孕妇牙周病中牙龈卟啉单胞菌和血清炎性因子与早产低体重儿的关系

目的探讨孕妇牙周病中牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)检出情况、血清炎性因子与早产低体重(PLBW)的关系。方法通过严格筛查分别选取分娩出早产低体重儿的产妇(PLBW组)和正常分娩的产妇各30例(对照组),对其牙周状况进行检查,记录菌斑指数(PI)、出血指数(BI)、探诊深度(PD)及临床附着丧失水平(CAL),并采集产妇龈下菌斑、静脉血和脐带血,采用16SrRNAPCR法检测菌斑中P.gingivalis,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和前列腺素E(2PGE2)水平。结果PLBW组牙周状况较差,P.gingivalis在PLBW组和对照组中检出率分别为56.7%和30.0%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。牙周病变程度、P.gingivalis检出率与胎儿孕周和出生体重均呈弱负相关(P<0.05)。PLBW组静脉血和脐带血中IL-1β、IL-6、PGE2水平均较对照组高;PLBW组内患有牙周病者静脉血中IL-1β、PGE2含量高于牙周健康者(P<0.01)。结论孕妇牙周感染可能是导致早产低体重儿的原因之一。

牙龈卟啉单胞菌对人滋养层细胞增殖及凋亡的影响

目的:检测牙龈卟啉单胞菌感染对人胎盘滋养层细胞(HTR-8细胞)增殖以及凋亡的影响。方法:用不同感染复数(MOI)的牙龈卟啉单胞菌体标准菌ATCC 33277体外感染HTR-8细胞,未感染牙龈卟啉单胞菌的HTR-8细胞作为空白对照组。感染后,用Cell Counting Kit(cck-8)检测HTR-8细胞增殖情况,用线粒体膜电位凋亡检测试剂(JC-1)检测HTR-8细胞凋亡情况。结果:MOI=10组,感染72h内,HTR-8细胞增殖未受抑制(P>0.05)。而MOI=100组和MOI=200组,感染24h开始,HTR-8细胞增殖受到明显抑制(P<0.01)。并且与MOI=100组相比,MOI=200组在感染48h(P<0.05)和72h(P<0.01)时,HTR-8细胞增殖明显降低。牙龈卟啉单胞菌感染24h,MOI=200组HTR-8细胞凋亡率显著高于空白对照组(P<0.01)。感染48h,MOI=100组HTR-8细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01)。MOI=10组在感染24h和48h时细胞凋亡率与空白对照组相比差异无统计学意义。结论:在体外感染模型中,牙龈卟啉单胞菌标准菌ATCC 33277感染可抑制滋养层细胞增殖,且促进其凋亡。提示早产低体重儿与牙龈卟啉单胞菌感染引起滋养层细胞增殖和凋亡失衡有关。

牙龈卟啉单胞菌对大鼠胎盘及仔鼠出生体重的影响

目的:研究牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)感染对大鼠胎盘组织Fas、Fas配体(Fas ligand,FasL)、Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)2、TLR4表达水平及对新生仔鼠出生体重的影响。方法:将大鼠随机分为P.gingivalis感染组、阴性对照组和空白对照组,每组13只。采用尾静脉注射法建立P.gingivalis感染的孕鼠模型。记录各组新生仔鼠的出生体重和窝重并收集各组孕鼠在孕18d的胎盘。采用免疫组织化学法和Western blot法检测各组胎盘Fas、FasL、TLR2和TLR4表达情况。结果:P.gingivalis感染组与阴性对照组相比,其新生仔鼠出生体重显著减轻;孕鼠胎盘组织中TLR4、Fas、FasL的表达显著增强,TLR2无明显变化。结论:在P.gingivalis感染的孕鼠模型中,P.gingivalis感染可引起新生仔鼠较低出生体重,还可引起胎盘组织TLR4、Fas、FasL表达增强。提示罹患牙周病的孕妇娩出低体重儿,可能与P.gingivalis引起的胎盘组织TLR4、Fas、FasL的异常调节有关。

p-Akt对牙龈卟啉单胞菌诱导的人胚胎滋养层细胞凋亡的影响

目的:探讨牙龈卟啉单胞菌对胚胎滋养层细胞的影响及p-Akt在此过程中的作用。方法:牙龈卟啉单胞菌ATCC33277(Porphyromonas gingivalis)以感染复数(MOI)为200∶1与人胚胎滋养层细胞(HTR-8)共培养,以单纯培养人胚胎滋养层细胞为对照组;采用siRNA失活PI3K;选择倒置显微镜和共聚焦显微镜记录人胚胎滋养层细胞的形态变化;采用流式细胞术检测感染后人胚胎滋养层细胞凋亡的情况;用Real Time-PCR检测PI3K siRNA敲低的效果。结果:牙龈卟啉单胞菌感染人胚胎滋养层细胞12h时,细胞的凋亡率与正常组相比无统计学意义;感染24h时,细胞凋亡明显增多(P<0.01);感染48h时,细胞凋亡与对照组相比更为明显(P<0.001)。siRNA预先处理HTR-8细胞再与牙龈卟啉单胞菌共培养48h后,siRNA处理组的PI3K mRNA的相对量明显低于干扰组(P<0.01);同时,细胞凋亡率>45%,明显高于单纯感染牙龈卟啉单胞菌组(P<0.01),而干扰组的细胞凋亡率与单纯刺激组相比无统计学差异。结论:牙龈卟啉单胞菌能够诱导胚胎滋养层细胞发生凋亡。在此过程中,p-Akt被激活,并对凋亡有一定的抑制作用。提示,牙周炎促使早产低体重儿的娩出与牙龈卟啉单胞菌诱导胚胎滋养层细胞凋亡有关。