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题名脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白结合肽序列的亲和筛选
被引量:1
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作者
曹虹
林琳
刘北一
陈丽丹
杨军
贡树基
李明
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机构
南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学教研室
南方医科大学基础医学院免疫学教研室
南方医科大学生物技术学院
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出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期101-106,共6页
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基金
东省自然科学基金重点项目(No.C020094)
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文摘
应用噬菌体展示肽库技术,以重组的脑膜炎大肠杆菌致病蛋白IbeA作为靶分子,经过吸附-洗脱-扩增-再吸附的亲和筛选,随机挑选亲和力强的噬菌体克隆,进行ELISA、竞争抑制实验和序列测定。结果显示,经3轮淘选后,间接ELISA鉴定得到高亲和性结合IbeA蛋白的15个阳性克隆。竞争抑制实验结果表明,游离IbeA蛋白能竞争抑制噬菌体结合肽克隆与固相包被的IbeA蛋白的结合,其抑制作用随游离IbeA蛋白浓度的降低而减弱。测序结果得到5种阳性噬菌体克隆展示肽序列。上述结果提示以脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白为靶筛选所获得的噬菌体12肽克隆,具有特异性,其结合肽序列呈现相对保守性。建立的从噬菌体随机肽库筛选IbeA蛋白结合肽的方法具有方便、灵活和高效可行的特点。
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关键词
噬菌体展示肽库
脑膜炎大肠杆菌ibea蛋白
结合肽
亲和筛选
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Keywords
phage display pepfide library, meningitic e. coli ibea protein, binding-pepfide, affinity screening
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分类号
R91
[医药卫生—药学]
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