大黄酸对IgA肾病Peyer结T细胞亚群的调节作用

目的探讨Peyer结T细胞亚群失衡在IgA肾病(IgAN)发病机制中的作用及大黄酸对其的调节作用。方法采用牛血清白蛋白+LPS+CCl4法建立IgA肾病大鼠模型。将32只SD雄性大鼠随机分成对照组、IgA肾病模型组、大黄酸预防组和大黄酸治疗组。10周末采用免疫荧光检测肾小球IgA沉积,ELISA方法检测血清中Th1类细胞因子IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4含量。用流式细胞术测定各组Peyer结CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞、γδT细胞亚群和IgA+B细胞(IgA+B220+)的比例。结果和对照组相比,模型组中Th2类细胞因子IL-4含量增加而Th1类细胞因子IFN-γ的含量降低(P均<0.05);模型组中CD4+T细胞、CD4+/CD8+、IgA+B220+B细胞比例升高(P均<0.05);模型组中γδT细胞亚群的比例增加,CD8+T细胞、CD4+CD25+T细胞的比例降低,但差异均无统计学意义(P>0.05)。大黄酸预防组和大黄酸治疗组均可减少IL-4含量、CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+比例和IgA+B220+B细胞比例,并提高IFN-γ的含量。结论 Peyer结Th细胞亚群失衡在IgAN发病机制中起到一定的作用,而大黄酸对Peyer结T细胞亚群平衡具有调节作用。

四物汤刺激Peyer’s Patch促进骨髓造血的研究

研究了四物汤煎剂刺激Peyer’sPatch产生细胞因子促进骨髓造血的作用。小鼠灌服给药后取Peyer’sPatch诱生得上清 ,MTT法检测上清对骨髓细胞的刺激增殖作用 ;另以体外直接给药诱生Peyer’sPatch得上清 ,检测Peyer’sPatch诱导的细胞因子活性。结果 :四物汤体内、外给药均可刺激Peyer’sPatch产生细胞因子刺激骨髓细胞增殖 ,此可能是四物汤补血作用的途径之一。

四君子汤复方总多糖对肠黏膜Peyer's结细胞凋亡的影响

目的探讨四君子汤复方总多糖对小鼠肠黏膜Peyer's结细胞凋亡的影响。方法取NIH小鼠随机分为正常组、模型组、四君子汤复方总多糖(SJZPS)组和四君子汤去蛋白多糖(SJZFP)组,肉眼计数Peyer's结细胞个数和面积,流式细胞(FCM)定量分析法(Annexin V联合PI)测定Peyer's结细胞的凋亡率,免疫组化法测定Peyer's结细胞BCL-2蛋白的表达。结果模型组Peyer's结个数和面积均小于正常组,与模型组比较,SJZPS组和SJZFP组Peyer's结个数和面积,均具有非常显著性差异(P<0.01);模型组Peyer's结细胞凋亡率大于正常组,与模型组比较,SJZPS组和SJZFP组Peyer's结细胞凋亡率具有非常显著性差异(P<0.01);模型组Peyer's结BCL-2蛋白表达低于正常组,与模型组比较,SJZPS组和SJZFP组Peyer's结BCL-2蛋白表达具有非常显著性差异(P<0.01)。结论SJZPS和SJZFP均可抵抗肠黏膜Peyer's结细胞的凋亡,具有肠道黏膜免疫调节作用。

芪黄煎剂对大鼠胃切除后Peyer结淋巴细胞的影响

目的探讨芪黄煎剂对大鼠胃切除后Peyer结淋巴细胞的影响。方法将90只大鼠随机分为假手术组、模型组、芪黄煎剂组,每组30只。假手术组大鼠仅给予腹部正中切开后缝合,不行胃切除,手术后自由饮水进食,不给予肠内营养和芪黄煎剂;模型组大鼠行胃切除手术后给予肠内营养制剂能全素;芪黄煎剂组大鼠行胃切除手术后给予能全素和芪黄煎剂。疗程1周。疗程结束后,处死大鼠,分离出Peyer结及其内淋巴细胞,采用流式细胞仪检测αβT细胞抗原受体-白细胞分化抗原3阳性(αβT cell antigen receptor-cluster of differentia-tion 3 positive,αβTCR-CD3+)T细胞,白细胞分化抗原4阳性(cluster of differentiation 4 positive,CD4+)、白细胞分化抗原8阳性(cluster of differentiation 8 positive,CD8+)T细胞;免疫组织化学法检测免疫球蛋白A阳性(immunoglobulin A positive,IgA+)B细胞。结果模型复制后1周,与假手术组比较,模型组Peyer结中αβTCR-CD3+、CD4+T细胞构成比和IgA+B细胞数显著降低(P<0.05,或P<0.01),模型组和芪黄煎剂组CD8+T细胞构成比无显著变化;与模型组比较,芪黄煎剂组Peyer结中αβTCR-CD3+、CD4+T细胞构成比和IgA+B细胞数显著上升(P<0.05,或P<0.01)。结论芪黄煎剂能刺激Peyer结中T细胞的成熟、分化和增殖,并进一步促进Peyer结中B细胞的增殖和活化,有利于胃切除手术应激后肠道免疫屏障功能的调节和恢复。

维生素D对IgA肾病鼠Peyer小结微环境的影响

目的探讨维生素D(VitD)在IgA肾病(IgAN)发病机制中的作用。方法 BALB/C小鼠诱导IgAN模型并随机分为IgAN组(n=15),IgAN+VitD组(n=15),分别给予丙二醇以及丙二醇+1,25(OH)2D 3 ng/(100g·d),连续6周;另设对照组(n=15)。第0、12、18周,测定各组小鼠24 h尿蛋白;第18周测定血清25(OH)D、成纤维细胞生长因子23(FGF23)及半乳糖缺乏IgA1(Gd-IgA1)水平;荧光定量RT-PCR及Western blot检测Peyer小结白介素-21(IL-21)mRNA及蛋白,Bcl-6蛋白表达;流式细胞测定Peyer小结Tfh细胞占T淋巴细胞,B220+IgM+、B220+IgA+、B220-IgA+淋巴细胞占B淋巴细胞百分率。结果与对照组相比,IgAN组小鼠24 h尿蛋白升高;血清25(OH)D降低,FGF23及Gd-IgA1升高;Peyer小结IL-21 mRNA和蛋白,Bcl-6蛋白表达升高;Peyer小结Tfh细胞占T细胞百分率,B220+IgM+、B220+IgA+、B220-IgA+淋巴细胞占B淋巴细胞百分率升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);IgAN+VitD组各项指标均有所改善,与IgAN组相比差异均有统计学意义(P均<0.05),部分指标与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 1,25(OH)2D抑制IgAN鼠Peyer小结Tfh和B细胞分化,抑制Gd-IgA1生成,对Peyer小结微环境起保护作用。

弓形虫复合粘膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导的Peyer's patches持续性细胞免疫应答

目的以可溶性速殖子抗原（soluble tachyzoite antigen，STAg）和霍乱毒素（choleratoxin，CT）佐剂制备的弓形虫复合粘膜疫苗滴鼻免疫小鼠，观察肠粘膜诱导部位Peyer’s patches（PP）的细胞免疫应答及持续时间，探讨其免疫机制。方法BALB／c小鼠96只，随机分为实验组和对照组，实验组以STAg（20μg／只）为抗原，CT（1／μg／只）为佐剂滴鼻免疫，对照组PBS滴鼻。滴鼻2次（间隔2周）后，每组6只小鼠分别于第1、2、3、4、6、8、10、12周处死。计数PP个数，制备PP淋巴细胞悬液，计数并涂片；免疫细胞化学法检测CD4^＋、CD8^＋T细胞亚群。结果实验期间两组小鼠PP数目均无明显变化；实验组免疫后PP淋巴细胞数量明显增生，第2周达高峰，第1、2、3周显著高于对照组（P〈0.05），其中以CD4^＋T细胞增生为主，第1周～第8周高于对照组（P〈0.01），CD8^＋T细胞第1周～第4周显著增高（P〈0.01），CD4^＋／CD8^＋比值无显著变化（P〉0．05）。结论弓形虫复合粘膜疫苗滴鼻免疫BALB／c小鼠可有效诱导肠PP部位持续性的免疫应答，从而激活肠粘膜效应部位淋巴细胞的抗弓形虫感染作用。

植物药金边瑞香对小鼠肠道Peyer’s结的影响

目的:采用环磷酰胺所致小鼠肠道黏膜相关淋巴组织损伤模型,观察植物药金边瑞香浸膏对小鼠肠道Peyer’s结的影响。方法:实验于2005-01/2005-08在赣南医学院分析实验室完成。44只昆明种小鼠随机分为正常组、金边瑞香组、金边瑞香+环磷酰胺组及环磷酰胺组4组,每组11只,给予正常组小鼠生理盐水灌胃,每天1次,每次0.02mL/g,连续7d;环磷酰胺组小鼠第7天1次腹腔注射100mg/kg环磷酰胺,其他同正常组;金边瑞香组用金边瑞香浸膏(浓度400g/L,由江西省中医药研究院提供,含生药量5g/mL,临用时用蒸馏水稀释至所需浓度,批号:050310)灌胃,每天1次,每次0.02mL/g,连续7d;金边瑞香+环磷酰胺组,方法同金边瑞香组和环磷酰胺组。第8天麻醉下脱颈椎处死全部动物,立即小心取出全小肠,肉眼观察其形态并计数小肠Peyer’s结的数量、随后用生理盐水冲洗肠腔,用针头小心取出Peyer’s结按常规方法制备细胞悬液后计数细胞。观察正常组、金边瑞香组、金边瑞香+环磷酰胺组及环磷酰胺组4组小鼠Peyer’s结,计数Peyer’s结细胞总数,比较Peyer’s结的数量及细胞数。结果:①正常组、金边瑞香组、金边瑞香+环磷酰胺组Peyer’s结的数目及结内细胞总数明显高于环磷酰胺组[(5.818±1.991),(7.273±1.678),(6.364±1.690),(3.818±0.874);(4.223±1.197)×109L-1,(6.658±3.758)×109L-1,(6.884±1.807)×109L-1,(1.451±1.024)×109L-1,F=14.28,9.044,P<0.05～0.001]。②金边瑞香+环磷酰胺组、金边瑞香组及正常组之间两两比较Peyer’s结的数目及结内细胞总数差别无统计学意义(P>0.05)。结论:金边瑞香可对抗环磷酰胺诱导的小鼠肠道Peyer’s结的损伤,提示金边瑞香可能对肠道黏膜免疫具有改善作用。

豚鼠回肠Peyer＇s集结含神经肽Y、P物质和降钙素基因相关肽神经的分布

用免疫组织化学ＡＢＣ法结合ＧＤＮ显色技术，在光镜水平观察了含ＮＰＹ、ＳＰ和ＣＧＲＰ神经纤维在豚鼠回肠Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结的定位与分布。结果显示，邻近Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结的粘膜下层内有以上３种肽能神经纤维和神经元胞体分布，Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结不同区域含ＮＰＹ、ＳＰ和ＣＧＲＰ神经纤维的定位有明显差异。在上皮下圆顶区，３种肽能神经分支均形成纤细的神经网，并向滤泡相关上皮方向延伸；滤泡间区含ＮＰＹ神经多循微血管壁走行、仅少数分支定位于免疫细胞之间，而含ＳＰ和ＣＧＲＰ神经以非血管性纤维为主、常分布于此区的免疫活性细胞间；滤泡区内仅见少量含ＮＰＹ和ＳＰ神经终末分布、未发现含ＣＧＲＰ神经分支。总体上，Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结内含ＮＰＹ和ＳＰ神经纤维数较ＣＧＲＰ免疫反应纤维为多。Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结含ＮＰＹ、ＳＰ和ＣＧＲＰ神经支配的发现，为研究神经肽调节消化道粘膜免疫功能提供了形态学依据。本文对Ｐｅｙｅｒ＇ｓ集结内这些肽能神经的起源、性质及其在胃肠粘膜局部免疫反应中可能的调节机制进行了讨论。

Peyer’s结淋巴细胞对上皮屏障功能的影响

目的 :体外建立稳定的上皮细胞与Peyer’s结淋巴细胞 (PPL)共培养体系 ,进一步研究该体系中的上皮细胞生理学特性。方法 :采用短路电流检测单层上皮细胞跨上皮电阻 (TER)的变化、半定量RT PCR方法检测上皮细胞间的紧密连接相关蛋白ZO 1和ZO 2mRNA的表达。结果 :①Caco 2细胞单层与PPL共培养的第 2天 ,无论是混合共培养还是上下共培养组的TER均与对照有统计学差异 (P <0 0 5 ) ;②同时上下共培养或混合共培养组在第 8天TER仍保持较高水平 ,与对照有统计学差异 (P <0 0 5 ) ;③在上下共培养和混合共培养组中 ,半定量RT PCR检测ZO 1mRNA的表达也均明显高于对照。结论 :Peyer’s结淋巴细胞 (PPL)可以较好地维持上皮屏障功能。

高原地区大鼠烫伤延迟复苏后Peyer氏结中Bax表达与T细胞凋亡和增殖的关系

目的:探讨不同海拔高度大鼠烫伤延迟复苏后回肠Peyer氏结中淋巴细胞凋亡率和促凋亡基因Bax与T细胞增殖的变化及意义。方法:Wistar大鼠132只,分别在1517m和3848m两个海拔高度随机分为延迟复苏组(DFR,n=30)、即时复苏组(IFR,n=30)和假伤组(SG,n=6),建立30%TBSAⅢ度烫伤模型,分别于伤后6、12、24、48和72h在回盲部向近心端10cm处切取回肠组织后,于肠壁上切取所有Peyer氏结,采用TUNEL、免疫组织化学染色与图像分析技术,观察回肠Peyer氏结中淋巴细胞凋亡率的变化、Bax和CD3+的表达。结果:各海拔高度DFR组凋亡率均高于IFR组,各复苏组伤后12h凋亡率最高;Bax的阳性表达位于Peyer氏结中淋巴细胞胞浆内,其表达强度各复苏组高于假伤组,随海拔高度上升Bax表达增强,高海拔组的表达强度高于低海拔组,各海拔高度DFR高于IFR组(P<0·05);CD3+的阳性表达部位位于Peyer氏结中T淋巴细胞胞膜,其表达强度各复苏组低于假伤组,随海拔高度上升CD3+表达减弱,伤后12h表达降至最低(P<0·05)。结论:高原地区烫伤延迟复苏后Bax表达增高可能是Peyer氏结T淋巴细胞凋亡率增加和T淋巴细胞数降低的重要原因之一。

高原地区大鼠烫伤延迟复苏后Peyer氏结中Bax表达及其意义

目的:探讨不同海拔高度大鼠烫伤延迟复苏后回肠Peyer氏结淋巴细胞凋亡和Bax基因表达的意义。方法:W istar大鼠132只,分别在海拔1 517 m和3 848 m随机分为延迟复苏组(DFR)、即时复苏组(IFR)和假伤组(SG),建立TBSA 30%Ⅲ度烫伤模型,分别于伤后6、12、24、48和72 h取材。采用TUNEL、免疫组化与图象分析技术,观察Peyer氏结中淋巴细胞凋亡率及Bax表达。结果:淋巴细胞凋亡率在各海拔高度DFR组和IFR组均高于SG组,随海拔高度上升凋亡率有所上升;DFR组凋亡率高于同海拔IFR组,海拔3 848 m各实验组分别高于海拔1 517 m(P<0.05);Bax表达强度变化平行于淋巴细胞凋亡率变化,但在伤后6 h和72 h海拔3 848 m各实验组分别高于海拔1 517 m(P<0.05)。结论:高原地区烫伤延迟复苏后Bax表达增高可能是Peyer氏结T淋巴细胞凋亡增加的重要原因之一。

肠内免疫营养对烫伤大鼠Peyer’s结淋巴细胞的影响

目的观察不同肠内营养物对大鼠烫伤后Peyer’s结T淋巴细胞亚群的影响。方法选取Wistar大鼠104只,随机分为饲料组(Chow组,n=32)、标准肠内营养组(EN组,n=32)、肠内免疫营养组(EIN组,n=32)和对照组(n=8)。除对照组外,其余3组均造成30%TBSAⅢ度烫伤模型,伤后早期Chow组、EN组、EIN组分别给予常规饲料、标准肠内营养制剂(能全力)和肠内免疫营养制剂(士强),于伤后第1、4、7、10天用流式细胞仪检测观察Peyer’s结淋巴细胞总数及其T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)的变化。对照组大鼠制成假烫模型,其标本检测数据作为其它3组制模前数据。结果制模后各时点Chow组和EN组Peyer’s结淋巴细胞总数均显著减少(P<0.01或P<0.05),而EIN组仅在制模后第1、4天显著减少(P<0.01或P<0.05),EIN组在制模后第7、10天均明显高于EN组(均P<0.05)。制模后第1、4天Chow组Peyer’s结CD3+细胞和CD4+细胞数均显著减少(P<0.05),而EN组和EIN组变化不明显;3组在伤后各时点CD8+细胞数均无显著变化(均P>0.05)。结论烧伤后早期肠内免疫营养支持能快速有效地促进Peyer’s结淋巴细胞增殖,有利于肠道免疫屏障的恢复。

地塞米松对脓毒血症鼠Peyer小结Tfh细胞的影响

目的:测定脓毒血症鼠Peyer小结内滤泡辅助性T细胞(T follicular helper,Tfh)的变化,分析地塞米松(dexamethasone,Dex)对脓毒血症Tfh细胞的可能作用。方法:昆明小鼠诱导脓毒血症模型,模型诱导成功后随机分2组,脓毒血症组(SE组,n=12)、脓毒血症+Dex处理组(DE组,n=12)。另设对照组(NC组,n=12)。测定血清白介素-6(interleukin-6,IL-6)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)水平。Peyer小结Ⅰ型1-磷酸鞘氨醇(Sphingosine 1-Phosphate 1,S1P1)、CXC趋化因子配体13(CXC chemokine ligand 13,CXCL13)免疫组化染色。Western blot分别检测Peyer小结IL-21、程序性死亡分子-1(programmed death 1,PD-1)、胞嘧啶脱氨酶(enzyme activation-induced cytidine deaminase,AID)蛋白的表达。流式细胞仪测定3组Peyer小结Tfh细胞占T淋巴细胞的百分率。结果:与NC组相比,SE组血清IL-6(19.7±5.20 vs 10.7±3.60 ng·L^(-1))、PCT(1.56±0.92 vs 0.31±0.09μg·L^(-1))、NGAL(0.44±0.11 vs 0.35±0.09 mg·L^(-1))升高(P<0.05或0.01),Peyer小结S1P1(0.22±0.06 vs 0.14±0.04)、CXCL13(0.25±0.07 vs 0.15±0.04)的表达增加(P<0.01),IL-21(0.60±0.08 vs 0.35±0.08)、PD-1(0.30±0.04 vs 0.20±0.05)、AID(0.23±0.05 vs 0.18±0.03)蛋白的表达亦升高(P<0.05或0.01),Tfh细胞占T淋巴细胞(8.30±2.00 vs 5.69 vs 1.64%)的百分率升高(P<0.01)。Dex治疗可降低SE鼠血清IL-6(19.7±5.20 vs 12.8±3.40 ng·L^(-1))、PCT(1.56±0.92 vs 0.71±0.44μg·L^(-1))水平(P<0.05或0.01),降低Peyer小结S1P1(0.22±0.06 vs 0.17±0.05)、CXCL13(0.25±0.07 vs 0.19±0.06)的表达(P<0.05或0.01),下调Peyer小结IL-21(0.60±0.08 vs 0.48±0.09)、PD-1(0.30±0.04 vs 0.26±0.06)、AID(0.23±0.05 vs0.19±0.04)蛋白的表达(P<0.05),降低Tfh细胞占T淋巴细胞(8.30±2.00 vs 6.56±1.59%)的百分率(P<0.05)。结论:Peyer小结Tfh细胞可能参与脓毒血症的发病机制,Dex抑制Peyer小结Tfh的活化,对Peyer小结微环境起保护作用。

早期药膳饮食对烫伤大鼠肠黏膜Peyer’s结T淋巴细胞及亚群的影响

背景:肠相关淋巴组织的组成部分Peyer’s结是肠黏膜免疫系统的重要诱导部位,含有参与免疫应答的各种免疫细胞,如CD4+T细胞、CD8+T细胞、B细胞等。目的:观察早期药膳饮食对烫伤大鼠肠道肠黏膜Peyer’s结T淋巴细胞及其亚群的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-04/2007-03在南昌大学一附属医院完成。材料:Wistar大鼠100只,随机分成药膳喂养组(n=30)、肉汤喂养组(n=30)、常规喂养组(n=30)、正常对照组(n=10)。药膳成分:党参20g、白术25g、茯苓25g、炙甘草15g、黄芪20g、薏苡仁20g、瘦猪肉200g。方法:药膳喂养组、肉汤喂养组、常规喂养组实施背部30%体表面积Ⅲ度烫伤,伤后早期分别给予药膳、肉汤和生理盐水,2mL/次,2次/d。正常对照组实施37℃假伤。主要观察指标:伤后3,7,14d检测大鼠肠黏膜Peyer’s结T淋巴细胞及亚群。结果:伤后3,7d,药膳喂养组、肉汤喂养组、常规喂养组Peyer’s结淋巴细胞总数、CD3+淋巴细胞的百分比及总数、CD4+百分比及总数、CD8+细胞的百分比及总数较正常对照组明显减少(P<0.05,P<0.01),至14d,药膳喂养组与正常对照组相比差异不显著。伤后3,7,14d药膳喂养组CD3+淋巴细胞的百分比及总数、CD4+百分比及总数较肉汤喂养组、常规喂养组明显升高(P<0.05)。伤后3,7d药膳喂养组Peyer’s结CD8+细胞的百分比及总数较肉汤喂养组、常规喂养组明显下降(P<0.05)。结论:早期药膳饮食有利于肠道Peyer’s结淋巴细胞的增生,并改善Peyer’s结T淋巴细胞亚群的比例,从而改善烫伤大鼠肠道免疫功能。

猪圆环病毒2型诱导小鼠Peyer's结淋巴细胞凋亡规律研究

为了用小鼠做模型探讨猪圆环病毒2型(PCV-2)诱导Peyer's结淋巴细胞凋亡的规律,本试验用PCV-2感染5周龄昆明系小鼠,分别在感染后第7天、第14天、第21天、第28天、第35天处死小鼠,取脾脏、腹股沟淋巴结、Peyer's结通过PCR鉴定PCV-2感染情况,同时从Peyer's结分离淋巴细胞,利用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测Peyer's结淋巴细胞的凋亡。结果显示,攻毒小鼠在感染后第7天、第14天、第21天、第28天和第35天5组中凋亡的细胞百分比分别是0.69%±0.13%、1.72%±1.00%、3.25%±0.59%、4.72%±0.30%和9.06%±0.96%。随着感染时间的延长,PCV-2感染小鼠的Peyer's结淋巴细胞凋亡数量逐渐增加。

Peyer结介导的小肠黏膜免疫及其物种间差异的研究进展

肠道不仅是消化吸收营养物质并进行新陈代谢的消化器官,也是抵抗病原体入侵的免疫器官,在机体免疫功能中扮演重要角色。Peyer结位于肠相关淋巴组织的诱导部位,是小肠黏膜免疫的重要组织,是产生IgA的主要来源。本文阐述了Peyer结的组织学特征,重点归纳了Peyer结主要的免疫细胞类型及其参与的黏膜免疫过程,并对人及主要模式动物Peyer结的研究现状进行综述,以期为后续深入研究Peyer结介导的黏膜免疫提供基础资料。

早期肠内谷氨酰胺补给对烫伤大鼠Peyer's结淋巴细胞亚群的影响

目的:观察烫伤大鼠伤后不同时间Peyer's结细胞总数及淋巴细胞亚群在营养支持影响下的变化形式,了解不同肠内营养支持对Peyer's结内细胞亚群的影响.方法:选取健康SD大鼠,随机分为标准肠内营养组(EN组,n=32)和谷氨酰胺补给组(EN+Gln组,n=32),制成烫伤动物模型(30%TBSAⅢ度烫伤),伤后早期分别给予标准肠内营养制剂(能全力)和标准肠内营养制剂+谷氨酰胺,于伤后第1、4、7、10天观察Peyer's结细胞总数及进行流式细胞仪细胞亚群(CD3+、CD45Ra+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+)分析.结果:烫伤后Peyer's结淋巴细胞总数在伤后1d明显减少,主要体现为B细胞总数的减少,EN+Gln组在伤后7d时淋巴细胞总数恢复至伤前水平[(5.29±1.03)×106vs(6.13±1.14)×106,P>0.05],而EN组没有恢复;EN+Gln组B细胞比例及总数在7、10d时与伤前比较无明显差异[(2.87±0.69)×106,(3.05±0.72)×106vs(3.29±0.62)×106,P>0.05],而EN组B细胞总数在10d时与伤前比较明显减少[(2.07±0.63)×106vs(3.29±0.62)×106,P<0.05];CD4+和CD8+细胞在伤后两组变化不明显.结论:肠内谷氨酰胺补给支持能快速有效地促进Peyer's结淋巴细胞增殖,尤其是B细胞,增加Peyer's结内淋巴细胞总数;有利于肠道免疫屏障的恢复和强化.

M细胞吞噬并转运甲醛化空弯菌进入Peyer集结

未免疫的成年小鼠在麻醉状态下剖腹,于Peyer淋巴集结处小肠结扎作肠,然后将甲醛化的空肠弯曲菌悬液(2×10~9CFU/ml)注入肠袢。1小时后取材,电镜观察,发现该菌特异性地粘附在Peyer淋巴集结表面上皮中的M细胞上,而且M细胞的微皱褶象■足样伸出捕捉细菌,细菌被包裹在M细胞胞质内的吞噬泡中,转运并释放到中央腔内的淋巴细胞之间,偶见被淋巴细胞吞噬。

早期肠内免疫营养对烫伤大鼠Peyer's结Th1/Th2细胞因子的影响

目的:观察伤大鼠烫伤后不同时间Peyer's淋巴细胞Th1细胞因子IL-2、IFN-γ及Th2细胞因子IL-4、IL-10产生的变化.方法:选取健康SD大鼠随机分为标准肠内营养(EN)组和免疫营养(EIN)组,制成烫伤动物模型(30%TBSAⅢ度烫伤模型),伤后早期分别给予标准肠内营养制剂(能全力)和肠内免疫营养制剂,于伤后1、4、7、10d取回肠Peyer's结,分离并体外培养Peyer's结淋巴细胞24h,检测Th1/Th2细胞因子分泌的变化.结果:烧伤后1d时两组IL-2、IFN-γ的表达明显上升(19.7±7.3vs92.6±21.3、97.6±25.4;63.7±27.3vs279.4±89.7、292.7±97.4;均P<0.01),EIN组两者分别在10d及4、7、10d时明显低于EN组(41.6±16.5vs55.9±14.4;96.7±31.2vs182.6±52.9,73.9±26.5vs129.9±48.9,71.6±26.9vs104.3±31.7;P<0.01或0.05);EIN组在4、7、10d时IL-4、IL-10表达高于EN组(169.3±57.7vs94.9±28.6,157.6±74.3vs65.2±32.4).提示EIN能促进Peyer's结淋巴细胞Th2细胞因子IL-4、IL-10的表达.结论:烫伤能引起Peyer's结内细胞细胞因子IL-2、IFN-γ的表达明显上升,肠内免疫营养支持通过促进Th2细胞因子的分泌纠正局部Th2向Th1漂移的免疫偏差,改善局部的体液免疫,有利于肠道免疫屏障的恢复和强化.

肝硬化大鼠模型Peyer集合淋巴结淋巴细胞表达的研究

背景:肠黏膜免疫屏障功能与肝硬化时肠道细菌易位的发生密切相关。Peyer集合淋巴结是肠黏膜免疫屏障功能的重要组成部分,是肠黏膜免疫反应的诱导和活化部位。目的:研究肝硬化大鼠模型Peyer集合淋巴结淋巴细胞的表达,了解肝硬化时肠黏膜免疫屏障功能的改变。方法:以皮下注射40%CCl_4制备肝硬化大鼠模型,机械分离Peyer集合淋巴结淋巴细胞,分别标记小鼠抗大鼠CD3、CD4、CD8单克隆抗体,以流式细胞仪检测T细胞及其亚群的表达情况。结果:肝硬化模型组Peyer集合淋巴结中CD3^+细胞(总T细胞)比例较正常对照组显著降低(24.8%±2.6%对36.1%±2.0%,P<0.01)。与正常对照组相比,肝硬化模型组CD4^-CD8^+、CD4^+CD8^-细胞比例显著降低(P<0.05和P<0.01),CD4^-CD8^-细胞比例显著升高(P<0.01),CD4^+CD8^+细胞比例无明显变化。结论:肝硬化大鼠模型Peyer集合淋巴结叶中CD3^+细胞比例及其CD4^+CD8^-、CD4^-CD8^+亚群比例显著降低,提示肝硬化时Peyer集合淋巴结淋巴细胞免疫功能降低,可能导致肠黏膜免疫屏障功能的改变。