phaC1、phaC2基因双价植物表达载体的构建及其转基因烟草的获得

利用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,从类产碱假单胞菌YS1(PseudomonaspsuedoalcaligeneseYS1)染色体DNA中扩增并克隆了调控短链与中链PHA生物合成的两个关键酶基因 :phaC1、phaC2基因。同时利用套叠PCR技术对 phaC1基因进行了改造 ,经过基因拼接构建了植物表达载体pC3C1(嵌合phaC1)、pC3C2 (嵌合 phaC2 )和 pC3C1C2 (嵌合 phaC1和 phaC2双基因 )。将构建好的嵌合 phaC1和phaC2双基因的植物高效表达载体 pC3C1C2 ,用冻融法转入根癌土壤杆菌 (AgrobacteriumtumefaciensEHA10 5 )并且通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草 (NicotianatobacumHonghuadajinyuan)。 2个月后获得了一批卡那霉素抗性烟草植株 ,抗性植株大田生长表型正常 ,生长速度相对缓慢。抗性植株经过PCR、PCR Southern、Southern检测初步确定有 32 %烟草稳定整合了 phaC1和 phaC2。用氯仿 -次氯酸钠直接从部分Southern检测阳性转化植株中抽提纯化得到PHA ,在产物合成水平确证有 2 5 6

生物酶强化厌氧消化去除污泥中的PhACs

为降低污水污泥中药理活性化合物(Ph ACs)产生的环境风险,利用生物方法强化污泥厌氧消化,提高其去除效果.以CFA(氯贝酸)、TCS(三氯生)、DCF(双氯芬酸)、CBZ(卡马西平)4种典型的Ph ACs为目标污染物,利用气相色谱-质谱联用仪(GCMS)定量分析污泥中的目标物,探究外加生物酶联合污泥厌氧消化法强化对Ph ACs的作用效果.结果表明,随着SRT(污泥停留时间)的增大,目标物的去除率有一定程度的增大,特别是在高温条件下,当SRT由7 d增至20 d时,CFA的去除率增长了45%;木瓜蛋白酶对中高温系统中CBZ的去除效果最佳,分别为63.8%和67.5%,同时对4种目标物总的去除率最高,分别为57.3%和61.8%;添加溶菌酶试验中,4种目标物去除效果差异较大,中温、高温系统中对TCS的去除效果最佳为81.7%和80.9%,去除效果最差的是CBZ,去除率为40.4%和33.5%;纤维素酶处理中,4种目标物的去除率均小于60%.混合生物酶试验中,高温条件下更易去除Ph ACs.研究显示,生物酶强化污泥厌氧消化能有效去除污水污泥中的Ph ACs.

Ni/PHAC催化甲醇羰基化合成乙酸工艺研究

以自制的酚醛树脂基活性炭(PHAC)负载镍为催化剂、碘甲烷为助催化剂,研究了在连续固定床反应器中催化甲醇羰基化合成乙酸的反应。探讨了反应温度、液体进料空时、甲醇与一氧化碳配比及加水量等反应工艺条件对甲醇羰基化反应及乙酸收率的影响,优化了反应的工艺条件。结果表明:反应工艺条件对甲醇羰基化反应及乙酸的收率影响较大,在系统压力为1.0MPa,反应温度558K,液体进料空时为10gcat (mol h-1) -1, V(H2O):V(CH3OH)=3:100, n(CO):n(CH3OH):n(CH3I)=80:40:1的条件下乙酸收率最高达到了67.1%,而羰基化产物总收率可以达到79.1%,甲醇转化率可以达到93.8%,羰基化产物总收率和乙酸收率明显高于文献报道的同类催化剂。

phaG和phaC基因在烟草叶绿体中的转化及其遗传分析

中长链羟基脂肪酸聚酯(medium-chain-length-PHAs,mcl-PHAs)属于微生物聚酯。羟酰-CoA-ACP-转移酶和II型PHA合酶是mcl-PHAs生物合成途径中的两个关键酶。将编码羟酰-CoA-ACP-转移酶的基因phaG与水稻叶绿体psbA基因的启动子和终止子连接构建表达盒RpsbA-pro-phaG-RpsbA-ter,将II型PHA合酶的基因phaC与水稻叶绿体16SrRNA基因的强启动子Prrn及rbcL基因的终止子连接构建表达盒prrn-phaC-RrbcL-ter,连同壮观霉素抗性基因aadA表达盒prrn-aadA-TpsbA-ter一起克隆进烟草叶绿体基因组同源片段rbcL和accD之间,得到烟草叶绿体表达载体pTGC。用包裹有质粒pTGC的金粉子弹轰击烟草无菌苗叶片,经壮观霉素筛选后获得6株叶绿体型转基因植株。对T0代和T1代转基因植株进行PCR检测和Southern blot分析表明,外源基因已整合进烟草叶绿体基因组中,且T1代转基因植株已同质化。RT-PCR分析结果证实外源基因已在转录水平上表达。转基因植株的自交及正反交结果表明,外源基因在转基因后代中能够稳定遗传,遗传方式遵循母性遗传规律,不存在转基因的花粉漂移现象。

基于芯片MC3PHAC的三相工频逆变器的研制

利用芯片MC3PHAC的特有功能和运行模式,研制了一种三相工频逆变器装置,给出了工频逆变器装置的硬件框图和软件流程。设置MC3PHAC,让其产生50 Hz的SPWM波,实现电路方便简单、工作稳定,具有成本低、通用性强等特点。该智能单板控制可预先编程,不需要很高的开发成本和软件相关技术。

重庆主城区PhACs消耗的质量估算

运用固相萃取(SPE),高效液相色谱/串联质谱法(HPLC-MS/MS)技术检测了西南地区最大污水处理厂,重庆市鸡冠石污水厂进水中磺胺类、大环内脂类、喹诺酮类抗生素、止痛消炎类、抗癫痫类等8类21种PhACs(医药活性物质)的含量水平;采用污水厂进水中PhACs,并考虑人体内药物代谢动力学,以推算重庆地区的药物消耗量;推算出的氧氟沙星用量与实际用量能较好地吻合(相似度72.5%),但是PhACs的反推算用量需要更进一步地核实;通常所选抗生素的进水质量负荷和推算得出的人均消耗水平与发达国家报道的水平相当或者略高,但是其他类型的目标PhACs却相反。

智能三相感应电动机变频控制芯片MC3PHAC及其应用

本文详细介绍了Motorola公司最新推出的单片智能型电动机控制芯片MC3PHAC ,给出了具体的应用电路。并对Motorola嵌入式应用系统的主机控制软件PCMaster作了简单的介绍。

PHA聚合酶基因phaC的克隆及其在酿酒酵母中的表达

对聚羟基脂肪酸酯(PHA)聚合酶基因phaC进行克隆,并将其与穿梭质粒pYES2连接,构建了酿酒酵母表达质粒pYES2-phaC。测序验证后用LiAc/SSDNA/PEG方法将质粒转化至Saccharomyces cerevisiae INVSC1中,经SC-URA培养基筛选得到阳性转化子。由2%半乳糖培养基诱导表达后,提取细胞粗蛋白测定PHA聚合酶酶活力,结果表明,表达phaC基因的重组菌酶活力为2.45 U/mg,证明phaC基因在S.cerevisiae INVSC1中得到表达。

典型PhACs的检测分析方法研究进展

药理活性化合物PhACs(Pharmaceutically Active Compounds)被广泛用作人体(或动物)的治疗性医药产品,对人体的代谢、发育及生殖均有一定的影响,是一类具有严重危害的潜伏性、传递性污染物质。环境中PhACs污染的问题正为人们所重视。虽然大多数PhACs都以痕量浓度存在于环境中,但其长期暴露于人体和水生、陆生生物体,威胁着人类健康和生态环境,其造成的潜在威胁也可能被放大。PhACs种类繁多,在水环境中含量较低,尚不是水质标准中的常规污染物监测指标。随着检测仪器的改进,新的检测技术更加灵敏、适用性好,可对水环境中ng/L浓度水平的PhACs进行检测。但一些新技术仍存在一定的局限性和缺点,比如准确性不高、适用性不广、仪器耗材成本昂贵、操作要求高等。因此,完善现有预处理及检测技术,开发相对简便易操作的水环境中PhACs检测方法将成为该领域今后发展的主要任务。讨论了现有研究存在的问题,并对今后的研究进行了展望,为水污染控制提供参考。

重庆主城区水域典型PhACs污染水平及生态风险评估

采用固相萃取（SPE），高效液相色谱／串联质谱法（HPLC—MS／MS）检测分析了包括磺胺类、喹诺酮类、大环类酯类抗生素、心血管类、止痛剂类等8类PhACs（医药活性物质）在重庆主要地表水体长江、嘉陵江及花溪河的污染特征．结果表明，21种目标PhACs中，有14种在3条河流中均有检出，长江与嘉陵江的中P（PhACs）为1．1—35．5ng／L，花溪河P（PhACs）为10．3—445．6ng/L．莫西沙星、苯扎贝特、吉非罗奇、双氯芬酸、阿托伐他汀等5种目标PhACs仅在花溪河中检出，质量浓度为0．6—31．4ng／L．氨氯地平未检出．花溪河流量小且周边污水直排严重，除磺胺甲嘧啶、立痛定与辛伐他汀外，其他目标PhACs的质量浓度显著高于其他2条河流．参照MEC／PNEC（MEC为环境实测浓度，PNEC为生态风险阈值）风险综合评估体系评估了水环境中PhACs的生态风险，在检测出的目标PhACs中，磺胺甲恶唑、氧氟沙星、红霉素、降固醇酸的生态风险熵（RQ=MEC／PNEC）均大于0．1，百]能会对环境产生中等程度危害的生态风险，这与这4种PhACs的大量频繁使用密切相关．

复合改性生物砂滤池对突发PhACs痕量污染的去除效果分析

针对石英砂(OQS)表面特征及特性,进行表面形貌重构改性及表面涂覆改性,并根据涂覆改性差异,制备出亲水改性砂(IMS)、疏水改性砂(OMS)、阳离子改性砂(CMS)和氨基改性砂(AMS)。以实验室模拟二级处理出水为研究对象,考察以6种石英砂[4种复合改性砂、表面重构砂(对照1)及原始砂(对照2)]为核心的生物砂滤工艺对碳氮磷及突发药物活性物质(PhACs)的削减效果,分析了各组生物砂滤池微生物种群结构,并进行了生态风险评估。结果表明,各类工艺对常规污染物的去除率在24.22%~90.35%之间,CM-BSF对常规污染物的去除效果最好;6种生物砂滤工艺对5大类12种PhACs的去除率在7.9%~50.3%之间,改性砂滤工艺CM-BSF去除效果更好;高通量检测表明各组微生物物种高度相似,但丰度有差异,总体来说,具备PhACs降解能力的功能菌在复合改性石英砂覆膜生物样品中的丰度较高;通过生态风险评价方法分析,CM-BSF工艺出水产生生态风险最小。

水体中微界面对PhACs环境行为影响的研究进展

药物活性化合物(pharmaceuticals,Ph ACs)作为一种新型的环境污染物,其大量使用导致的环境残留和负面影响引起社会广泛关注。然而Ph ACs在水体中的环境行为不仅与自身特性有关,还受水体纳米颗粒物、胶体、悬浮颗粒物等界面的影响。通过对现有研究的分析,介绍了国内外Ph ACs的污染水平及检测方法,综述了Ph ACs微界面作用的主要影响因素及环境风险,并对后续Ph ACs微界面作用研究进行了展望。

Pd-ZnIn_(2)S_(4)-PVA-浮石负载型催化剂制备及其光催化降解水中PhACs性能

光催化是降解水体中痕量医药类物质卡马西平(CBZ)、双氯芬酸(DCF)等的有效技术,负载型光催化剂的开发可解决粉末催化剂不宜回收且易造成二次污染的问题。本研究采用水热合成-超声浸渍法制备浮石负载型催化剂,证实聚乙烯醇(PVA)粘合效果好于中性硅溶胶(ZS-30)、磷酸二氢铝(Al(H_(2)PO_(4))_(3))和聚乙二醇400(PEG-400),超声振荡测得0.1%Pd-ZnIn_(2)S_(4)-PVA-浮石催化剂的脱落率为4%。在碘镓灯和太阳光照射下,1.5 g·L^(-1)的0.1%Pd-ZnIn_(2)S_(4)-PVA-浮石催化剂对50 mL、初始质量浓度100μg·L^(-1)CBZ的降解率为100%和88.8%,CBZ的光催化降解遵循伪一阶动力学。PVA与0.1%Pd-ZnIn_(2)S_(4)之间以氢键连接,并成功为负载型光催化剂引入了晶格缺陷,溶液中的CBZ和DCF被催化剂表面光照产生的·OH和O^(2·-)自由基氧化降解。以上研究结果可为光催化技术净化水中痕量药物的实际应用提供参考。

三相交流电机控制芯片MC3PHAC及应用

文章介绍了摩托罗拉公司的三相交流电机控制芯片MC3PHAC的功能结构和运行模式,并提出了一种应用实例,阐述了该芯片的实用性以及如何实现复杂电机控制的原理。

8种典型PhACs在水中的赋存、生态风险及其对大型溞的影响

检测了8种典型的药物活性化合物(PhACs)在污水处理厂尾水受纳河流中的赋存情况.结果显示8种PhACs夏、冬两季总浓度范围分别为27.6~226.4 ng·L^-1和56.6~368.8 ng·L^-1,其中咖啡因的浓度最高(16.2~125.8 ng·L^-1),其次是罗红霉素(3.3~89.2 ng·L^-1)和布洛芬(3.6~59.2 ng·L^-1). 8种PhACs对绿藻、溞类和鱼类的总体生态风险(MRQ)在夏、冬两季分别为1.51、 0.08、 5.68和8.34、 0.22、 6.45,其中酮康唑、红霉素和布洛芬对藻类、溞类和鱼类MRQ的贡献率分别达到了49%、 85%和92%以上.从敏感物种来看,冬季绿藻对PhACs最为敏感,夏季鱼类对PhACs最为敏感.环境浓度下PhACs对大型溞21 d混合暴露实验结果显示:混合PhACs能够显著干扰大型溞的生长、生殖情况,显著提升了大型溞生殖能力和游泳活性,降低了心脏和胸肢跳动频率.

颗粒活性炭吸附去除尿中药活性化合物(PhACs)

研究了多组分背景下2种煤质颗粒状活性炭D1220、R08S对人尿中4种药活性化合物(PhACs)(1 mg/L)——苯扎贝特(BEZ)、卡马西平(CAR)、布洛芬(IBU)和美托洛尔(MET)——的吸附去除。结果表明,D1220(R08S)对4种PhAC的吸附均符合Freundlich等温式,均为优惠吸附;D1220(R08S)对各PhAC的吸附作用强弱顺序为BEZ>CAR>MET>IBU(BEZ>CAR>IBU>MET);PhACs平衡浓度小于3.01(0.91)μg/L时,D1220(R08S)对4种PhACs中的BEZ的吸附性能最好,平衡浓度大于3.01(1.93)μg/L时,D1220(R08S)则对MET的吸附性能最好;活性炭投加量为2 g/L时,D1220(R08S)对4种PhAC的去除率均在88%以上;总体吸附性能D1220优于R08S。

物化法强化厌氧消化去除污泥中PhACs的研究

针对污泥中典型的药理活性化合物(Ph ACs)——氯贝酸、三氯生、卡马西平和双氯芬酸,采用超声或快速机械转盘联合厌氧消化[中温:(35±2)℃、高温:(55±2)℃]工艺,通过GC/MS检测分析,研究其去除效果和特性。结果表明,当中温厌氧消化的污泥龄由10 d(高温厌氧消化系统为7 d)提高到20 d,中温厌氧消化系统对三氯生的去除率由44%提升至74%,高温厌氧消化系统则由52%提高到了74%;采用声能密度为0.05 W/m L的超声强化预处理30 min后,后置超声联合高温厌氧消化对目标物的去除率最高,分别为73%(氯贝酸)、76%(三氯生)、64%(卡马西平)、73%(双氯芬酸),尤其对通常认为较难去除的卡马西平,去除率较高温条件下的直接厌氧消化(去除率为56%)增加8%;采用前置和后置快速机械转盘(转速为100 r/min、处理2 h)与厌氧消化联合,对目标物的去除率有一定的提升,特别是后置转盘联合中温厌氧消化工艺,对双氯芬酸的去除率增加8%,去除率达到68%。

尾水受纳河流中PhACs在传统水相中的分布及环境风险

胶体介质不仅是水环境中污染物一个重要的"汇",还是污染物生物地球化学循环中至关重要的调控单元.本研究利用错流超滤、固相萃取、液相色谱质谱联用仪等前处理和分析检测方法调查了10种典型的药物活性化合物(PhACs)在污水厂尾水受纳河流传统水相中的分布和环境风险水平.结果表明,10种PhACs在水体溶解相和胶体中的含量分别达到27. 2～168. 1 ng·L^(-1)和164. 5～751. 1 ng·g^(-1).布洛芬(IPF)、罗红霉素(ROX)和红霉素(ETM)是两种介质中最为主要的污染物,三者污染浓度占到总浓度的80%以上.胶体对ROX、酮康唑、ETM和舍曲林都表现出较强的吸附性能,胶体/水分配系数(lg Kcol)在3. 2～4. 0之间,吸附率达到21. 1%～34. 5%. 10种PhACs对绿藻、溞和鱼的急、慢性毒性风险评估结果中,仅IPF对鱼类产生高等慢性风险,其余为中等风险及以下.值得注意的是,相对于急性风险来说,更多的PhACs对高等水生生物产生慢性不利影响.

HPLC测定触苯工人尿中苯基乙酰半胱氨酸的研究

ＨＰＬＣ测定触苯工人尿中苯基乙酰半胱氨酸的研究计时华龚立行朱心强何美景①马威②马新强②王莉③浙江医科大学卫生检测中心（杭州３１０００６）苯基乙酰半胱氨酸是近年来发现的苯在人体内的代谢产物之一。本文用高效液相色谱仪，紫外检测器（２５６ｎｍ）、ＲＰ—Ｏ...

纳滤膜去除内分泌干扰物/医药化合物研究进展

如何有效去除水中内分泌干扰物、医药活性化合物等有机微污染物的研究逐渐增加,其中,纳滤膜由于其较高的去除率得到了广泛关注。但由于纳滤膜去除这些物质的分离机理较为复杂,有时并不明确,给实验带来较大困难。文章总结了纳滤膜去除水中内分泌干扰物/医药活性化合物的典型应用及其三种分离机理——筛分作用、电荷作用、吸附作用,并对去除过程中所产生的问题和解决方案加以总结。为今后纳滤膜去除内分泌干扰物/医药活性化合物的研究提供参考依据。