香加皮提取物抗肿瘤活性的研究

背景与目的研究中药香加皮提取物的抗肿瘤活性,探讨其抗肿瘤机制。材料与方法采用噻唑蓝(3-[4,5-di methylthiazol-2-yl]-2,5diphenyltetrazoliumbromide,MTT)法观察香加皮醇提物和水提物对MCF-7、TE-13、QG56、SMMC7721、T24、Hela、K562等肿瘤细胞增殖的抑制作用,应用流式细胞术检测肿瘤细胞的周期变化和对凋亡的影响。结果香加皮醇提物和水提物均能明显抑制多种肿瘤细胞的增殖,呈浓度依赖性;醇提物的抑瘤作用(IC50<10μg/ml)强于水提物(IC50<40μg/ml),并且差异具有统计学意义(P<0.05)。香加皮醇提物可将MCF-7细胞阻滞于G0/G1期,并呈时间依赖性地诱导MCF-7细胞发生凋亡。10μg/ml香加皮醇提物作用MCF-7细胞24h,与对照组相比,G0/G1期细胞显著增多,作用48h,凋亡率从对照组的0.70%±0.13%升高到13.54%±2.12%,两者之间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论香加皮提取物对体外肿瘤细胞的增殖具有显著的抑制作用,醇提物强于水提物,其抗瘤机制可能与阻滞肿瘤细胞周期和诱导凋亡有关。

香加皮不同提取部位体外抗肿瘤活性实验研究

[目的]筛选香加皮的抗肿瘤活性部位。[方法]用大孔吸附树脂柱层析法对香加皮的和60%乙醇回流提取物进行分段处理,利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定各提取部位体外抗肿瘤活性。[结果]70%乙醇洗脱部位对体外肿瘤细胞表现出抑制活性,并在测定浓度范围内呈现出良好剂量依赖性。95%乙醇洗脱部位的抑制作用较弱。而水洗脱物和20%乙醇洗脱物则未呈现出抗肿瘤活性。在各提取部位中70%乙醇提取物活性最强。[结论]70%乙醇提取部位是香加皮主要的体外抗肿瘤活性部位。

高效液相色谱法测定中药香加皮中7种孕甾烷糖苷类成分的含量

目的:建立中药香加皮中7种孕甾烷糖苷类成分含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,测定periploside C、periploside K、periploside R、periploside D、periploside E、periploside Q和periploside O等7种成分的含量。色谱柱:菲罗门C18(100 mm×4.6 mm,2.6μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速:1.5 m L·min-1;检测波长:264 nm。结果:中药香加皮中periploside C、periploside K、periploside R、periploside D、periploside E、periploside Q和periploside O等7种成分的含量分别在0.020 1-0.100 5 mg·m L-1、0.002 5-0.125 mg·m L-1、0.002 5-0.125 mg·m L-1、0.002 5-0.125 mg·m L-1、0.002 5-0.125 mg·m L-1、0.002 5-0.125 mg·m L-1和0.002 5-0.125 mg·m L-1浓度范围内,且进样量与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率依次为98.83%、98.23%、98.27%、98.71%、98.53%、98.28%和98.21%。结论:可以利用此法同时测定中药香加皮中7种孕甾烷糖苷类成分的含量,用于该药材的质量控制。

杠柳不同部位无机元素的分布及富集特征研究

[目的]测定3种植物形态(藤本、灌木、蔓生灌木)杠柳根皮、茎皮、根际土壤中Mn、Cu、Zn、Fe、K、Ca、Mg共7种元素的含量,考察杠柳不同部位各元素的分布及富集特征。[方法]电热板湿法消解样品,火焰原子吸收法测定各元素含量。[结果]根皮、茎皮中各元素含量差异较大,但大小顺序均为K>Ca>Mg>Fe>Mn>Cu>Zn;元素Zn、Fe、K、Ca在两部位中的分布具较明显差异性,Zn、K、Ca在茎皮中有较多分布,而根皮中有更多的Fe;根际土壤中元素含量大小顺序为Fe>K>Ca>Mg>Mn>Zn>Cu,杠柳生长土壤质量较优;根皮、茎皮对Cu、Ca富集性较强,K在茎皮中有一定的富集。[结论]明确了杠柳根皮、茎皮中7种元素的含量、分布及富集特征,提供了杠柳植物形态分为两类的数据支撑,首次提出杠柳作为铜污染区土壤修复植物的可能性,为完善杠柳的生态学等基础研究奠定了基础。

杠柳幼苗对盐胁迫的生理响应及耐盐机理研究

目的:探究盐胁迫对杠柳生长、生理指标及总黄酮含量的影响,初步了解杠柳的耐盐机制。方法:以培养30 d的杠柳实生苗为材料,分别用0.2%、0.5%、1.0%、2.0%的NaCl溶液进行盐胁迫处理,胁迫处理10 d后,测定植株地上及地下部分的性状指标、生理指标、总黄酮含量。结果:杠柳在中低盐浓度(0.2%和0.5%NaCl)下生长良好,不同浓度的高盐(1.0%和2.0%NaCl)环境下生长受到不同程度的抑制;幼苗根及茎中丙二醛含量随盐胁迫浓度的升高而持续升高,抗氧化酶类(SOD、POD和CAT)活性呈先上升后下降的趋势,游离脯氨酸、可溶性糖含量显著升高,可溶性蛋白含量则呈先上升后下降的趋势;地上和地下部分的次生代谢产物总黄酮在盐胁迫下均显著增加,且茎中总黄酮含量在胁迫前后均显著高于根中总黄酮的含量。结论:杠柳具有很强的耐盐性,可通过提高抗氧化酶系统活性,诱导渗透调节物质和非酶还原产物总黄酮的合成,以及生理落叶等方式提高其耐盐性。

不同生长期杠柳各部位活性成分的累积变化

目的考察一年内不同生长期杠柳各部位(根皮、根木质部、茎皮、茎木质部和叶)中主要活性成分杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的量,研究其动态累积变化规律,确定其最佳采收期。方法每月平行采样2次,超声提取法制备样品,RP-HPLC法测定杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的量。结果杠柳各部位成分累积动态变化曲线呈"双峰"型,其中茎皮中杠柳毒苷的量最高可达1.400%;根皮中4-甲氧基水杨醛累积量最高达0.781%,而其他部位均低于0.2%。结论整个生长周期杠柳各部位中两种成分的累积变化呈一定的规律性,其变化可能与不同生长阶段及相应的生理代谢活动等密切相关;茎皮和根木质部均可作为提取杠柳毒苷的新药用部位,最佳采收期为生长期。

杠柳根皮、茎皮中元素累积及其与活性成分相关性研究

目的测定不同采收期杠柳Periploca sepium根皮、茎皮中Mn、Cu、Zn、Fe、K、Ca、Mg量,探究元素累积变化规律及其与活性成分杠柳毒苷、4-甲氧基水杨醛的相关性,揭示影响2种成分累积的主导元素。方法电热板湿法消解,火焰原子吸收测定元素量,SPSS 19.0处理数据。结果 7种无机元素在根皮、茎皮中分布具有一定的差异性。根皮中Ca与杠柳毒苷,Fe与4-甲氧基水杨醛的累积趋势基本同步,茎皮中Fe与4-甲氧基水杨醛,Ca与Mg的累积趋势相近,呈"双峰"型。基于杠柳毒苷,在根皮中与Ca呈极显著正相关,在茎皮中与Zn呈显著负相关。基于4-甲氧基水杨醛,在根皮中与茎皮中4-甲氧基水杨醛、Fe呈极显著正相关,与茎皮中Mn呈显著负相关,与根皮中Fe呈显著正相关;在茎皮中与根皮、茎皮中Fe呈极显著正相关。结论 Ca、Zn、Fe、Mn是杠柳2种活性成分累积的关键元素,其中杠柳毒苷的主要影响元素为根皮Ca及茎皮Zn,间接影响元素为根皮Mg,4-甲氧基水杨醛的主要影响元素为Fe及茎皮Mn,茎皮Ca、Mg为其间接影响元素。