绿原酸对高游离脂肪酸处理犊牛肝细胞胆固醇和胆汁酸代谢的影响

【目的】探究绿原酸(CGA)对高游离脂肪酸(FFA)处理的犊牛肝细胞胆固醇和胆汁酸代谢的影响。【方法】采用两步胶原酶灌注法分离犊牛原代肝细胞,利用免疫荧光鉴定细胞后将其分为4组,对照组细胞用含2%BSA的RPMI-1640培养基培养;FFA组细胞在含2%BSA的RPMI-1640培养基中添加1.2 mmol/L FFA后培养;CGA组细胞在含2%BSA的RPMI-1640培养基中添加20μg/mL CGA后培养;CGA+FFA组细胞在含2%BSA的RPMI-1640培养基中添加1.2 mmol/L FFA和20μg/mL CGA后培养。培养12 h后收集细胞,通过试剂盒检测细胞中甘油三酯(TAG)和总胆固醇(TC)含量;利用实时荧光定量PCR、Western blotting分别检测肝细胞中胆固醇合成相关因子甾醇调节元件结合转录因子2(SREBF2)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR),胆固醇外排相关因子乙酰辅酶A乙酰转移酶2(ACAT2)、ATP结合盒亚家族A成员1(ABCA1)、ATP结合盒亚家族G成员5(ABCG5)以及胆汁酸代谢相关因子胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)、胆固醇12α-羟化酶(CYP8B1)、胆固醇27α-羟化酶(CYP27A1)、法尼醇X受体(FXR)、成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)等因子的mRNA和蛋白表达水平。【结果】犊牛肝细胞经过不同处理后,与对照组相比,FFA组犊牛肝细胞中TC含量极显著降低(P<0.01),TAG含量极显著升高(P<0.01),HMGCR、ABCA1、ABCG5、ABCG8、APOA1、ACAT1、NPC1L1、FXR、FGFR4基因mRNA表达量和SREBF2、ACAT2、ABCA1、ABCG5蛋白表达量均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05),CYP8B1基因mRNA表达量和CYP7A1、CYP8B1蛋白表达量均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05);CGA组犊牛肝细胞中TC含量极显著升高(P<0.01),SREBF2、ABCA1、CYP27A1、FXR、FGFR4蛋白表达量均极显著升高(P<0.01),CYP7A1蛋白表达量极显著降低(P<0.01)。与FFA组相比,CGA+FFA组犊牛肝细胞中TC含量显著升高(P<0.05),TAG含量显著降低(P<0.05),HMGCR、ACAT2、ABCA1、ABCG5、APOA1基因mRNA表达量和SREBF2、ACAT2、ABCA1、ABCG5、FXR、FGFR4蛋白表达量均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),CYP7A1、CYP8B1蛋白表达量均极显著降低(P<0.01)。【结论】CGA能参与调节犊牛肝细胞内胆固醇稳态,同时激活FXR和FGFR4,进而缓解高FFA处理的犊牛肝细胞胆汁酸蓄积。

外科病人围手术期血脂代谢的变化及其临床意义

对二组外科择期手术病人围手术期血浆游离脂肪酸即软脂酸（C16：0）、硬脂酸（C18：0）、油酸（C18：0）、亚油酸（C18：2）、花生四烯酸（C20：4）和甘油三脂及胆固醇水平变化的观察，发现手术后早期即有血脂水平的全面降低。血脂的降低随创伤应激的加重而具显著性且持久，提示在创伤应激早期机体主要通过利用血脂而获得能量，同时血糖应激性升高以保证神经细胞和红细胞的能量供应，并减少了乳酸生成，有利于维持重要的生命中枢功能和体液内环境稳定。本研究还发现，创伤后存在着显著而持久的低胆固醇血症，且血胆固醇水平与创伤程度及病人预后有较密切关系。创伤后在保证机体氧合状态正常的前提下，早期补充脂肪酸（特别是多不饱和脂肪酸）和胆固醇，将有助于减轻机体组织的分解代谢，稳定细胞结构和功能，保护机体内环境，防止多器官功能障碍的发生。