Ph^+和Ph^-CML病人外周血TCR Vβ T细胞分布特点

为了解Ph+ 和Ph-慢性粒细胞白血病 (CML)病人外周血TCRVβ亚家族T细胞的分布特点 ,利用RT PCR分别扩增 13例CML病人 (Ph+ b3a2型 5例 ,Ph+ b2a2型 5例 ,Ph-型 3例 )外周血单个核细胞的TCRVβ的2 4个亚家族基因片段 ,了解病人各Vβ亚家族的利用情况。研究结果 :发现与正常人有所不同 ,病人仅存在部分TCRVβ亚家族T细胞 ,Ph+ b3a2型CML表达 4 - 16 (平均 10 .2 )个Vβ亚家族 ,Ph+ b2a2型CML表达 8- 11(平均8.8)个Vβ亚家族 ,而Ph-者表达 5 - 6 (平均 5 .7)个Vβ亚家族。各病人表达的Vβ亚家族分布有所不同 ,在Ph+(b3a2型 )全部病人表达Vβ10和Vβ16 ,其次为Vβ9和Vβ2 2 ;Ph+ (b2a2型 )除与Ph+ (b3a2型 )相同全部病人表达Vβ10和Vβ16外 ,还全部表达Vβ2 4 ,其次为Vβ8;而Ph-者全部表达Vβ2 4 ,其次为Vβ3,Vβ10 ,Vβ13和Vβ2 2。结论 :提示Ph+ 和Ph-CML病人外周血的TCRVβ亚家族T细胞存在倾斜性分布现象 ,不同类型CML病人T细胞的TCRVβ选择性利用有所不同 。

Ph^+急性淋巴细胞白血病与慢性粒细胞白血病急淋变的临床特征分析

目的比较Ph+急性淋巴细胞白血病(ALL)与慢性粒细胞白血病(CML)急淋变的临床特征。方法回顾性分析Ph+ALL患者24例和CML急淋变患者28例的临床资料,比较两组患者的临床资料、细胞免疫表型分析结果以及临床疗效。结果 CML急淋变组肝肿大和脾脏肿大比例显著高于Ph+ALL组(P<0.05或P<0.01)。CML急淋变组WBC>10×109/L比例显著高于Ph+ALL组(P<0.05)。治疗前两组融合基因拷贝数差异无统计学意义(P>0.05)。16例Ph+ALL患者治疗后达到缓解,Bcr/abl融合基因拷贝数平均(0.4±0.1),10例CML急淋变患者达到血液缓解,Bcr/abl融合基因拷贝数平均(50.1±15.4),两组比较差异有高度统计学意义(P<0.01)。Ph+ALL组CR发生率显著高于CML急淋变组(P<0.05),平均生存率显著长于CML急淋变组(P<0.01)。结论 Ph+ALL与CML急淋变具有不同的临床特征和不同的遗传性特征。Ph+ALL诱导完全缓解后,Ph染色体呈阴性,而CML急淋变诱导缓解后Ph染色体仍然存在。Ph+ALL完全缓解率高于CML急淋变患者,平均生存时间长于CML急淋变患者。

RT-PCR一步法检测慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因

应用RT PCR一步法检测了 42例慢性粒细胞白血病 (CML)患者的bcr/abl融合基因 ,均显示bcr/abl基因阳性 ,其中2 1例为 16 8bp扩增带 ,18例为 93bp扩增带 ,3例同时具有 16 8bp和 93bp二条扩增带。bcr/abl融合基因检测 ,对CML的诊断、治疗及预后判断均有重要意义。RT PCR一步法特异性好 ,敏感性高 ,简单快速 ,可节省试剂 ,值得推广应用。

211例慢性粒细胞白血病染色体核型分析

目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)中细胞遗传学的特点和不同病期染色体核型演变的特点及其意义。方法采用骨髓直接法和短期培养法制备染色体,应用R显带技术对211例CML患者进行染色体核型分析。结果Ph+患者占91.5%,Ph-患者占5.7%。在Ph+患者中,93.8%为典型Ph染色体阳性,6.2%为变异型Ph染色体阳性。19.7%的患者发生染色体核型演变。急变期、加速期和慢性期染色体核型演变的发生率分别为66.7%、50%、2.1%。结论染色体核型分析对慢粒的诊断及预后具有重要的意义,CML病程中定期、多次进行染色体检测有助于早期诊断CML急变。

c-cbl反义RNA抑制K562细胞的增殖

为探讨原癌基因c-cbl对CML细胞增殖的影响,我们用RT-PCR克隆了包括5′端非编码区的人类c-cbl基因部分序列,将之反向插入pcDNA3载体,并转染K562及NB4细胞。经MTT实验、半固体集落培养和流式细胞术观察细胞增殖能力的改变。结果表明,限制性酶切分析及序列测定证明所克隆的基因核苷酸序列正确,MTT实验显示反义载体转染K562细胞生长明显受抑,24、48及72小时增殖抑制率分别为30.07％,42.53％和55.75％(P值均<0.001),FCM-BrdU法测定的细胞倍增时间之比为1∶1.87(P<0.02),细胞集落形成抑制率为33.01％,反义转染基因NB4细胞增殖率无改变。上述结果直接地证明了c-cbl在CML细胞生长中的重要性。

罕见的ins(22；9)t(9；13)／Ph-慢性髓系白血病实验研究

本文报告1例罕见的具有ins(22;9)t(9;13)的Ph(-)慢性髓系白血病。骨髓细胞经24小时短期培养法制备染色体标本,采用G显带技术进行核型分析;用9号、22号全染色体涂染探针进行染色体涂染;用LSI bcr/abl双色双融合探针进行FISH分析;用实时荧光定量PCR法检测bcr/abl融合基因转录本及其拷贝数。结果表明,染色体核型为45,XX,der(9)t(9;13)(q34;q10),-13[20],abl基因插入到der(22)形成插入性的bcr/abl基因重排;实时荧光定量PCR检测到bcr/abl融合基因。结论:插入性的bcr/abl基因重排是t(9;22)的一种罕见的变异类型,可用分子学方法检测,但全染色体涂染及常规的染色体显带分析容易导致误诊。

258例慢性粒细胞性白血病的临床和实验研究

目的运用细胞遗传学和分子遗传学方法,对本院258例慢性粒细胞性白血病(CML)患者进行分析,探讨CML中Ph染色体的有关特点及临床意义。方法采用骨髓直接法和短期培养法制备染色体,应用R显带技术对258例CML患者进行核型分析;对其中22例患者运用双色双融合探针(DC-DF-bcr/abl)进行FISH检测Ph易位信号特征。结果11例(4.26%)为Ph(-);247例(95.74%)为Ph(+),其中15例(6.07%)为Ph染色体变异易位。结论染色体核型分析有助于慢粒的诊断和鉴别诊断、判断疗效;FISH检测能给予精确的分子诊断。CML变异性Ph易位广泛累及除9,22外多条染色体。

慢性粒细胞白血病骨髓细胞染色体畸变的研究

报道４５例慢性粒细胞白血病的骨髓细胞染色体检查结果．检出Ｐｈ１染色体阳性患者４２例，其中标准型Ｐｈ１染色体畸变３７例，标准型Ｐｈ１伴其它染色体易位者２例；双Ｐｈ１染色体者１例，变异Ｐｈ１染色体２例；还检出Ｐｈ１染色体阴性患者３例，其中２例为其它染色体畸变类型．结论：Ｐｈ１染色体是慢性粒细胞白血病的独立的细胞遗传学标志，双Ｐｈ１及标准型Ｐｈ１之外的染色体畸变可能预示着进入急变期，但变异Ｐｈ１染色体并不加快慢性期向急变期的转变．

慢性髓系白血病急髓变临床回顾性分析

目的:单中心回顾性分析慢性髓系白血病急髓变患者的临床表现、实验室检查特征及预后。方法:收集解放军总医院2011年6月至2018年5月间10例慢性髓系白血病急髓变患者临床资料,分析临床特征,实验室检查及长期生存情况。结果:10例慢性髓系白血病急髓变患者中位年龄32.5(23-73)岁;9例有慢性病史,中位慢性期17(4-84)个月。10例患者均有脾脏肿大,B超结果显示中位脾厚5.2(4-7.8)cm,中位脾长14.6(11.4-19.8)cm;慢性髓系白血病急髓变时中位外周血白细胞数41.705(11.9-344.41)×10^9/L,中位血小板数159(13-2326)×10^9/L。10例患者均可检测到Ph+染色体及BCR-ABL1融合基因。染色体检查结果中,5例可检测到附加染色体异常,1例为低二倍体,2例为复杂核型。10例患者中有6例进行了ABL1突变检测,其中2例检测到ABL1T315I突变;基因检查中1例合并P53缺失。中位随访时间10.5(0.2-78)个月。5例联合或不联合酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)TKI的化疗并序贯进行异基因造血干细胞移植,移植前3例达第二个慢性期(CP2),其中2例无进展存活至今(分别为移植后67和69个月),1例死于移植相关疾病(移植后7个月脑出血);2例在移植前为NR,移植后均死于疾病复发进展(分别移植后1和3个月)。5例联合或不联合TKI的化疗未行造血干细胞移植的患者均死于疾病进展,中位活存时间6(0.2-22)个月。结论:慢性髓系白血病急髓变患者行联合TKI化疗诱导达CP2状态,序贯异基因造血干细胞移植可延长患者生存期。

102例慢性粒细胞白血病的遗传学诊断分析

目的 :观察Ph染色体 ,bcr/abl融合基因与慢性粒细胞白血病 (CML)的诊断指标。方法 :染色体制备采用骨髓细胞直接法和短期培养法 ,bcr/abl融合基因分析用RT -nest-PCR法。结果 :10 2例病例中 ,91例Ph染色体及bcr/abl融合基因均为阳性 ,Ph-、bcr/abl+6例 ,Ph-、bcr/abl-5例。结论 :Ph染色体及bcr/abl融合基因均为ML重要的诊断指标 。

慢性粒细胞白血病167例染色体核型分析

目的:探讨慢性粒细胞白血病(CML)患者不同阶段染色体核型变化对疾病诊断、治疗、进展及预后的意义。方法:回顾性选取2019年7月至2021年12月就诊于空军军医大学第一附属医院的167例初诊CML患者,抽取骨髓,采用24h短期培养法制备染色体标本,然后用R显带技术进行染色体核型分析,观察其遗传学特点及意义,分析染色体变异易位及附加染色体异常与经典的Ph+CML在疾病的诊断、治疗中的差异。结果:167例CML患者染色体分析中,无分裂相患者7例(4.2%),Ph+患者154例(92.2%),Ph-患者6例(3.6%)。154例Ph+患者中,126例(81.8%)为典型Ph阳性,28例(18.2%)为变异易位或伴有附加染色体异常,涉及+8、+Ph、-Y、der(17)、del(3p)、del(15q)、del(11p)、add(21q)、add(2q)等,以+8、+Ph、-Y、der(17)为主。结论:在CML染色体核型分析中,Ph染色体是其遗传学标志,染色体核型复杂程度与CML治疗、进展及预后之间有密切联系,染色体的复杂程度越高,患者预后可能越差。

Ph染色体与bcr/abl融合基因的检测在CML中的临床意义

目的 :观察 Ph染色体、bcr/ abl融合基因与慢性粒细胞白血病 (CML)诊断、疗效、预后的关系。方法 :用姬姆萨 G带显带法和反转录筑巢式聚合酶链反应 (RT- nest- PCR)对 41例初、复治 CML 患者的骨髓标本进行了分析。将 Ph染色体及 bcr/ abl融合基因均为阳性的慢性期患者随机分成二组 ,分别以干扰素 - α(IFN- α)、羟基脲 (HU)及乌苯美司 (Bestatin、BS)、HU治疗 ,6月后复查核型及 bcr/ abl融合基因。结果 :41例病例中 36例 Ph染色体及 bcr/ abl融合基因均为阳性 ,Ph—、bcr/ abl+ 5例 ,其中 b3a2 转录本 2 9例 ,b2 a2 转录本 12例 ;在可评价的 2 0例病例中 ,两个治疗组各 10例 ,IFN- α治疗组全部达 CHR,2例获得部分细胞遗传学反应 (PGR) ,5例获微小细胞遗传学反应 (Mi GR) ;3例无细胞遗传学反应 ;BS治疗组全部达 CHR,6例达 Mi GR;全部病例均未获分子生物学反应 ;二组治疗均使 CML 获 Ph染色体量的下降 (P<0 .0 1) ,二组病例下降程度无差异 (P>0 .0 5 )。结论 :Ph染色体及 bcr/ abl融合基因均为 CML 重要的诊断指标 ,二者相结合意义更大 ;Ph染色体的量及其变化可判断疗效及预后 ;干扰素及乌苯美司治疗组均取得较好疗效 ,均能使患者获细胞遗传学反应 ,其细胞遗传学疗效无明显差别。

BCR／ABLDCDF—FISH信号特征与染色体核型的关系及其在慢性粒细胞白血病中的意义

目的探讨慢性粒细胞白血病（CML）BCR／ABL DCCF—FISH的信号特点及其与染色体核型的关系。结果使用BCR／ABL的DCDF探针对65例慢性粒细胞白血病骨髓标本进行荧光原位杂交及染色体核型检查。结果65例CML核型43例Ph阳性，1例阴性，其余21例未行核性检查或无可分析分裂相；FISH结果65例均为BCR／ABL阳性，其中9例伴ASS基因缺失，5例复杂易位，1例＋Ph伴ASS基因缺失。结论传统核型与DCDF-FISH，应互相结合，方可对遗传学特征作出更准确分析。