用Phage88快速检测结核分枝杆菌

目的 建立一种特异性强、灵敏度高的致病性分枝杆菌的检测及药敏试验方法。方法 应用可表达荧光素酶的结核分枝杆菌噬菌体 Phage88,采用生物发光方法对不同细菌的发光反应和药敏试验进行检测。结果 Phage88特异地对各种分枝杆菌发光 ,对非分枝杆菌发光值很低 ,两者差异有显著性 ,不同的分枝杆菌发光值有差异 :卡介苗的发光值最高 ,结核杆菌的发光值最低 ;在含抗结核药物的培养基中 ,耐药结核杆菌的发光强度比非耐药结核杆菌强 ,其强度有明显差异。结论 用 Phage88噬菌体检测结核分枝杆菌是一种快速、敏感的检测和药敏试验方法。

大肠杆菌K88噬菌体的分离鉴定及其生物学特性

分离鉴定裂解性产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)K88噬菌体,并研究其生物学特性及裂菌效力。用双层平板法从猪场污水中分离噬菌体,通过透射电镜和酶切基因组对获得的噬菌体进行鉴定;同时测定了噬菌体最佳感染复数、一步生长曲线、酸碱稳定性、热稳定性等噬菌体的生物学特性及其体外裂菌效力。结果表明分离获得了一株产肠毒素性大肠杆菌K88强裂解性噬菌体,命名为PK88-4;其噬菌斑清晰透亮,周围无晕环;电镜显示:其头部呈正多面体对称,有可伸缩性尾部;核酸类型为双链DNA(基因组大小约60 kb);该噬菌体能耐受60℃左右高温、在pH值为5～10内效价稳定;最佳感染复数为0.01;潜伏期为10 min,暴发期为40 min,裂解量为40;在5 h内对培养液中的大肠杆菌杀灭率将近100%。PK88-4是一株强裂解性肌尾科大肠杆菌K88噬菌体,具有裂解周期短、杀菌能力强等特点,为畜牧业防治产肠毒素性大肠杆菌K88感染提供了新的思路。

销售重组噬菌体抗体系统,加速抗体工程

瑞典 Pharmacia 公司美国法人 Pharmacia P-L Biochemicals 公司与英国 Cambridge AntibodyTechnology 公司共同开发利用噬菌体的抗体片段的克隆化和表达系统"Recombiant Phage Antibo-dy System(RPAS)",年内开始商品化。预计在日本于93年4月开始销售此系统。由于"RPAS"的商品化,大大加速了用利基因重组技术开发抗体。

腾冲热海一株栖热菌裂解性噬菌体的分离及其特征

【目的】Thermus(栖热菌)属是嗜热细菌中比较古老的类群,本研究探索从腾冲热海热泉分离栖热菌噬菌体,并初步分析其特征。【方法】采用"双层平板法"从云南腾冲热海碱性热泉中分离纯化栖热菌噬菌体;对噬菌体及其宿主进行电镜形态观察,并进行噬菌体基因组限制性酶切片段多态性分析、噬菌体生理特征及蛋白组成分析。【结果】从腾冲热海热泉分离获得1株裂解性噬菌体,其宿主菌TC10通过16S rRNA基因序列分析鉴定为Thermus属菌株。此噬菌体为长尾型,头部直径67nm,尾管长837nm、宽10nm,最适感染温度为65℃-70℃,最适感染pH值为7.6,对氯仿不敏感,其形态与分离自俄罗斯勘察加半岛热泉的栖热菌噬菌体P23-45和P74-26有一定的差异,蛋白组成差异显著,为一株新的栖热菌噬菌体,命名为TTSP10(Tengchong Thermus Siphoviridae Bacteriophage)。