朊病毒蛋白的三维结构

朊病毒病是一类引起人和动物的中枢神经组织退化的疾病,属于蛋白质构象病,涉及蛋白质分子肽链的错误折叠和空间结构的变化。这类疾病的临床表现为进行性共济运动失调、震颤、姿势不稳、痴呆或知觉过敏、行为反常等中枢神经系统症状,100%死亡。人们期望通过对朊病毒蛋白的三维结构的研究来了解其致病机制,以达到预防和治疗的目的。

疯牛病与新型克-雅病研究进展

朊病毒是一种不含核酸的感染性蛋白颗粒,能导致哺乳动物中枢神经系统组织的病变,其繁殖是通过构象变构由正常型(PrPC)转变为致病型(PrPSc)而完成的。这两种结构异型体来源于同一基因,具有相同的氨基酸序列,但其二级和三级结构不同。作者就疯牛病和新型克-雅病的病原、结构特征、诊断与防治作此综述。

人朊蛋白不同N-糖基化修饰突变体的构建及其在哺乳动物细胞中表达

构建并表达人朊蛋白N-糖基化修饰位点突变的真核表达载体,有助于进一步研究朊蛋白N-糖基化修饰的生物学功能。定点突变野生型人朊蛋白基因PRNP,将获得的突变体亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1中,并在人宫颈癌细胞株HeLa中瞬时表达各种朊蛋白糖基化修饰位点突变体,利用免疫印迹和糖苷酶消化等糖蛋白分析方法鉴定表达产物的糖基化形式。经Western blot鉴定,野生型和突变型朊蛋白表达产物出现不同形式的泳动特征,分别出现特异性糖基化修饰的多个条带,单糖基化修饰的两条条带和无糖基化修饰的一条条带。经PNGase F糖苷酶消化,野生型和糖基化单点突变型表达产物均能被糖苷酶消化,其分子量下移,去糖基化突变型表达产物的分子条带位置不变。通过突变野生型人朊蛋白基因PRNP的N-糖基化修饰位点,获得单糖基化修饰和去N-糖基化修饰的6种人朊蛋白突变体,并能够在HeLa细胞株中瞬时表达单糖基化修饰和去N-糖基化修饰朊蛋白,为进一步研究朊蛋白的相关功能建立良好基础。

入侵检测系统描述语言的分析

介绍了入侵检测系统描述语言的概念和理想攻击描述语言所具备的特性,对几种典型的攻击描述语言进行了详细的分析和比较,探讨了描述语言发展方向,为开发更为完善的语言打好基础。

传染性蛋白的“负面”和“正面”(1)

蛋白质是生命活动的执行者,除了催化数千种化学反应,蛋白质还在生物的身体结构、信息传递、生物防卫等方面起不可或缺的作用。不同的生理功能不仅需要不同的蛋白质,还需要蛋白质分子形成各自的结构和形状。而蛋白质分子是由不分支的肽链组成的,从新合成的肽链到具有特定三维结构和有生理功能的蛋白质,需要复杂精细的肽链折叠过程。由于各种折叠方式之间的能量差别甚小,许多因素,包括自身浓度的变化、分子中一部分肽链缺失或者延长、基因突变引起的氨基酸残基改变、环境中酸碱度改变、离子浓度变化、周围的分子环境变化等,都能使肽链的折叠方式发生改变。肽链折叠方式改变的后果之一,就是形成特殊的β-折叠:肽链中彼此平行而又方向相反的区段以氢键联系,形成片状结构,多个分子的这种片状结构还能逐层叠加,形成纤维状的聚合物。不仅如此,这样的"异常"结构还会使"正常"的蛋白也改变折叠方式,变成和自己一样的结构,因此这些"异常"结构的蛋白质具有"传染性",即能复制自己的结构,统称"传染性蛋白",词源是从英文的Prion一词意译而来。在许多情况下,这种"折叠错误"的蛋白会丧失原有的生理功能,且其聚合物对细胞有害,引起疾病,包括疯牛病、痒羊病(Scrapie)、人类的克-雅氏病、老年痴呆、帕金森氏症、杭廷顿氏症等中枢神经系统病症。除了这些疾病,折叠错误的蛋白还可沉积在身体各处,引起各种"淀粉样变性病"(Amyloidosis)。另一方面,Prion型的蛋白由于其稳定性和特殊结构,又可获得新的生理功能,在生物材料的建造,物质储存、作为黑色素和牙釉质合成时的模板、动物的长期记忆,以及免疫系统的信息传输中发挥重要作用,即一些传染性蛋白也能发挥正常的、甚至不可替代的生理功能。本文以3个部分分别介绍传染性蛋白被发现的历史和形成机制、传染性蛋白所引起的疾病(负面),以及传染性蛋白执行的正常生理功能(正面)。

朊病毒病实验动物脑组织PrP^Sc样本库的建立

目的建立朊病毒病实验动物脑组织检测样本库，检测其在特定保存条件下的稳定性，以用于动物和人朊病毒病诊断技术的评估和考核。方法选用30只经颅内注射感染羊瘙痒因子263K的仓鼠和30只正常仓鼠，每只分别制备10％、1％和0．5％3种浓度的脑组织匀浆，分装冷冻保存。以Western Blot方法确定脑组织匀浆中PrP^Sc的存在情况，并分别在建库半年和3年检测PrP^Sc的稳定性。结果30只感染仓鼠10％脑组织匀浆全部可检出PrP^Sc，1％脑组织匀浆有26份为PrP^Sc阳性，0．5％脑组织匀浆有19份为PrP^Sc阳性。半年及3年后复检，PrP^Sc阳性检出率基本不变。所有正常仓鼠脑匀浆均为PrP^Sc阴性。结论建立了稳定性良好的含有90份PrP^Sc阳性标本和90份PrP^Sc阴性样本的朊病毒病实验动物脑组织榆测样本库。

多金属氧化物立方纳米晶体的可控合成及其与朊蛋白的特异性相互作用

研究表明,在有机小分子二甲基甲酰胺(DMF)的调控作用下Keggin型多金属氧化物在水溶液中形成规则的纳米立方体,随温度改变该纳米立方体转变为空心立方结构.该多金属氧化物纳米立方体可以与朊蛋白(PrPC)相互作用,产生显著的光散射信号增强,且增强程度在3.36～840ng·mL-1范围内与朊蛋白浓度呈线性关系.