期刊文献+
共找到35篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
Antibody Levels and Infection Status of Pertussis in the Population under Pertussis Resurgence in Guangxi in 2018:A Cross-Sectional Survey
1
作者 Liang Liang Qiuyun Deng +6 位作者 Lili Deng Jinghang Wei Shiyi Chen Yizhi Wei Yuyan Ma Yue Qin Wei Liu 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2024年第6期628-638,共11页
Objective Pertussis cases have increased markedly since 2018 in Guangxi.The aim of this study was to evaluate antibody levels and the infection status of pertussis in the resident population.Method A total of 10,215 s... Objective Pertussis cases have increased markedly since 2018 in Guangxi.The aim of this study was to evaluate antibody levels and the infection status of pertussis in the resident population.Method A total of 10,215 serum samples from residents were collected from August-November 2018 and tested for anti-pertussis IgG and toxin IgG using the enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).Results Of the collected samples,1,833(17.94%)tested positive for anti-pertussis IgG,with the median concentration of 16.06 IU/mL.Antibody level<10 IU/mL accounted for more than 60%in children under 4 years of age,but declined with age,whereas the percentages of the other three levels(10-40,40-50,and≥50 IU/mL)increased almost with age(P<0.001).Moreover,7,924 samples were selected for anti-pertussis toxin IgG,of which 653(8.24%)tested positive(≥40 IU/mL)with the median concentration of 5.89 IU/mL,and 204 participants(2.56%)had recent pertussis infection(≥100 IU/mL).Among the different age groups,the highest rates of positivity and recent infection were observed at 11-20 years of age,the lowest positivity rate at 5 years of age,and the lowest recent infection rate at 4 years of age(P<0.001,P=0.005,respectively).Conclusion The survey results showed that all age groups in Guangxi lacked immunity against pertussis,which was one of the main factors contributing to the resurgence of pertussis in 2018.In addition,the prevalence of pertussis is relatively high in Guangxi,and its incidence is seriously underestimated,especially in adolescents and adults. 展开更多
关键词 pertussis resurgence Anti-pertussis IgG Anti-pertussis toxin IgG antibody level Infection status
下载PDF
百日咳患儿血清PT-IgG水平相关因素分析 被引量:1
2
作者 甘川 吴小英 许红梅 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期263-267,共5页
目的探讨影响百日咳患儿血清百日咳毒素抗体(PT-IgG)水平的相关因素。方法回顾性分析2018年4月1日至2019年7月31日住院治疗的百日咳患儿的临床资料。分析不同病程、百日咳疫苗接种剂次、发病年龄、疾病严重程度对于百日咳患儿PT-IgG水... 目的探讨影响百日咳患儿血清百日咳毒素抗体(PT-IgG)水平的相关因素。方法回顾性分析2018年4月1日至2019年7月31日住院治疗的百日咳患儿的临床资料。分析不同病程、百日咳疫苗接种剂次、发病年龄、疾病严重程度对于百日咳患儿PT-IgG水平的影响。结果共纳入638例患儿,其中未接种组313例,男177例、女136例,中位年龄78.0(52.0~125.0)天;接种组325例,男163例、女162例,中位年龄232.0(144.0~483.0)天。未接种组患儿不同采样时病程(≤14 d、15~21d、>21 d)组间不同PT-IgG水平分布差异有统计学意义(P<0.01);病程>21 d组PT-IgG≥80 IU/mL的比例较高。接种组患儿不同采样时病程组间不同PT-IgG水平分布差异有统计学意义(P<0.01);病程15~21d组和>21 d组PT-IgG≥80 IU/mL的比例较高。不同疫苗接种剂次组之间PT-IgG水平的差异有统计学意义(P<0.01);随着疫苗接种剂次增加,PT-IgG水平逐渐增高。未接种组中,无论重症组还是普通组,不同采样时病程之间PT-IgG水平的差异均有统计学意义(P<0.05)。接种组中,普通组不同采样时病程之间PT-IgG水平的差异有统计学意义(P<0.05)。结论我国百日咳鲍特菌急性感染期患儿PT-IgG不高,59.9%低于20 IU/mL;PT-IgG水平受到疫苗接种剂次及采样时病程的影响。 展开更多
关键词 百日咳 疫苗 抗百日咳杆菌毒素抗体IgG
下载PDF
抗百日咳毒素单克隆抗体的纯化及应用研究 被引量:13
3
作者 徐颖华 张庶民 +1 位作者 侯启明 雷殿良 《药品评价》 CAS 2005年第2期113-116,共4页
目的纯化抗百日咳毒素(PT)的单克隆抗体(M cAb),并建立特异、准确的PT定量检测方法。方法采用辛酸-硫酸铵沉淀法和A蛋白亲和层析法纯化杂交瘤细胞腹水,并经阻断抑制试验筛选识别不同表位的M cAb,用于建立定量检测PT的ELISA方法。结果经S... 目的纯化抗百日咳毒素(PT)的单克隆抗体(M cAb),并建立特异、准确的PT定量检测方法。方法采用辛酸-硫酸铵沉淀法和A蛋白亲和层析法纯化杂交瘤细胞腹水,并经阻断抑制试验筛选识别不同表位的M cAb,用于建立定量检测PT的ELISA方法。结果经SDS-PAGE分析,纯化M cAb的纯度均在90%以上,选择二株识别不同抗原位点M cAbs,应用于检测PT的双抗夹心ELISA方法,灵敏度为2.14μg/L,批内变异系数5.85%,批间变异系数9.27%,平均回收率为108.12%,应用该法测定了国内几大生产厂家送检的无细胞百日咳疫苗原液中PT含量。结论获得了纯度高的抗PT M cAb,建立了一种特异、准确的定量检测PT的ELISA方法,并用于无细胞百日咳疫苗原液中PT含量的检测,为无细胞百日咳疫苗的质量控制提供了有力的手段。 展开更多
关键词 单克隆抗体 纯化 SDS-PAGE分析 百日咳疫苗原液 百日咳毒素(pt) 夹心ELISA方法 无细胞百日咳疫苗 定量检测方法 辛酸-硫酸铵 变异系数 杂交瘤细胞 亲和层析法 McAbs 平均回收率 抑制试验 抗原位点 生产厂家 质量控制 A蛋白
下载PDF
百日咳毒素单克隆抗体的制备及其ELISA定量检测方法的建立 被引量:3
4
作者 詹骞 刘志飞 +4 位作者 彭祥兵 宁浩然 陈雯 张爱华 杨晓明 《微生物学免疫学进展》 2013年第2期19-23,共5页
目的制备百日咳毒素(Pertussis toxin,PT)的单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA用于检测PT的含量。方法采用杂交瘤技术制备PT的单抗,并对其进行鉴定;优化ELISA系统反应条件,建立PT双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对其进行精密性及准确性... 目的制备百日咳毒素(Pertussis toxin,PT)的单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA用于检测PT的含量。方法采用杂交瘤技术制备PT的单抗,并对其进行鉴定;优化ELISA系统反应条件,建立PT双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对其进行精密性及准确性验证;应用建立的方法检测武汉生物制品研究所有限责任公司(简称武汉公司)73批无细胞百日咳疫苗生产中间样品中的PT含量。结果获得4株稳定的抗PT杂交瘤细胞株,抗体亚型均为IgG2a,抗体腹水ELISA效价达1∶106以上,均能与PT发生特异反应,而与百日咳丝状血凝素、白喉和破伤风类毒素未发生交叉反应;建立的双抗体夹心ELISA的线性检测范围在2.50~80.00 ng/mL之间,酶标板内和板间变异系数均小于10%;PT的高、中、低浓度的回收率分别为97.41%、106.60%和89.98%;73批无细胞百日咳疫苗生产中间样品中的PT质量浓度在50.00~150.00 ng/mL之间波动,说明中间产物的批间一致性及稳定性趋势良好。结论已成功制备了抗PT的单抗,并建立了精密性和准确性均较好的定量检测PT的双抗体夹心ELISA,可用于无细胞百日咳疫苗生产中PT的定量检测。 展开更多
关键词 百日咳毒素 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验
下载PDF
吸附无细胞百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂Ⅲ期临床人体接种反应和血清学效果观察报告 被引量:3
5
作者 何长民 陈爱荣 +15 位作者 陈平纡 杨晓明 王祖森 秦力 孙述学 秦进才 侯启明 张路民 王立兰 田霖 雷殿良 吴承民 何由成 姚稳成 武蕊元 赵礼清 《微生物学免疫学进展》 1998年第4期25-28,共4页
吸附无细胞百、白、破混合制剂(DTacP)于1995年6月至1997年9月在广东省4个市和陕西省大荔县进行了Ⅲ期临床人体接种反应和血清学效果观察,全程基础免疫婴幼儿64961例,加强注射38860例,总计为10382... 吸附无细胞百、白、破混合制剂(DTacP)于1995年6月至1997年9月在广东省4个市和陕西省大荔县进行了Ⅲ期临床人体接种反应和血清学效果观察,全程基础免疫婴幼儿64961例,加强注射38860例,总计为103821例,接种反应轻微,未发现有严重异常反应者。DTacP在基免后1年和加强注射前抗PT和抗FHA的抗体水平分别为101EU/ml和513EU/ml;加强注射后1个月,抗PT和抗FHA的抗体水平显著增长,分别为2434EU/ml和3113EU/ml;加强免疫后1年,抗PT和抗FHA的抗体水平均能维持在较高的抗感染水平,分别为201EU/ml和586EU/ml;DTacP抗白喉和抗破伤风的抗体水平,不论是在基免后还是在加强注射后1个月或1年,其≥001HAU/ml的例数均为100%,均显著超过儿童抗白喉和抗破伤风感染要求的保护水平(001HAU/ml)。 展开更多
关键词 百日咳菌苗 白喉 破伤风类毒素 破伤风抗体
下载PDF
百日咳毒素S1亚单位的分子修饰及在重组杆状病毒中的表达 被引量:4
6
作者 于康震 Burnette WN +3 位作者 Kaslow HR Mar VL Ahmad S Yilma TD 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期52-55,共4页
目的:百日咳毒素既是百日咳杆菌的主要毒性因子,又是重要的保护性抗原,其S1亚单位具有ADP核糖转移酶活性和免疫保护性决定簇。为高效表达前构建的一个丧失酶活性但仍保持保护决定簇的S1变异子,开展了本研究。方法:通过添... 目的:百日咳毒素既是百日咳杆菌的主要毒性因子,又是重要的保护性抗原,其S1亚单位具有ADP核糖转移酶活性和免疫保护性决定簇。为高效表达前构建的一个丧失酶活性但仍保持保护决定簇的S1变异子,开展了本研究。方法:通过添加人流感病毒血凝素基因信号序列或嵌膜序列的方法,对天然和变异S1亚单位基因片段作了遗传学修饰。然后使用重组杆状病毒技术使这些S1亚单位在昆虫细胞和昆虫幼虫中实现了高水平表达。结果:这些重组S1的表达水平介于每万个昆虫卵细胞018~193μg或每只昆虫幼虫046~498mg之间。天然信号肽和HA信号肽均可完整表达,但后者的切割效率(61%~81%)比前者(16%~19%)更高。所有带信号肽的S1亚单位均呈异质性表达(双带)。结论:重组S1亚单位的表达是高效和正确的,表达的异质性是由于信号肽切割不完全的缘故。 展开更多
关键词 百日咳毒素 S1亚单位 重组杆状病毒 分子修饰
下载PDF
百日咳杆菌有效免疫原的发酵培养 被引量:1
7
作者 秦力 杨晓明 +4 位作者 鲁劲民 刘志源 陈爱荣 范晓昌 何长民 《微生物学免疫学进展》 1998年第4期41-45,共5页
为扩大生产,采用500立升发酵罐培养无细胞百日咳菌苗,发现随着培养时间的延续,细胞浓度增高,培养液的pH值上升,PT、FHA活性、血凝效价逐渐增加、O2溶压下降、CO2溶压上升。pH值达82时,PT活性最高为300... 为扩大生产,采用500立升发酵罐培养无细胞百日咳菌苗,发现随着培养时间的延续,细胞浓度增高,培养液的pH值上升,PT、FHA活性、血凝效价逐渐增加、O2溶压下降、CO2溶压上升。pH值达82时,PT活性最高为300EU/ml,较现用扁瓶培养方法高5倍。pH值继续上升时,PT活性开始下降。FHA活性及血凝效价具有相似的变化。通过测定培养液pH值以确定收获时间,可获得富含PT、FHA。 展开更多
关键词 发酵培养 丝状血凝素 百日咳毒素
下载PDF
痉挛性咳嗽患儿百日咳鲍特菌感染状况及临床特征分析 被引量:1
8
作者 董利利 赵二要 +4 位作者 李晓辉 汤昱 甄兴刚 王芳 张向峰 《中国合理用药探索》 2021年第9期50-53,共4页
目的:了解痉挛性咳嗽患儿百日咳鲍特菌感染状况并分析其临床特征。方法:回顾性分析2019年1~12月于本院进行咽拭子聚合酶链式反应(PCR)及血清人百日咳毒素IgG抗体(PT-IgG)检测的疑似百日咳鲍特菌感染的痉挛性咳嗽患儿病历资料,根据检测... 目的:了解痉挛性咳嗽患儿百日咳鲍特菌感染状况并分析其临床特征。方法:回顾性分析2019年1~12月于本院进行咽拭子聚合酶链式反应(PCR)及血清人百日咳毒素IgG抗体(PT-IgG)检测的疑似百日咳鲍特菌感染的痉挛性咳嗽患儿病历资料,根据检测结果分为百日咳组与类百日咳组,并比较两组患儿的临床特征。结果:共纳入147例痉挛性咳嗽患儿,百日咳组92例,类百日咳组55例。百日咳鲍特菌检测阳性率为62.6%。百日咳多发于0~3岁婴幼儿,一年四季均可发病,以春季和夏季居多。临床特征方面,百日咳组咳鸡鸣样回声、白细胞计数升高者多于类百日咳组(P<0.05);百日咳组合并鼻炎和(或)结膜炎者少于类百日咳组(P<0.05);两组咳嗽剧烈窒息、咳嗽剧烈发绀、咳嗽剧烈呕吐、合并肺炎/支气管炎者比较无统计学差异(P>0.05)。结论:PCR和血清学检测可相互辅助诊断痉挛性咳嗽,以免漏诊。对于伴有咳鸡鸣样回声、白细胞升高者,应警惕百日咳鲍特菌感染。 展开更多
关键词 百日咳 聚合酶链式反应 人百日咳毒素IgG抗体 儿童 临床特征
下载PDF
无细胞百日咳菌苗纯度和生物学特性研究 被引量:3
9
作者 陈平纡 王祖森 何长民 《微生物学免疫学进展》 2000年第1期27-33,共7页
本文对无细胞百日咳菌苗的纯度、免疫力和毒性进行了研究。实验证明菌苗中不仅含有百日咳毒素 (PT)和丝状血凝素 (FHA) ,而且还含有百日咳凝集素和百日咳粘着素。菌苗的纯度为 5 0 %~ 95 7% ,菌苗中PT和FHA的比例为 1∶1~ 1∶18。
关键词 无细胞百咳菌苗 百日咳毒素 凝集素
下载PDF
疑似百日咳病人血清中特异性抗体的研究
10
作者 侯启明 梁雅文 +3 位作者 张路民 王立兰 和京果 刘常红 《微生物学免疫学进展》 2000年第3期15-17,共3页
对北京地区 9份疑似百日咳病人血清进行特异性抗体 (抗 PT和抗 FHA抗体 )的检测中 ,有 7份血清中抗 PT和抗 FHA抗体两者或单个高于百日咳病患者恢复期 2 0~ 30Eu/ml的抗体阳性指标。结果表明 ,在未免疫或免疫不完全以及学龄前儿童... 对北京地区 9份疑似百日咳病人血清进行特异性抗体 (抗 PT和抗 FHA抗体 )的检测中 ,有 7份血清中抗 PT和抗 FHA抗体两者或单个高于百日咳病患者恢复期 2 0~ 30Eu/ml的抗体阳性指标。结果表明 ,在未免疫或免疫不完全以及学龄前儿童和免疫过的青少年人群中仍有百日咳疾病的感染。建议考虑对学龄前儿童或中小学生进行百、白联合疫苗或无细胞百日咳疫苗的加强接种。 展开更多
关键词 百日咳 抗-pt抗体 抗-FHA抗体 百日破联合疫苗
下载PDF
百日咳毒素S1亚单位截短片段的表达、纯化及初步应用 被引量:2
11
作者 杨瑜 朱为 +3 位作者 应通峰 黄帼英 徐帆洪 瞿爱东 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第12期1058-1061,1069,共5页
目的表达并纯化百日咳毒素(PT)S1亚单位截短片段S146,以其制备抗体,初步建立检测PT的双抗体夹心ELISA法。方法PCR扩增S146基因,亚克隆至载体pUC18,鉴定正确后,插入表达载体pET16b,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-P... 目的表达并纯化百日咳毒素(PT)S1亚单位截短片段S146,以其制备抗体,初步建立检测PT的双抗体夹心ELISA法。方法PCR扩增S146基因,亚克隆至载体pUC18,鉴定正确后,插入表达载体pET16b,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,用镍离子亲和层析柱纯化,复性后的蛋白免疫家兔,制备抗血清,纯化后作为包被抗体,建立检测PT的双抗体夹心ELISA法,并检测其特异性。结果表达的重组蛋白相对分子质量约为19000,主要存在于破菌沉淀中,表达量占菌体总蛋白的44%;纯化后蛋白纯度为94.5%;家兔抗血清可特异性识别天然PTSI;建立的双抗体夹心ELISA法特异性良好。结论已成功表达、纯化了PTS1亚单位截短片段S146,并以纯化的抗S146抗体作为包被抗体,初步建立了检测PT的双抗体夹心ELISA法,为研制特异性检测试剂和提供一种疫苗的质量控制方法奠定了基础。 展开更多
关键词 百日咳毒素 S1亚单位 截短片段 克隆 表达 纯化 ELISA
下载PDF
溶液环境对百日咳疫苗分离纯化的影响 被引量:1
12
作者 吴铁 闭静秀 +4 位作者 黄永东 张焱 孙李靖 孙春宝 苏志国 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1279-1284,共6页
针对百日咳疫苗在低盐条件下不稳定,容易聚集而导致层析过程收率低、分离度低的难题,实验中选择脲作为稳定剂来改善百日咳疫苗所处的溶液环境,并采用离子交换层析和凝胶过滤层析进行百日咳疫苗的分离纯化,通过ELISA抗原活性测定和还原性... 针对百日咳疫苗在低盐条件下不稳定,容易聚集而导致层析过程收率低、分离度低的难题,实验中选择脲作为稳定剂来改善百日咳疫苗所处的溶液环境,并采用离子交换层析和凝胶过滤层析进行百日咳疫苗的分离纯化,通过ELISA抗原活性测定和还原性SDS-PAGE等方法研究了脲对百日咳疫苗分离纯化的影响。结果表明,在流动相中加入2mol/L脲作为稳定剂,能显著提高离子交换层析和凝胶过滤层析中的PT和FHA活性回收率、凝胶过滤层析的分离度、PT和FHA的纯度。这些结果对百日咳疫苗的分离纯化和层析工艺优化提供了重要的依据和参考。 展开更多
关键词 溶液环境 百日咳疫苗 百日咳毒素 丝状血凝素
下载PDF
百日咳毒素抗原检测系统的建立及其应用 被引量:1
13
作者 程会欣 王丽婵 +9 位作者 张立志 卫辰 骆鹏 徐树利 薛晨宝 王巍巍 马国涛 刘波 高强 王治伟 《微生物学免疫学进展》 2018年第6期20-28,共9页
目的建立吸附无细胞百白破联合疫苗中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)的ELISA测定方法,并进行验证及应用。方法以PT作为检测抗原,用高效价鼠单抗和相应的兔多抗建立双抗体夹心ELISA,确定方法的线性范围、重复性、准确性、专属性等,并进... 目的建立吸附无细胞百白破联合疫苗中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)的ELISA测定方法,并进行验证及应用。方法以PT作为检测抗原,用高效价鼠单抗和相应的兔多抗建立双抗体夹心ELISA,确定方法的线性范围、重复性、准确性、专属性等,并进行初步应用。结果 PT质量浓度在2.5~80.0 ng/m L时线性良好,决定系数R2>0.98。该方法与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒原液、甲肝疫苗原液、乙肝疫苗原液、白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)、破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)、百日咳丝状血凝素(filamantous hemagglutinin,FHA)、黏着素(pertactin,PRN)均无明显交叉反应,重复性好,专属性较强,其他均符合常规质控要求。该抗原检测系统对生产具有指导意义,并可以正确反映原液及成品中PT的稳定性。结论建立了PT双抗体夹心ELISA检测方法,为吸附无细胞百白破联合疫苗生产过程中PT含量的质量控制提供有效的技术手段。 展开更多
关键词 百日咳毒素 酶联免疫吸附试验 吸附无细胞百白破联合疫苗
下载PDF
CHO细胞法检测百日咳毒素毒性的影响因素
14
作者 王巍巍 刘波 +8 位作者 王治伟 程会欣 马国涛 徐树利 董高峰 薛晨宝 许丽 高强 张立志 《微生物学免疫学进展》 2019年第2期29-35,共7页
目的考察不同培养基、不同牛血清、血清灭活与否及生产过程中添加的各外源物质对百日咳毒素(pertussis toxin, PT)在中华仓鼠卵巢细胞(chinese hamster ovary cell, CHO)簇集试验中的影响。方法分别使用3种培养基F-12K、DMEM/F12和1640... 目的考察不同培养基、不同牛血清、血清灭活与否及生产过程中添加的各外源物质对百日咳毒素(pertussis toxin, PT)在中华仓鼠卵巢细胞(chinese hamster ovary cell, CHO)簇集试验中的影响。方法分别使用3种培养基F-12K、DMEM/F12和1640培养CHO细胞,并进行CHO细胞簇集试验,观察细胞生长状态及PT引起细胞簇集的敏感性;分别选取2个厂家的牛血清(对2种血清进行灭活和不灭活处理)培养CHO细胞,观察4种牛血清对细胞生长及簇集的影响;选用生产过程中添加的物质进行CHO细胞簇集试验,观察细胞生长状态及是否出现簇集,确定不影响细胞生长的最高浓度,同时使用不影响细胞生长的各添加物质最高浓度进行小鼠组胺致敏试验,观察与CHO细胞簇集试验结果是否一致。结果 3种培养基对CHO细胞生长及CHO细胞簇集存在明显差异,F-12K培养基培养的细胞形态规则、典型,其他2种培养基培养的细胞生长缓慢,且对PT的敏感性均低于F-12K培养基;4种牛血清中胎牛血清培养的细胞生长最快且形态规则,簇集试验敏感性优于其他3组血清;添加的各外源物质均会导致细胞生长缓慢或死亡,在稀释至一定浓度后可以排除添加物质对CHO细胞簇集试验的影响,同时在小鼠组胺致敏试验中不会引起动物死亡。结论 F-12K培养基最适宜实验室CHO细胞生长,不同血清对细胞生长和簇集的敏感度有一定差异,添加的外源物质残留量应进行控制以保证试验结果的稳定可靠。 展开更多
关键词 中华仓鼠卵巢细胞 簇集试验 百日咳毒素 牛血清 组胺致敏试验
下载PDF
百日咳毒素、丝状血凝素、百日咳黏附素抗体间接ELISA检测方法的建立、验证及初步应用
15
作者 孙博 何小曼 +7 位作者 江涛 谷铁军 姜巍 姜恬馨 李吉 王梦舒 刘大维 毕楠 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第10期1218-1224,共7页
目的建立小鼠血清中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)及百日咳黏附素(pertussis adhesin,PRN)抗体间接ELISA定量检测方法,并进行验证及初步应用,为百日咳疫苗生产工艺的优化提供参考。方法... 目的建立小鼠血清中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)及百日咳黏附素(pertussis adhesin,PRN)抗体间接ELISA定量检测方法,并进行验证及初步应用,为百日咳疫苗生产工艺的优化提供参考。方法分别用PT、FHA及PRN抗原包被酶标板,加入百日咳抗小鼠血清标准品及待测小鼠血清,以HRP标记的山羊抗鼠IgG作为酶标二抗,通过TMB显色的指示程度定量检测小鼠血清中PT、FHA、PRN抗体含量。对建立的间接ELISA检测方法进行专属性、线性范围、准确性、精密性进行验证。采用建立的方法对百日咳疫苗及效价合格的内部参比品免疫小鼠血清进行检测。结果采用PT、FHA、PRN抗体ELISA方法检测百日咳抗小鼠血清标准品及待测样品的结果为阳性,其余样本检测结果均为阴性。PT抗体ELISA检测方法的线性范围为0.0053~0.17 U/mL,回收率为90.91%~104.77%,重复性验证RSD为6.31%,人员间RSD为6.40%;FHA抗体ELISA检测方法的线性范围为0.0223~1.43 U/mL,回收率为95.84%~102.18%,重复性验证RSD为9.02%,人员间RSD为5.79%;PRN抗体ELISA检测方法的线性范围为0.0094~0.3 U/mL,回收率为86.27%~100.22%,重复性验证RSD为6.94%,人员间RSD为8.90%。采用建立的方法检测百日咳疫苗样品及效价合格的内部参比品免疫小鼠血清,6组样品PT抗体水平明显高于内部参比品,FHA、PRN抗体水平与内部参比品相当。结论建立的各抗体ELISA检测方法专属性强,线性相关性良好(R2>0.99),准确性高,精密性良好,可用于小鼠血清中百日咳(PT、FHA、PRN)抗体的定量检测,为百日咳疫苗生产工艺的优化提供了参考。 展开更多
关键词 间接酶联免疫吸附测定 百日咳毒素抗体 丝状血凝素抗体 百日咳黏附素抗体 定量
原文传递
百日咳毒素兔多克隆抗体的制备及其ELISA定量检测方法的建立和验证 被引量:1
16
作者 宋欣然 张茗婧 +5 位作者 伊丽男 彭少丹 王帆 张国强 司伟雪 朱涛 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第3期350-355,共6页
目的制备百日咳毒素(pertussis toxin,PT)兔多克隆抗体(简称多抗),建立定量检测PT抗原含量的双抗体夹心ELISA法,并进行验证及应用。方法采用传统方法,用PT免疫青紫蓝兔制备PT兔多抗。优化ELISA系统反应条件,建立PT双抗体夹心ELISA定量... 目的制备百日咳毒素(pertussis toxin,PT)兔多克隆抗体(简称多抗),建立定量检测PT抗原含量的双抗体夹心ELISA法,并进行验证及应用。方法采用传统方法,用PT免疫青紫蓝兔制备PT兔多抗。优化ELISA系统反应条件,建立PT双抗体夹心ELISA定量检测方法,并进行特异性、线性、准确性、精密性、灵敏度验证。采用建立的方法对脱毒过程样品及其他百日咳抗原纯化过程样品菌毛蛋白(fimbriae proteins,FIM)原液中PT抗原含量进行检测。结果PT抗原含量双抗体夹心ELISA检测方法的工作条件为PT兔多抗包被浓度为1μg/mL,酶标抗体稀释度为1∶8000。此检测系统能与PT纯化蛋白发生特异性反应,而与百日咳丝状血凝素、白喉类毒素、破伤风类毒素均未发生交叉反应;建立的双抗体夹心ELISA法线性检测范围在25~400 ng/mL之间;PT高、中、低浓度回收率分别为103.27%、91.48%、103.52%;酶标板内和板间的变异系数(CV)均小于10%;该方法的灵敏度为20.719 ng/mL,检测下限为41.438 ng/mL。检测5种不同脱毒工艺条件下、不同取样时间点的35批样品,其抗原含量变化均符合脱毒反应变化趋势。结论成功制备了PT兔多抗,并建立了精密性和准确性良好的定量检测PT抗原含量的双抗体夹心ELISA法,可用于组分百白破联合疫苗生产过程中化学脱毒样品的抗原含量检测。 展开更多
关键词 百日咳毒素 多克隆抗体 酶联免疫吸附试验
原文传递
2021-2022年浙江省义乌市和河南省永城市健康人群百日咳抗体水平调查
17
作者 蔡世轩 李杰 +6 位作者 代函鹰 朱瑶 姬艳芳 周倩倩 骆淑英 邵祝军 高源 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2024年第3期279-282,共4页
目的 调查2021-2022年浙江省义乌市和河南省永城市≥3岁健康人群百日咳抗体水平,评价人群百日咳免疫状况。方法 采用多阶段分层随机抽样法采集两地社区≥3岁的健康人血液样本,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,E... 目的 调查2021-2022年浙江省义乌市和河南省永城市≥3岁健康人群百日咳抗体水平,评价人群百日咳免疫状况。方法 采用多阶段分层随机抽样法采集两地社区≥3岁的健康人血液样本,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测血清百日咳毒素IgG抗体(pertussis toxin IgG,PTIgG)。研究不同年龄组、地区、性别之间抗体浓度的差异。结果 浙江省义乌市和河南省永城市抗体几何平均浓度(geometricmean concentration,GMC)分别为3.79和12.48 IU/ml,两地抗体水平差异有统计学意义(U=907 430,P<0.01)。两地既往及近期感染率(4.88%、4.01%)差异无统计学意义(χ^(2)=0.832,P=0.362)。义乌市≥20岁成人和3~<20岁人群之间的既往及近期感染率(5.87%vs. 4.18%)差异无统计学意义(χ^(2)=2.506,P=0.113),永城市≥20岁成人的既往及近期感染率高于3~<20岁人群(9.76%vs. 1.50%),差异有统计学意义(χ^(2)=25.259, P<0.01)。义乌市既往感染率和近期感染率最高的年龄组分别为≥65岁组(8.33%)、7~<15岁(2.04%),永城市既往感染率和近期感染率最高的年龄组均为≥65岁组(12.50%、12.50%)。义乌市和永城市估计百日咳感染率分别为6.67%和6.48%。结论 浙江省义乌市和河南省永城市健康人群百日咳感染率较高,永城市成年人抗体水平既往及近期感染率高于儿童及青少年组,可能存在接受疫苗免疫的人群仍然感染百日咳的现象,需进一步加强监测,优化免疫策略。 展开更多
关键词 百日咳 百日咳毒素IgG抗体 健康人群 血清学流行病学调查
原文传递
天津市2010-2012年社区人群百日咳血清流行病学调查 被引量:27
18
作者 黄海涛 刘勇 +4 位作者 高志刚 刘鹏 李永成 张颖 曹卫华 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1354-1357,共4页
目的 研究天津市社区人群中百日咳血清流行病学水平.方法 应用ELISA对2010-2012年天津市社区人群单份血百日咳毒素IgG(PT-IgG)抗体进行检测,分析抗体水平与百日咳发病率之间的关系.结果 1 825人的PT-IgG抗体平均阳性率为10.96%,其中0... 目的 研究天津市社区人群中百日咳血清流行病学水平.方法 应用ELISA对2010-2012年天津市社区人群单份血百日咳毒素IgG(PT-IgG)抗体进行检测,分析抗体水平与百日咳发病率之间的关系.结果 1 825人的PT-IgG抗体平均阳性率为10.96%,其中0~3岁组最高,为24.37% ~ 13.61%(P<0.001).4~ 83岁年龄组阳性率为8.84%,估计发病率为10 852/10万,其中51 ~ 83岁组估计发病率最高,为18 986/10万(P=0.001),且随着年龄的增长呈线性升高趋势(r=0.976,P<0.001).3年间抗体阳性率的差异有统计学意义(P=0.001),与当年报告发病率之间呈线性相关(r=0.992,P<0.001).3个监测地区间抗体阳性率的差异有统计学意义(P=0.034),与该监测地区年均报告发病率呈线性关系(r=0.996,P<0.001).结论 天津市百日咳发病的流行病学趋势和人群感染的血清流行病学趋势一致. 展开更多
关键词 百日咳毒素抗体 血清流行病学 估计发病率
原文传递
健康孕期妇女百日咳鲍特菌毒素IgG抗体水平分析 被引量:7
19
作者 韩锐郡 颜晖 +3 位作者 刘莹 习艳丽 高源 王增国 《热带医学杂志》 CAS 2015年第10期1329-1331,共3页
目的分析孕期妇女百日咳毒素(PT)IgG抗体水平,并评价近期感染百日咳的可能。方法采用定量ELISA方法检测154例健康孕期妇女怀孕初期以及怀孕后期双份血清PT-IgG。结果所有标本PT-Ig G均<100 IU/ml,其中72例(46.8%)受试者在临产前PT-Ig... 目的分析孕期妇女百日咳毒素(PT)IgG抗体水平,并评价近期感染百日咳的可能。方法采用定量ELISA方法检测154例健康孕期妇女怀孕初期以及怀孕后期双份血清PT-IgG。结果所有标本PT-Ig G均<100 IU/ml,其中72例(46.8%)受试者在临产前PT-IgG<5 IU/ml。4例受试者的双份血清PT-IgG滴度发生2倍以上的下降。估算孕期妇女近期的百日咳年感染率为4.5%(365.25/208.9×2.6%)。结论孕期妇女的PT-IgG滴度较低,成年育龄妇女在怀孕前可能自然感染百日咳,其感染率可能被低估。 展开更多
关键词 百日咳毒素 抗体 自然感染
原文传递
两种百白破联合疫苗免疫后百日咳的血清学效果 被引量:19
20
作者 孙海燕 刘佩莉 +2 位作者 袁家麟 王树巧 谢广中 《中国计划免疫》 2001年第6期345-348,共4页
为了解无细胞百白破联合疫苗 (DPTa)和全细胞百白破联合疫苗 (DPTw)的血清学免疫效果 ,在上海市卢湾区随机选取 3月龄健康婴儿 ,分两组分别用DPTa和DPTw做基础免疫 ;又选取 18月龄健康儿童也分两组 ,分别用两种联合疫苗做加强免疫 ,免... 为了解无细胞百白破联合疫苗 (DPTa)和全细胞百白破联合疫苗 (DPTw)的血清学免疫效果 ,在上海市卢湾区随机选取 3月龄健康婴儿 ,分两组分别用DPTa和DPTw做基础免疫 ;又选取 18月龄健康儿童也分两组 ,分别用两种联合疫苗做加强免疫 ,免疫前和免疫后 1、6个月采血 ,用微量凝集试验检测百日咳凝集抗体 ,用酶联免疫吸附试验检测抗百日咳毒素抗体 (抗 -PT)和抗丝状血凝素抗体 (抗 -FHA)的水平。结果表明 :经DPTw基础免疫和加强免疫后 ,凝集抗体阳性、保护率和几何平均滴度 (GMT)均明显高于DPTa ;免疫后 6个月 ,凝集抗体GMT仍维持在保护水平以上 ,证明DPTw是有效的。采用DPTa做基础免疫和为以DPTw做基础免疫者的加强免疫 ,免疫后抗 -PT和抗 -FHA抗体均明显高于DPTw ;免疫后 6个月抗 -PT、抗 -FHA抗体还显著高于保护水平 ,说明DPTa既可用于基础免疫 ,也可用于对以DPTw做基础免疫的婴儿的加强免疫。 展开更多
关键词 无细胞百白破联合疫苗 全细胞百白破联合疫苗 百日咳凝集抗体 抗百日咳毒素抗体 抗丝状血凝素抗体
原文传递
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部