917)对肺癌细胞增殖及对生物钟基因Period2(PER2)表达的影响。方法取复苏后的肺腺癌A549细胞培养至对数生长期,采用脂质体法向A549细胞转染10、20、50 nmol/L靶向miR-3917的siRNA表达载体p EGFP-miR-3917-siRNA质粒,转染48 h后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达;根据实验设计分为对照组、空载体组和干扰组,空载体组及干扰组的质粒浓度均为50 nmol/L,采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测转染48 h后的miR-3917相对表达量,QPCR和Western blotting分别检测转染48 h后的PER2 mRNA和蛋白水平,采用CCK-8法检测各组转染24、48、72 h的A549细胞增殖抑制率,双荧光素酶靶标实验验证miR-3917与PER2的相互关系。结果 QPCR检测发现对照组、空载体组和干扰组的miR-3917相对表达量依次为1.007±0.018、1.068±0.084和0.171±0.052,干扰组的miR-3917相对表达量低于对照组和空载体组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组、空载体组和干扰组的PER2 mRNA相对表达量依次为1.060±0.129、1.086±0.229和2.920±0.927,蛋白表达量依次为0.204±0.046、0.183±0.043和0.512±0.117,干扰组的PER2mRNA和蛋白水平均高于对照组和空载体组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组和空载体组比较,干扰组的A549细胞增殖能力下降,转染24、48、72 h后的增殖抑制率依次为(34.192±5.268)%、(33.527±6.603)%和(30.591±7.788)%,均高于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-3917可显著抑制野生型PER2-3’UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性,而对突变型PER2-3’UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性并无影响。结论下调miR-3917可抑制肺癌细胞增殖并升高PER2水平,miR-3917对PER2有靶向调控作用,可作为肺癌防治的新靶点。

糖尿病心肌损伤与酪蛋白激酶CK1ε参与调控的时钟基因Per2的关系

目的探索糖尿病心肌损伤与时钟基因Per2的关系及具体机制。方法清洁级健康成年雄性SD大鼠50只,随机分为非糖尿病(NDM)组20只和糖尿病(DM)组30只,其中NDM组分为ZT23(NDM+A)亚组、ZT11(NDM+P)亚组,DM组分为ZT23(DM+A)亚组、ZT11(DM+P)亚组、ZT23时酪蛋白激酶CK1ε抑制剂PF-670462干预(DM+PF)亚组,所有亚组均为10只。同时建立昼夜节律模型,交替给予大鼠12 h光照/12 h黑暗周期环境。苏木素伊红(HE)染色观察心肌组织形态学变化;免疫组织化学法分析心肌组织的病理形态学改变及时钟基因Per2的表达情况;实时定量PCR法检测CK1ε、Per2在基因水平上的表达情况;Western blot法检测CK1ε、Per2在蛋白水平上的表达情况;组间比较采用单因素方差分析法及t检验法进行统计学分析。结果与NDM+A亚组相比,DM+A亚组CK1ε、Per2在mRNA水平和蛋白水平上表达均增高(t=2.84、3.96,P<0.05;t=4.00、5.33,P<0.05);与NDM+P组相比,DM+P组CK1ε在mRNA和蛋白水平上表达增高(t=6.04、3.41,P<0.05),Per2在mRNA水平上表达降低(t=3.90,P<0.05),在蛋白水平上表达增高(0.715±0.111比0.998±0.162,t=2.55,P<0.05);与NDM+A组相比,NDM+P组Per2在mRNA水平上表达增高(t=5.35,P<0.05),在蛋白水平上表达降低(1.105±0.173比0.715±0.111,t=3.54,P<0.05);与DM+A亚组相比,DM+P亚组Per2在mRNA和蛋白水平上表达均降低(t=3.24、4.32,P<0.05),PF-670462干预亚组心肌CK1ε、Per2蛋白表达水平均降低(t=2.92、4.11,P<0.05);HE染色显示,NDM组心肌纤维排列整齐未见明显异常,DM组心肌排列紊乱,间质水肿并伴有炎性细胞浸润,提示DM各亚组心肌伴有损伤改变;免疫组化结果提示,与NDM各亚组相比,DM各亚组时钟基因Per2在心肌呈强阳性表达。结论糖尿病病理状态下心肌损伤的发生可能与时钟基因Per2昼夜表达节律异常有关,其机制可能与病理状态引起CK1ε信号上调相关。

生物钟基因Per2在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的研究生物钟基因Per2在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色法检测60例NSCLC组织和20例正常肺组织中Per2蛋白的表达，分析其表达与NSCLC临床病理特征的关系。结果NSCLC和正常肺组织中Per2蛋白的阳性表达率分别为71．7％（43／60）和95．0％（19／20），差异有统计学意义（P〈0．05）。Per2表达与NSCLC分化程度和TMN分期相关（P〈0．05）。结论Per2在NSCLC组织中表达降低，Per2在NSCLC的发生和发展中起重要作用。