家兔肺冲洗的巨噬细胞吞噬作用与死亡时间的关系

应用流式细胞仪对不同死亡时间家兔肺冲洗的巨噬细胞吞噬荧光微球的功能进行定量测定。结果显示:随着死亡时间的推移,吞噬细胞的吞噬功能均有显著下降,各时间点吞噬细胞吞噬荧光微球的百分率和在每个吞噬细胞中的荧光微球的数目也是逐渐减少,这种巨噬细胞吞噬功能规律性的下降,有助于估计死亡时间。

流式细胞术分选小鼠肺泡巨噬细胞及鉴定

目的建立一种基于流式细胞术分离小鼠肺泡巨噬细胞(AM)的方法。方法小鼠肺脏在体外经胶原酶IV消化后获得单细胞悬液,再经CD11b和CD11c抗体标记,利用流式细胞仪分选获得CD11blowCD11c+AM,并经台盼蓝染色计数细胞活力,以及通过Real-time PCR和吞噬功能进行鉴定。结果流式细胞术分选小鼠肺脏单细胞悬液,获得CD11blowCD11c+细胞,纯度为(93±2)%,细胞活力为(80±5)%;Real-time PCR结果显示过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在该群细胞高表达(P<0.001);细胞吞噬功能实验结果显示该群细胞具有较好的吞噬活性,吞噬率约为10%。结论建立了一种基于流式细胞术分选获得AM的方法,该方法获得的细胞纯度高,细胞活性好,可用于功能性实验。