植物药金边瑞香对小鼠肠道Peyer’s结的影响

目的:采用环磷酰胺所致小鼠肠道黏膜相关淋巴组织损伤模型,观察植物药金边瑞香浸膏对小鼠肠道Peyer’s结的影响。方法:实验于2005-01/2005-08在赣南医学院分析实验室完成。44只昆明种小鼠随机分为正常组、金边瑞香组、金边瑞香+环磷酰胺组及环磷酰胺组4组,每组11只,给予正常组小鼠生理盐水灌胃,每天1次,每次0.02mL/g,连续7d;环磷酰胺组小鼠第7天1次腹腔注射100mg/kg环磷酰胺,其他同正常组;金边瑞香组用金边瑞香浸膏(浓度400g/L,由江西省中医药研究院提供,含生药量5g/mL,临用时用蒸馏水稀释至所需浓度,批号:050310)灌胃,每天1次,每次0.02mL/g,连续7d;金边瑞香+环磷酰胺组,方法同金边瑞香组和环磷酰胺组。第8天麻醉下脱颈椎处死全部动物,立即小心取出全小肠,肉眼观察其形态并计数小肠Peyer’s结的数量、随后用生理盐水冲洗肠腔,用针头小心取出Peyer’s结按常规方法制备细胞悬液后计数细胞。观察正常组、金边瑞香组、金边瑞香+环磷酰胺组及环磷酰胺组4组小鼠Peyer’s结,计数Peyer’s结细胞总数,比较Peyer’s结的数量及细胞数。结果:①正常组、金边瑞香组、金边瑞香+环磷酰胺组Peyer’s结的数目及结内细胞总数明显高于环磷酰胺组[(5.818±1.991),(7.273±1.678),(6.364±1.690),(3.818±0.874);(4.223±1.197)×109L-1,(6.658±3.758)×109L-1,(6.884±1.807)×109L-1,(1.451±1.024)×109L-1,F=14.28,9.044,P<0.05～0.001]。②金边瑞香+环磷酰胺组、金边瑞香组及正常组之间两两比较Peyer’s结的数目及结内细胞总数差别无统计学意义(P>0.05)。结论:金边瑞香可对抗环磷酰胺诱导的小鼠肠道Peyer’s结的损伤,提示金边瑞香可能对肠道黏膜免疫具有改善作用。

早期药膳饮食对烫伤大鼠肠黏膜Peyer’s结T淋巴细胞及亚群的影响

背景:肠相关淋巴组织的组成部分Peyer’s结是肠黏膜免疫系统的重要诱导部位,含有参与免疫应答的各种免疫细胞,如CD4+T细胞、CD8+T细胞、B细胞等。目的:观察早期药膳饮食对烫伤大鼠肠道肠黏膜Peyer’s结T淋巴细胞及其亚群的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-04/2007-03在南昌大学一附属医院完成。材料:Wistar大鼠100只,随机分成药膳喂养组(n=30)、肉汤喂养组(n=30)、常规喂养组(n=30)、正常对照组(n=10)。药膳成分:党参20g、白术25g、茯苓25g、炙甘草15g、黄芪20g、薏苡仁20g、瘦猪肉200g。方法:药膳喂养组、肉汤喂养组、常规喂养组实施背部30%体表面积Ⅲ度烫伤,伤后早期分别给予药膳、肉汤和生理盐水,2mL/次,2次/d。正常对照组实施37℃假伤。主要观察指标:伤后3,7,14d检测大鼠肠黏膜Peyer’s结T淋巴细胞及亚群。结果:伤后3,7d,药膳喂养组、肉汤喂养组、常规喂养组Peyer’s结淋巴细胞总数、CD3+淋巴细胞的百分比及总数、CD4+百分比及总数、CD8+细胞的百分比及总数较正常对照组明显减少(P<0.05,P<0.01),至14d,药膳喂养组与正常对照组相比差异不显著。伤后3,7,14d药膳喂养组CD3+淋巴细胞的百分比及总数、CD4+百分比及总数较肉汤喂养组、常规喂养组明显升高(P<0.05)。伤后3,7d药膳喂养组Peyer’s结CD8+细胞的百分比及总数较肉汤喂养组、常规喂养组明显下降(P<0.05)。结论:早期药膳饮食有利于肠道Peyer’s结淋巴细胞的增生,并改善Peyer’s结T淋巴细胞亚群的比例,从而改善烫伤大鼠肠道免疫功能。

肠内免疫营养对烫伤大鼠Peyer’s结淋巴细胞的影响

目的观察不同肠内营养物对大鼠烫伤后Peyer’s结T淋巴细胞亚群的影响。方法选取Wistar大鼠104只,随机分为饲料组(Chow组,n=32)、标准肠内营养组(EN组,n=32)、肠内免疫营养组(EIN组,n=32)和对照组(n=8)。除对照组外,其余3组均造成30%TBSAⅢ度烫伤模型,伤后早期Chow组、EN组、EIN组分别给予常规饲料、标准肠内营养制剂(能全力)和肠内免疫营养制剂(士强),于伤后第1、4、7、10天用流式细胞仪检测观察Peyer’s结淋巴细胞总数及其T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)的变化。对照组大鼠制成假烫模型,其标本检测数据作为其它3组制模前数据。结果制模后各时点Chow组和EN组Peyer’s结淋巴细胞总数均显著减少(P<0.01或P<0.05),而EIN组仅在制模后第1、4天显著减少(P<0.01或P<0.05),EIN组在制模后第7、10天均明显高于EN组(均P<0.05)。制模后第1、4天Chow组Peyer’s结CD3+细胞和CD4+细胞数均显著减少(P<0.05),而EN组和EIN组变化不明显;3组在伤后各时点CD8+细胞数均无显著变化(均P>0.05)。结论烧伤后早期肠内免疫营养支持能快速有效地促进Peyer’s结淋巴细胞增殖,有利于肠道免疫屏障的恢复。

粗根荨麻多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠肠道派氏结细胞表型及TLR4的影响

目的研究粗根荨麻多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠肠道派氏结(Peyer's patches,PPs)细胞表型及TLR4(Toll-like receptors 4,TLR4)的影响。方法采取肉眼计数的方法计数小鼠肠道Peyer's结数目,采用流式细胞(FCM)技术检测Peyer's结淋巴细胞表型,免疫组化法检测小鼠肠道TLR4的蛋白表达量。结果环磷酰胺(cyclophosvnamide,CY)诱导的免疫抑制模型肠道Peyer's结数目、Peyer's结中淋巴细胞比例和活化程度、肠道TLR4蛋白表达都受到显著的降低,口服粗根荨麻多糖使免疫抑制小鼠肠道黏膜Peyer's结数目、CD3^+、CD19^+淋巴细胞、CD69^+淋巴细胞比例和活化水平、肠道TLR4蛋白表达量升高,接近正常。结论粗根荨麻多糖能提高环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的肠道免疫功能,对小鼠肠道黏膜免疫系统具有上调作用。

新型大麻制剂O-1602对急性胰腺炎小鼠肠道免疫及菌群的影响

目的研究新型大麻制剂O-1602对急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)小鼠肠道免疫及菌群紊乱的干预作用。方法成年C57/BL6小鼠21只,雌雄各半,随机均分为AP模型组(AP组,n=7)、AP治疗组(AP^+O-1602组,n=7)及正常对照组(control组,n=7)。AP模型组、AP治疗组以雨蛙肽腹腔注射(50μg/kg)复制AP模型,并分别给以腹腔注射药物溶剂或O-1602溶液(10 mg/kg);正常对照组小鼠用相同方式获得等量生理盐水及药物溶剂注射。3组动物均于末次注药3 h后麻醉处死,收集其血液、小肠和结肠及肠道Peyer’s结。检测和分析肠道细菌总数和主要类别、Peyer’s结中T淋巴细胞及其亚群的变化;检测血浆淀粉酶及细胞因子IL-10、MCP-1水平的变化。结果与对照组相比,AP小鼠肠道细菌总数、主要亚群,尤其是大肠杆菌、肠球菌的数量、血浆淀粉酶活性、IL-10及MCP-1水平都有明显升高(P<0.05或P<0.01);新型大麻制剂O-1602可在一定程度上逆转AP时的上述异常变化(P<0.05)。各组肠道Peyer’s结数量无明显差异,但AP小鼠Peyer’s结中CD3^+、CD4^+T淋巴细胞百分比较对照组明显降低(AP组P<0.01,AP^+O-1602组P<0.05),CD4^+/CD8^+较对照组也有所降低,但差异无统计学意义。结论 O-1602对雨蛙肽诱导的小鼠急性胰腺炎具有一定拮抗作用,其机制可能与其促进肠道细菌的清除、调节肠道T淋巴细胞功能、抑制炎症反应等有关。